wprowadzenie

nerka jest jednym z najważniejszych narządów w organizmie. Nerka odgrywa rolę eliminatora, opiekuna, regulatora i producenta. Jako eliminator, nerki mają funkcję usuwania produktów przemiany materii, takich jak mocznik, kreatynina i amoniak., Jako opiekun i regulator, nerki powinny utrzymywać równowagę objętości płynu zewnątrzkomórkowego, stężenia elektrolitu nieorganicznego w płynie zewnątrzkomórkowym, osmolarności płynu zewnątrzkomórkowego, równowagi kwasowo-zasadowej i ciśnienia krwi. Ponadto nerki odgrywają rolę w produkcji witaminy D i hormonów (Scanlon and Sanders, 2003; Kelly, 2004; National Kidney Federation, 2003).

niewydolność nerek jest stanem, w którym nerki są uszkodzone, tak że nie mogą już prawidłowo pełnić funkcji wydalania., Warunki te mogą prowadzić do gromadzenia się produktów przemiany materii, które powodują toksyczność w organizmie. Ponadto niewydolność nerek jest często następstwem wielu innych zaburzeń fizjologicznych, takich jak choroby układu krążenia, niedokrwistość, osteodystrofia, kwasica itp. (Thye, 1998; Zdanowicz, 2003; CDC, 2010). Wiadomo, że częstość występowania niewydolności nerek w Stanach Zjednoczonych podwoiła się w ciągu ostatnich dwóch dekad. Każdego roku liczba ludności na świecie wzrasta o około 7-8%. Około 10% Stanów Zjednoczonych., populacja lub około 20 milionów ludzi cierpi na niewydolność nerek (National Kidney Federation, 2003; American Society of Nefrology, 2012). Incydent zwiększa się w populacji cukrzycy i nadciśnienia tętniczego (CDC, 2010).

choroba nerek jest na ogół nieodwracalna i może prowadzić do Stanów ESRD (End Stage Renal Diseases). Do tej pory nie ma specyficznych terapii w leczeniu choroby. Stosowane metody leczenia są głównie objawowe i tylko w celu zastąpienia czynności nerek, takie jak dializa lub przeszczep nerki., W związku z tym powinny one być wykonywane rutynowo, jednak są kosztowne i zapewniają odpowiedzi, które różnią się dla każdej osoby. Dlatego potrzebne są alternatywne terapie, aby zahamować postęp tej choroby. Alternatywna terapia powinna być bezpieczna i nie kosztowna, ponieważ te choroby wymagają długiego czasu trwania.

poprzednie badania wykazały, że jednorazowe użycie” binahong ” liści ekstraktów lub ekstraktów z jedwabiu kukurydzy może pomóc poprawić czynność nerek, które wcześniej zostały naruszone za pomocą środków nefrotoksycznych (Sukandar et al., 2011; Fadliah, 2008)., W związku z tym badanie to przetestowano pod kątem aktywności kombinacji ekstraktu przeciwko poprawie funkcji nerek. Celem tego badania było określenie, czy działania przewidziane przez połączenie dwóch ekstraktów są synergistyczne, addytywne lub antagonistyczne. Moc kombinacji w porównaniu do aktywności pojedynczej podeszwy mocy.

materiały i metody

Zwierzęta: samce szczurów Wistar w wieku 8-12 tygodni, ważące 175-225 g, były trzymane w zwykłych warunkach zarządzania w konwencjonalnym domu dla zwierząt Szkoły Farmacji, Bandung Institute of Technology., Szczury karmiono standardową dietą laboratoryjną i wodą ad libitum.

materiał roślinny: jedwab kukurydziany (Zea mays L.) liście dan binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) zostały zakupione od Manoko farm w Lembang, Bandung i zidentyfikowane przez ekspertów z School of Biological Science and Technology, Bandung Institute of Technology, Indonezja.

przygotowanie ekstraktu: zmielony proszek z jedwabiu kukurydzianego i liści binahong ekstrahowano etanolem metodą refluksową i filtrowano za pomocą papieru filtracyjnego Whatman., Całkowity ekstrakt odparowano za pomocą obrotowego parownika próżniowego (Buchi R-124) w celu uzyskania lepkiego ekstraktu, który określano jako ekstrakt etanolu.

procedura eksperymentalna: badanie przeprowadzono zgodnie z wytycznymi Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, Institute for Laboratory Animal Research. NRC, 1996 Washington, DC: National Academy Press.

szczury doświadczalne zostały podzielone na 6 grup, po 5 szczurów każda (stosuje się 8 szczurów w każdej grupie w 0. tygodniu; 3 szczury w każdej grupie zostały poddane sekcji po 7 dniach podawania gentamycyny i piroksykamu)., Wszystkie grupy, z wyjątkiem szóstej grupy, były leczone 100 mg kg-1 na dobę gentamycyny dootrzewnowo i 3,6 mg kg-1 na dobę piroksykamu doustnie przez 7 kolejnych dni w celu wywołania niewydolności nerek (Hosaka et al., 2004). Grupa 1 kontynuowała podawanie piroksykamu doustnie do 4. tygodnia leczenia. Grupa ta służyła jako grupa kontroli pozytywnej. W grupie 2 kontynuowano jednoczesne podawanie 75 mg kg-1 raz na dobę. dziennie ekstrakt z jedwabiu kukurydzianego i Piroxicam doustnie do 4 tygodnia terapii. Grupa ta służyła jako pojedyncza grupa testowa jedwabiu kukurydzianego. W grupie 3 podawano 100 mg kg-1 b. wt., dziennie binahong pozostawia ekstrakt i Piroxicam doustnie do 4 tygodnia terapii. Grupa ta służyła jako binahong single test group. W grupie 4 dostarczono 37,5 mg kg-1 b. wt. dzień-1 ekstrakt z jedwabiu kukurydzianego, 50 mg kg-1 b.wt. dzień-1 binahong liści ekstraktu i piroxicam do 4 tygodnia terapii. Grupa ta nazwana jako corn silk-binahong half dose combination test group, natomiast grupa 5, która nazwała, corn silk-binahong jedna dawka combination test group została podana 75 mg kg-1 b.wt. dzień-1 ekstrakt z jedwabiu kukurydzianego, 100 mg kg-1 b.wt. dzień – 1” binahong ” liści ekstraktu i piroxicam., Grupie 6 podawano normalny roztwór soli fizjologicznej i roztwór tragacantha jako placebo przez 7 kolejnych dni i 4 tygodnie leczenia. Tragakanth był używany jako nośnik piroksykamu i ekstraktu etanolu. Grupa ta służyła jako negatywna grupa kontrolna.

stężenie kreatyniny oznaczano w próbkach surowicy co tydzień. Dwadzieścia cztery godziny po 4. tygodniu leczenia szczury we wszystkich grupach zostały uśmiercone, a obie nerki zostały szybko usunięte. Nerki ważono i mocowano 10% buforowanym roztworem formaliny do osadzenia w parafinie w celu obserwacji histopatologicznej za pomocą mikroskopii świetlnej., Pozostałe nerki natychmiast i dokładnie przemyte lodowatym fizjologicznym roztworem soli fizjologicznej. Tkankę homogenizowano w zimnym fosforanie buforowym (pH 7,4) w homogenizatorze przez 10 minut (stężenie wynosiło 20%). Homogenit odwirowywano przy 3000 obr. / min przez 10 min, a supernatant był używany do oznaczania aktywności MDA (malondialdehydu), katalazy i SOD (dysmutazy ponadtlenkowej).

oznaczanie poziomu kreatyniny w surowicy: poziom kreatyniny w surowicy oznaczano za pomocą zestawów odczynników HumanR według metody kinetycznej Jaffè (Lustgarten and Wenk, 1972)., Absorbancję mierzono przy 546 nm za pomocą spektrofotometru.

oznaczanie poziomu mocznika w surowicy: poziom mocznika w surowicy mierzono za pomocą spektrofotometru przy użyciu zestawu enzymatycznego urease (Wilcox et al., 1966). Zasada działania tej metody polega na hydrolizie mocznika w obecności wody i ureazy w celu wytworzenia amoniaku i dwutlenku węgla. Jony amoniaku reagują z podchlorynem i są katalizowane przez nitroferrycyjanek, aby dać ciemnoniebieski / zielony barwnik. Barwa barwnika została zmierzona przy 578 nm. Intensywność koloru jest proporcjonalna do stężenia mocznika w próbce.,

oznaczanie lipidperoksydacji za pomocą pomiaru substancji reaktywnych kwasu tiobarbiturowego z supernatantu nerkowego: w 1 mL reakcji błota inkubowano 0,58 mL buforu fosforanowego (0,1 M, pH 7,4), 0,2 mL supernatantu nerkowego (20% M/v), 0,2 mL kwasu askorbinowego (100 mM) i 0,02 mL chlorku żelazowego (100 mM) w temperaturze 37°C przez 1 h. zatkane przez dodanie 1 ml kwasu trichlorooctowego (TCA) (10% M/V), następnie dodano 1 ml kwasu Tiobarbiturowego (TBA) (0,67% M/V) i wszystkie probówki były przechowywane we wrzącej łaźni wodnej przez 20 minut., Rury zostały przesunięte do łaźni lodowej i wirowane z prędkością 3000 obr. / min przez 10 min. Ilość TBARS utworzonych w każdej z próbek została oceniona przez pomiar absorbancji supernatantu przy 535 nm w połączeniu z odczynnikiem ślepym bez homogenatu tkankowego (Wright et al., 1981).

oznaczanie aktywności katalazy z supernatantu nerki: aktywność katalazy została zbadana przez Clairborne ' a (1985). Mieszanina testowa składała się z 1,95 mL bufora fosforanowego (0,05 M, pH 7), 1 mL H2O2 (0,019 M) i 0,05 mL supernatantu nerkowego (20% M/v)., Zmiany absorbancji rejestrowano przy 280 nm przez 2 min z interwałem 60 s przy użyciu spektrofotometru.

oznaczanie aktywności SOD z supernatantu nerkowego: aktywność SOD w homogenicie oszacowano za pomocą zestawu odczynnika otrzymanego z laboratorium Sigma-Aldrich.

oznaczanie wskaźnika nerki: stosunek masy nerek do masy ciała (wskaźnik nerki) został obliczony przez porównanie masy nerek z masą ciała szczura.

ocena histologiczna: dwadzieścia cztery godziny po 4.tygodniu leczenia szczury we wszystkich grupach zostały uśmiercone i szybko usunięto obie nerki., Nerki każdego zwierzęcia były utrwalone w buforowanej formalinie. Nerki zostały przetworzone i osadzone w wosku parafinowym. Do badania mikroskopowego wybarwiono trzy części parafinowe o grubości mikromacierzy hematoksyliną i eozyną.

analiza statystyczna: dane zostały przeanalizowane przy użyciu t-test i jednokierunkowej ANOVA, a następnie post-hoc test LSD przy użyciu pakietów SPSS (wersja 15.0). Wartości p<0.05 uznano za znaczące.,

wyniki

wpływ ekstraktu na poprawę czynności nerek wywołaną przez gentamycynę-piroksykam niewydolność nerek: oznaczono cztery parametry czynności nerek, w tym markery biochemiczne (stężenie kreatyniny i mocznika w surowicy), poziomy stresu oksydacyjnego, wskaźnik narządu i histologię nerek.,

wpływ na stężenie kreatyniny w surowicy i przekrój histopatologiczny po 7 kolejnych dniach podawania gentamycyny-piroksykamu: podawanie gentamycyny i piroksykamu przez 7 kolejnych dni każdej z badanych grup może zwiększyć stężenie kreatyniny 2-3 razy znacząco w pierwszym tygodniu (tydzień 1) w porównaniu z grupą kontrolną z ujemnym wynikiem (ryc. 1). Nie stwierdzono istotnych różnic pomiędzy indukowanymi grupami., Ustalenia dotyczące parametrów biochemicznych zostały również poparte wynikami histopatologicznymi, które wykazały zmiany w profilu struktury nerek zarówno w korze mózgowej, jak i rdzeniowej (rys. 2, 3). Wyraźnie stwierdzono zwyrodnienie kanalików, zanik kłębuszków, powstawanie wakuoli i krwiomocz w kilku miejscach w przekroju grup wywołanych. Zwiększenie stężenia kreatyniny, a następnie poważniejsze uszkodzenie, które można zaobserwować na przekroju mikroskopowym.,

wpływ ekstraktu na stężenie kreatyniny w surowicy: w 2. tygodniu, ogólnie w każdej z indukowanych grup (w tym z grupy kontrolnej pozytywnej) wystąpiło zmniejszenie stężenia kreatyniny (jest to przewidywane ze względu na homeostazę organizmu). Jednakże stężenie kreatyniny w grupie kontrolnej z wynikiem dodatnim było wyższe i znacząco różniło się od grupy badanej i grupy kontrolnej z wynikiem ujemnym., W grupie kontrolnej z pozytywnym wynikiem nie stwierdzono istotnych różnic pomiędzy stężeniem kreatyniny w tygodniu leczenia (tydzień 2, 3 4 i 5) w stosunku do wartości wyjściowych (stężenie kreatyniny w surowicy w 1.tygodniu). W każdej z badanych grup, pojedynczo lub w skojarzeniu, wystąpiło zmniejszenie stężenia kreatyniny, które było istotnie inne w porównaniu z grupą kontrolną z pozytywną wartością początkową dla każdej grupy. Nie stwierdzono istotnych różnic między grupami badanymi., Na podstawie tych danych można zauważyć, że ekstrakt w kombinacji pół dawki może powodować efekty mniej lub bardziej porównywalne z pojedynczą formą ekstraktu. Podanie jednej kombinacji dawek nie zapewniało istotnej lepszej aktywności niż pojedyncza kombinacja ekstraktu i pół dawki. Widać to wyraźnie na Rys. 1.

wpływ ekstraktu na poziom mocznika w surowicy: podobne profile stwierdzono również na drugim parametrze, poziomie mocznika w surowicy (rys. 4).

rys., 1: Wpływ podawania ekstraktu, pojedynczego i złożonego, na stężenie kreatyniny w każdym tygodniu; *różny znacząco w stosunku do pozytywnej grupy kontrolnej (p<0.05); **różny znacząco w stosunku do negatywnej grupy kontrolnej (p<0.05); a: różny znacząco w stosunku do pozytywnej grupy kontrolnej (p<0.05); 45c6c8736e”>0.10); B: różni się znacząco w porównaniu z negatywną grupą kontrolną (p<0.10); C: różni się znacząco w porównaniu z samą wartością pierwszego tygodnia (p< 0.,

rys. 2 (a-f): profil histopatologiczny kory nerkowej tydzień po podaniu induktora w powiększeniu 100x; (a) pozytywna grupa kontrolna, (B) grupa testowa jedwabiu kukurydzy, (c) grupa testowa Binahonga, (d) grupa testowa kombinacji jedwabiu kukurydzy binahong pół dawki, (e) grupa testowa kombinacji jedwabiu kukurydzy binahong jedna dawka oraz (f) negatywna grupa kontrolna., Arrow sign (→) showed glomerular atrophy, whereas, (*) showed vacuolization

Fig., 3(a-f): Histopathological profile of kidney medulla one week after inductor administration on 100x magnification; (a) Positive control group, (b) Corn silk test group, (c) Binahong test group, (d) Corn silk binahong half dose combination test group, (e) Corn silk binahong one dose combination test group and (f) Negative control group

Fig., 4: Wpływ podawania ekstraktu, pojedynczego i złożonego, na stężenie mocznika w każdym tygodniu; *różny znacząco w stosunku do pozytywnej grupy kontrolnej (p<0.05); **różny znacząco w stosunku do negatywnej grupy kontrolnej (p<0.05); a: różny znacząco w stosunku do pozytywnej grupy kontrolnej (p<0.05); 45c6c8736e”>0.10); B: różni się znacząco w porównaniu z negatywną grupą kontrolną (p<0.10); C: różni się znacząco w porównaniu z samą wartością pierwszego tygodnia (p< 0.,(P<0, 10)

uszkodzenie nerek we wszystkich indukowanych grupach spowodowane podaniem gentamycyny i piroksykamu zostało potwierdzone zwiększeniem stężenia mocznika w surowicy w 1.tygodniu. Stężenie mocznika w surowicy krwi w grupie kontrolnej z dodatnim wynikiem zmniejszało się w kolejnych tygodniach, ale ulegało zwiększeniu w 5.tygodniu. Tendencja nie została stwierdzona w badanych grupach, którym podano ekstrakt.,

wpływ ekstraktu z liści na badanie histopatologiczne nerek: wyniki mikroskopowego przekroju wykazały poprawę struktury nerek po podaniu ekstraktu. Chociaż poprawę zaobserwowano również w grupie kontrolnej z wynikiem dodatnim, każdy z mikroskopijnych przekrojów badanej grupy wykazywał lepsze wyniki i zaczął zbliżać się do grupy kontrolnej z wynikiem ujemnym, zwłaszcza w części rdzenia (rys. 5, 6).
rys., 6 (a-f): profil histopatologiczny rdzenia nerkowego w 5.tygodniu przy powiększeniu 100x; (a) grupa kontrolna dodatnia, (b) grupa testowa jedwabiu kukurydzianego, (c) grupa testowa Binahonga, (d) grupa testowa kombinacji jedwabiu kukurydzianego, (e) grupa testowa kombinacji jedwabiu kukurydzianego, (f) grupa kontrolna ujemna

wpływ ekstraktu na poziom tbars: w tym badaniu stwierdzono wzrost ilości tbars w grupie indukowanej przez gentamycynę i piroksykam., Każda grupa badana, której podano ekstrakt, miała mniejszą ilość TBARS niż i znacząco różniła się od grupy kontrolnej (rys. 7).

wpływ ekstraktu na aktywność katalazy: pozytywna grupa kontrolna odnotowała znacznie niższy poziom katalazy w porównaniu do negatywnej grupy kontrolnej. Grupa, która była leczona ekstraktem, odnotowała znacznie podwyższony poziom katalazy, co wskazuje na przywrócenie poziomu katalazy bliżej normalnych, nieleczonych zwierząt (rys. 8).

wpływ ekstraktu na aktywność SOD: Grupa wywołana niewydolnością nerek stwierdzono zmniejszenie aktywności SOD., Leczenie ekstraktem spowodowało znaczny wzrost poziomu tych enzymów (rys. 9).

wpływ ekstraktu na indeks narządu: dodatnia grupa kontrolna miała najwyższy indeks nerkowy wśród pozostałych grup i była znacząco różna w porównaniu do ujemnej grupy kontrolnej.

rys. 7: Wpływ podawania ekstraktu, pojedynczego i złożonego, w stosunku do poziomu TBARS w tygodniu 5; * różny znacząco w stosunku do pozytywnej grupy kontrolnej (p<0.,05); **Different significantly against negative control group (p<0.05)

Fig. 8: Effect of extract administration, single and combination, against catalase activity in week 5; a Different significantly against positive control group (p<0.10)

Fig., 9: Effect of extract administration, single and combination, against SOD activity in week 5; *Different significantly against positive control group (p<0.05); **Different significantly against negative control group (p<0.05)

Fig., 10: Wpływ podawania ekstraktu, pojedynczego i skojarzonego, na indeks nerkowy w 5.tygodniu; **różnił się znacząco w stosunku do ujemnej grupy kontrolnej (p< 0.05)

grupa otrzymująca ekstrakt miała niższy indeks nerkowy w porównaniu z grupą kontrolną pozytywną i nie było różnic między grupami badanymi (rys. 10).,

dyskusja

wyniki, które wykazały zwiększenie stężenia kreatyniny i mocznika w pierwszym tygodniu leczenia, wspierały wcześniejsze badania, które sugerowały, że szczurze modele niewydolności nerek mogą być tworzone szybko przez podanie kombinacji gentamycyny i piroksykamu (Sukandar et al., 2011). Dawki podawano przez 7 dni, w czasie trwania, jak donoszono, powodowały uszkodzenie nerek., Zwiększenie poziomu kreatyniny wskazało, że induktor, zwłaszcza gentamycyna, może powodować zmniejszenie funkcji filtracji kłębuszkowej, podczas gdy wyniki histologiczne wykazały, że gentamycyna daje duży wpływ na kanaliki, zwłaszcza bliższych kanalików (Rybak et al., 1987; Dehghani et al., 2011; Ozbek i in., 2009). Uszkodzenie kanalików powstało prawdopodobnie w wyniku apoptozy, która jest zasadniczo jednym z ważnych procesów utrzymania homeostazy., W tym procesie zarówno lizosomy, jak i mitochondria wysyłają sygnały, które powodują pękanie błon i uwalnianie hydrolaz kwasowych lizosomalnych (De Souza et al., 2009; Denamur i in., 2008).

profil stężenia kreatyniny w grupie badanej kombinacji wykazuje tendencję do działania ekstraktów w sposób addytywny i zależny od czasu. W związku z tym poprawę czynności nerek można osiągnąć poprzez przedłużenie okresu stosowania zamiast zwiększania dawki.,

wzrost poziomu mocznika był wyraźnie widoczny w piątym tygodniu leczenia, co potwierdzono ciężkim poziomem uszkodzenia nerek (Parlakpinar et al., 2005). Wzrost wskazywał, że szkody prawdopodobnie pozostaną w grupie kontroli pozytywnej. Tendencja wzniesień nie została stwierdzona w badanych grupach, którym podano ekstrakty. Wynik ten potwierdził działanie ochronne nerek zapewniane przez ekstrakt.

, Wysoki wskaźnik wartości dodatniej grupy kontrolnej i grupy badanej może być spowodowany występowaniem obrzęku i nagromadzenia płynu w patologicznej przestrzeni pozasłonecznej, zwłaszcza w obrębie śródstopia, z powodu martwicy kanalików (Meliani, 2006; Zulkarnain, 2009), a także może być spowodowany jednocześnie proliferacją i apoptozą komórek mezangialnych. Te mezangial komórki są specjalne komórki, które znajdują się w okolicy naczyń krwionośnych w nerkach. W jednym z badań, zarówno In vivo, jak i in vitro, wykazano, że gentamycyna stymulowała skurcz i proliferację komórek mezangialnych., Gentamycyna była również w stanie zwiększyć ekspresję lub aktywację białka proapoptosis tak, że może powodować pęknięcie błony lizosomalnej i uwalnianie hydrolaz kwasowych, które przyczyniły się do apoptozy i martwicy proksymalnych komórek rurowych (De Souza et al., 2009; Martinez-Salgado et al., 2004).

, Jednak ekstrakt był w stanie wykazać poprawę parametrów biochemicznych i histologicznych, więc możliwe było, że ekstrakt mógł zmaksymalizować wydajność komórek mezangialnych, które nadal funkcjonowały.

inne parametry analizowane w tym badaniu są związane ze stresem oksydacyjnym. Stres oksydacyjny jest nienormalnym stanem, w którym zwiększony produkt utleniający nie może być przeciwstawiony zwiększonej produkcji przeciwutleniaczy. Brak sprawia, że równowaga ciała nie są w bezpiecznej strefie (Rico et al., 2006; Kandemir i in., 2011).,

różne badania wykazały udział stresu oksydacyjnego w wielu chorobach zwyrodnieniowych, z których jedną jest niewydolność nerek (Polat et al., 2006). Sama mocznica powoduje zwiększoną produkcję wolnych rodników, a nawet procedura hemodializy może czasami zwiększyć ilość rodników (Galle, 2001). Te rzeczy powodują większe ryzyko zachorowania i prawdopodobieństwo wystąpienia innych chorób pacjenta z niewydolnością nerek w porównaniu do zwykłych pacjentów bez niewydolności nerek (Luciak, 2004)., Istnieje kilka parametrów, które można wykorzystać do przewidywania poziomu stresu oksydacyjnego u pacjentów z niewydolnością nerek, takich jak sprzężony Dien, enzymy przeciwutleniające, produkty peroksydacji metilguanidyny jako kreatyniny, aktywność przeciwutleniająca w surowicy i peroksydacji lipidów (Gotoh et al., 1997).

stwierdzono, że rodniki tlenowe, takie jak anion ponadtlenkowy, nadtlenek wodoru i rodniki hydroksylowe, odgrywały rolę w patofizjologii gentamycyny. Rodniki tlenowe powodują szybkie zmiany w składzie lipidów membranowych lub lepiej znane jako peroksydacja lipidów., Ponadto komórki szybko tracą równowagę osmotyczną, powodując wzrost wewnątrzkomórkowego poziomu wapnia. Prowadzi to do obrzęku / obrzęk komórek, które są wczesnym objawem uszkodzenia, które jest nadal odwracalne (Kadkhodaee et al., 2005; Derakhshanfar et al., 2007). Z drugiej strony gatunki radykalne mogą zużywać większość wydajności enzymu, takich jak dysmutaza ponadtlenkowa (SOD) i katalaza, zmniejszając w ten sposób aktywność tych enzymów (Abdel-Raheem et al., 2010).,

peroksydację lipidów można zdefiniować jako oksydacyjne uszkodzenie struktur lipidowych, które zawierają podwójne wiązania między węglami. Inna definicja ujawnia, że peroksydacja lipidów jest procesem związanym z wolnymi rodnikami, procesem, który nie jest kontrolowany i może działać w sposób ciągły, powodując zakłócenia na błonie, lipidach i innych składnikach komórkowych. Peroksydacja lipidów, która występuje w sposób ciągły, może być głównym czynnikiem w patogenezie powikłań niewydolności nerek (Shanmugam et al., 2009)., Jak stwierdzono w poprzednim akapicie, w organizmie człowieka struktura lipidów jest powszechnie spotykana w błonach komórkowych. To sprawia, że bardziej złożone jest to, że błona staje się pierwszą obroną dla każdej komórki, takiej jak mitochondria, osocze, retikulum endoplazmatyczne, lizosomy, peroksysomy i inne. Dodatkowo metabolity powstałe między procesami utleniania mogą powodować niekorzystne skutki w innych miejscach niż miejsce pochodzenia utleniania (Devasagayam et al., 2003).,

jednym z rezultatów peroksydacji lipidów są związki aldehydów, które mogą reagować z kwasem, tworząc różowy tiobarbiturat, który można łatwo wykryć za pomocą spektrofotometru. Takie związki są często określane jako związki reaktywne kwasu tiobarbiturat lub TBARS (substancje reaktywne kwasu tiobarbiturowego). TBARS jako jeden z produktów peroksydacji lipidów może być stosowany jako odniesienie do przewidywania, ile jest produkcji rodników. W tym badaniu stwierdzono zwiększenie ilości TBARS indukowanych przez gentamycynę i piroksykam., Każda grupa badana ma mniej niż ilość TBARS i znacznie różni się od grupy kontrolnej z pozytywnym wynikiem (rys. 7).

wydaje się, że niewydolność nerek ma tendencję do osłabienia systemu obrony przed wolnymi rodnikami. Powoduje to dużą ilość wolnych rodników, które mają wpływ na wysoki poziom uszkodzeń tkanek. Fakty te potwierdzają mikroskopijne wyniki przekrojów, które wykazują wyższy poziom martwicy kanalików w grupie kontrolnej z wynikiem pozytywnym niż w grupie badanej lub w grupie kontrolnej z wynikiem negatywnym., Wiele dowodów sugeruje, że nadmierna ilość wolnych rodników z powodu niewydolności nerek może pogorszyć chorobę i zwiększyć ryzyko powikłań. Z tych wyników wydaje się prawdopodobne, że ekstrakt ma aktywność przeciwutleniającą, ponieważ może obniżyć poziom peroksydacji lipidów w badanej grupie. Spadek może być spowodowany przez aktywność membrany lipid protection, naprawy tkanki, która jest dostarczana przez ekstrakty, lub wolne rodniki tłumienia, które zmniejszają bezpośrednio ilość wolnych rodników znalezionych tak, że nie ma rodników, które mogą atakować błony lipidowe., Co więcej, Wyniki te potwierdzają wcześniejsze dane wykazujące, że podawanie produktu złożonego nie daje większej aktywności niż pojedyncze użycie ekstraktu (Prasanna and Purnima, 2011).

z Fot. 7, można zauważyć, że poziom peroksydacji lipidów w każdej badanej grupie jest niższy niż negatywna grupa kontrolna, chociaż tylko grupa testowa jedwabiu kukurydzianego, która znacznie różniła się w porównaniu do negatywnej grupy kontrolnej. Pokazuje, że ekstrakt może poprawić odporność błony komórkowej na utleniacz, dzięki czemu można zapobiec uszkodzeniom tkanek lub je skorygować., Wyższy poziom oporności powoduje niższe stężenie kreatyniny w surowicy w badanej grupie w porównaniu do jej wartości początkowej i może naśladować stężenie kreatyniny w surowicy w grupie kontrolnej ujemnej.

system ochrony przed rodnikami tlenowymi lub produktami utleniania lipidów, białek i DNA zapewnia enzymy antyoksydacyjne, takie jak SOD i katalaza. Innymi słowy, SOD i katalaza są dwoma głównymi przykładami radykalnych enzymów bojowych in vivo. Stwierdzono zmniejszenie aktywności obu enzymów, SOD i katalazy, w stanie niewydolności nerek., W rezultacie zwiększono liczbę anionów ponadtlenkowych i nadtlenków wodoru do produkcji rodników hydroksylowych. W końcu Rodnik hydroksylowy może zainicjować peroksydację lipidów. Proces ten może zwiększyć poziom uszkodzenia nerek (Palani et al., 2009). SOD może katalizować dysmutazę anionów ponadtlenkowych do nadtlenku wodoru, które następnie są dezaktywowane przez katalazę do wody (Kim et al., 2012). Oznacza to, że w stanie stresu oksydacyjnego nastąpił spadek aktywności lub inaktywacji systemu obrony antyoksydacyjnej (Olagunju et al., 2009; Palani et al., 2009)., Zmniejszona aktywność enzymu czasami jest kompensacją zwiększonej liczby rodników. Innymi słowy, wzrost liczby rodników zmusza układ odpornościowy do wydania więcej pracy w celu wyeliminowania utleniacza. Może jednak wywołać szereg innych, bardziej szkodliwych skutków (Geo Vigila and Baskaran, 2011). Ekstrakt, samodzielnie lub w połączeniu, może zwiększyć aktywność SOD i enzymu katalazy w porównaniu do pozytywnej grupy kontrolnej (rys. 8, 9).,

wyniki tego badania potwierdziły, że podawanie induktorów, gentamycyny i piroksykamu, może zwiększyć peroksydację lipidów w nerkach, która charakteryzowała się zwiększoną aktywnością TBARS i zmniejszoną aktywnością enzymu antyoksydacyjnego, chociaż mogą wystąpić również inne mechanizmy uszkodzenia. Istniała tendencja, że albo jedwab kukurydziany lub ekstrakty binahong mają działanie przeciwutleniające, które mogą chronić nerki przed nefrotoksycznością. Wykazano, że przeciwutleniacze mają zdolność zapobiegania lub naprawiania uszkodzeń nerek., Powyższe dane wskazywały, że ekstrakt może pomóc poprawić stan przeciwutleniaczy w szczurzym modelu niewydolności nerek.

dane te potwierdzają wyniki wcześniejszych badań dotyczących jedwabiu kukurydzianego. Różne badania wykazały aktywność przeciwutleniającą jedwabiu kukurydzianego, która może być spowodowana wysoką zawartością związków flawonoidowych lub fenolowych (Ebrahimzadeh et al., 2008; Alam, 2011; Bhaigyabati et al., 2011). W związku z ekstraktem przeciwutleniającym, ekstrakt z jedwabiu kukurydzianego może być również stosowany w leczeniu innych chorób związanych ze stresem oksydacyjnym.,

podczas gdy binahong opuszcza, niewiele publikacji naukowych, które ujawniają o działaniach związanych z przeciwutleniaczami. Niektóre badania ujawniają aktywność binahong jako przeciwbakteryjne i gojenie się ran (Astuti et al., 2011). Możliwe jest jednak, że binahong ma również aktywność przeciwutleniającą, biorąc pod uwagę flawonoid zawarty w ekstrakcie.

flawonoidy są związkami fenolowymi występującymi w wielu roślinach. Rośliny używane do stosowania flawonoidów w celu ochrony przed uszkodzeniami oksydacyjnymi poprzez hamowanie lub redukcję wolnych rodników i reaktywnych form tlenu, które powstają w wyniku ekspozycji na słońce., Jest to spowodowane obecnością sprzężonych struktur pierścieniowych i grup hydroksylowych. Dlatego sugeruje się, że wysokie flawonoidy mają rolę w zapobieganiu powstawaniu rodników tlenowych powodujących cytotoksyczność i uszkodzenie tkanek u ludzi (Anila and Vijayalakshmi, 2003).

aktywność tłumienia stresu oksydacyjnego może być również generowana przez interakcję między składnikami zawartymi w ekstrakcie., Niektóre badania wykazują, że Izolaty zawierające alkaloid mają działanie przeciwutleniające i mogą poprawić czynność wątroby wcześniej uszkodzoną przez stosowanie CCl4 (zarówno jedwab kukurydziany, jak i ekstrakt z liści “binahong” zawierają alkaloid). W tym przypadku CCl4 powodują uszkodzenia poprzez produkcję wolnych rodników, więc istnieją podobieństwa, które można zracjonalizować na warunkach tego badania (Maiza-Benabdesselam et al., 2007; Singh et al., 2010; Parthasarathy et al., 2009; Ravikumar i Gnanadesigan, 2011). Przewiduje się również, że obecność substancji garbnikowych w jedwabiu kukurydzianym może zapewnić ochronę przed uszkodzeniami., Substancje garbnikowe mają działanie ściągające, które może powodować wytrącanie się białek w błonie komórkowej, które tworzą barierę, która zapobiega atakowi wolnych rodników.

zarówno jedwab kukurydziany („Zea mays L.”), jak i binahong („Anredera cordifolia” (Ten.) Steenis) wyciągi z liści mogą poprawić czynność nerek w szczurzym modelu niewydolności nerek. Połączenie połowy dawki każdego ekstraktu wykazało efekty porównywalne lub nieco lepsze niż pojedynczy ekstrakt wykazujący co najmniej efekt addytywny., Redukcja stresu oksydacyjnego dostarczanego przez poszczególne ekstrakty i ich kombinacje może być skorelowana z mechanizmem naprawy niewydolności nerek.