Úvod

ledvina je jedním z životně důležitých orgánů v těle. Ledvina hraje roli eliminátora, Správce, regulátora a producenta. Jako eliminátor má ledvina funkci odstraňování metabolických odpadních produktů, jako je močovina, kreatinin a amoniak., Jako správce a regulátor by ledviny měly udržovat rovnováhu objemu extracelulární tekutiny, koncentraci anorganického elektrolytu v extracelulární tekutině, osmolaritu extracelulární tekutiny, acidobazickou rovnováhu a krevní tlak. Kromě toho ledviny hrají roli při produkci vitamínu D a hormonů (Scanlon a Sanders, 2003; Kelly, 2004; Národní federace ledvin, 2003).

selhání ledvin je stav, kdy je ledvina poškozena, takže již nemůže správně plnit funkci vylučování., Tyto podmínky mohou vést k akumulaci metabolických odpadních produktů, které způsobují toxicitu v těle. Kromě toho je selhání ledvin často následováno řadou dalších fyziologických poruch, jako jsou kardiovaskulární onemocnění, anémie, osteodystrofie, acidóza atd. (Thye, 1998; Zdanowicz, 2003; CDC, 2010). Je známo, že výskyt selhání ledvin ve Spojených státech se během posledních dvou desetiletí zdvojnásobil. Každý rok se ve světové populaci zvyšuje přibližně o 7-8%. Přibližně 10% USA., populace nebo asi 20 milionů lidí trpí selháním ledvin (Národní federace ledvin, 2003; americká Nefrologická společnost, 2012). Incidence se zvyšuje v populaci diabetiků a hypertenze (CDC, 2010).

onemocnění ledvin je obecně nevratné a pravděpodobně povede k ESRD (onemocnění ledvin v konečném stadiu). Až dosud neexistují žádné specifické terapie k léčbě onemocnění. Použitá léčba je hlavně symptomatická a pouze pro nahrazení funkce ledvin, jako je dialýza nebo transplantace ledvin., V důsledku toho by měly být prováděny rutinně, jsou však nákladné a poskytují odpovědi, které se u každé osoby liší. Proto jsou zapotřebí alternativní terapie k inhibici progrese této nemoci. Alternativní terapie by měla být bezpečná a ne drahá, protože tato léčba onemocnění vyžaduje dlouhou dobu trvání.

předchozí výzkum ukázal, že jeden použít buď “binahong” listy výtažky nebo kukuřice hedvábí, extrakty by mohly pomoci zlepšit funkci ledvin, která byla dříve manipulováno pomocí nefrotoxických látek (Sukandar et al., 2011; Fadliah, 2008)., Proto byla tato studie testována na aktivitu kombinace extraktu proti zlepšení funkce ledvin. Účelem této studie bylo zjistit, zda činnosti poskytované kombinací těchto dvou extraktů jsou synergické, aditivní nebo antagonistické. Síla kombinace ve srovnání s aktivitou jediné výkonové podrážky.

MATERIÁLY A METODY,

Zvířata: Samec Wistar potkanů ve věku 8-12 týdnů, o hmotnosti 175-225 g, byly vedeny za normálních podmínek řízení v konvenčních zvířat, domu, Školy, Lékárny, Bandung Institute of Technology., Krysy byly krmeny standardní laboratorní stravou a vodou ad libitum.

rostlinný materiál: kukuřičné hedvábí (Zea mays L.) dan Binahong listy (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) byly zakoupeny od Manoko farmě v Lembang, Bandung a identifikovat podle odborníků ve Škole Biologických Věd a Technologií, Bandung Institute of Technology, Indonésie.

Příprava extraktu: broušený prášek z kukuřičného hedvábí a listů binahong byl extrahován ethanolem pomocí refluxní metody a filtrován přes filtrační papír Whatman., Celkový extrakt se odpaří pomocí rotačního vakuového výparníku (Buchi R-124) za účelem získání viskózního extraktu, který se označuje jako ethanolový extrakt.

experimentální postup: tato studie byla provedena podle Příručky pro péči a používání laboratorních zvířat, Institutu pro laboratorní výzkum zvířat. NRC, 1996 Washington, DC: National Academy Press.

Experimentální krysy byly rozděleny do 6 skupin, 5 potkanů každého (to je použito 8 potkanů v každé skupině v 0. týdnu, 3 krysy, pro každou skupinu byly vyjmuty po 7 dnech podávání gentamicinu a piroxikam)., Všechny skupiny, kromě šesté skupiny, byli léčeni 100 mg kg-1 za den gentamicinu intraperitoneálně a 3,6 mg. kg-1 za den piroxikamu perorálně po dobu 7 po sobě jdoucích dnů, aby vyvolat selhání ledvin (Hosaka et al., 2004). Skupina 1 pokračovala v podávání piroxikamu perorálně až do 4. týdne léčby. Tato skupina sloužila jako pozitivní kontrolní skupina. Skupina 2 pokračovala současným příjmem 75 mg kg-1 b.wt. za den extrakt z kukuřičného hedvábí a Piroxicam perorálně až do 4. týdne léčby. Tato skupina sloužila jako zkušební skupina kukuřičného hedvábí. Skupina 3 byla podávána se 100 mg kg-1 b. wt., za den binahong opouští extrakt a Piroxicam perorálně až do 4. týdne léčby. Tato skupina sloužila jako binahong single testovací skupina. Skupina 4 byla dodána s 37,5 mg kg-1 b. wt. den-1 extrakt z kukuřičného hedvábí, 50 mg kg-1 b.wt. den-1 binahong listy extrakt a piroxicam až do 4. týdne léčby. Tato skupina pojmenovaná jako corn silk-binahong poloviční dávka kombinace zkušební skupiny, zatímco skupina 5 který jmenoval, kukuřice hedvábí-binahong jedna dávka kombinace testovací skupina byla dána 75 mg kg-1 b. wt. den-1 extrakt z kukuřičného hedvábí, 100 mg kg-1 b.wt. den-1” binahong “ listy extrakt a piroxicam., Skupina 6 se vstřikuje s fyziologickým roztokem a tragant roztok jako placebo po dobu 7 po sobě jdoucích dní a 4 týdnech léčby. Tragacanth byl použit jako prostředek pro piroxikam a extrakt ethanolu. Tato skupina sloužila jako negativní kontrolní skupina.

hladiny kreatininu byly stanoveny ve vzorcích séra každý týden. Dvacet čtyři hodin po 4. týdnu léčby byly krysy ve všech skupinách obětovány a obě ledviny byly rychle odstraněny. Ledviny byly zváženy a fixovány 10% pufrovaným roztokem formalinu, který má být vložen do parafinu pro histopatologické pozorování světelnou mikroskopií., Zbývající ledviny se okamžitě a důkladně promyjí ledovým fyziologickým fyziologickým roztokem. Tkáň byla homogenizována v fosfátu studeného pufru (pH 7.4) V homogenizátoru po dobu 10 minut (koncentrace byla 20%). Homogenát byl centrifugován při 3000 ot / min po dobu 10 minut a supernatant byl použit k testování aktivity MDA (malondialdehyd), katalázy a SOD (superoxiddismutázy).

Stanovení sérového kreatininu úroveň: Sérová hladina kreatininu byla stanovena pomocí HumanR činidla soupravy podle kinetické metody Jaffè (Lustgarten a Wenk, 1972)., Absorbance byla měřena při 546 nm pomocí spektrofotometru.

stanovení hladiny močoviny v séru: hladina močoviny v séru byla měřena spektrofotometrem pomocí ureázového enzymu kit (Wilcox et al., 1966). Princip této metody je hydrolýzou močoviny v přítomnosti vody a ureázy k výrobě amoniaku a oxidu uhličitého. Amoniakové ionty reagují s chlornanem a jsou katalyzovány nitroferrikyanidem, aby poskytly tmavě modré/zelené barvivo. Barva barviva byla měřena na 578 nm. Intenzita barvy je úměrná koncentraci močoviny ve vzorku.,

Stanovení lipidperoxidation měřením thiobarbituric acid reactive látek z ledvin supernatant: V 1 mL reakční zmatek, 0.58 mL fosfátového pufru (0,1 M, pH 7.4), 0,2 mL ledvin supernatant (20% w/v), 0,2 mL kyseliny askorbové (100 mM) a 0,02 mL chloridu železitého (100 mM) byly inkubovány při 37°C v třepací vodní lázni po dobu 1 h. Reakce byla ucpaná přidáním 1 mL kyseliny trichloroctové (TCA) (10% w/v), následně 1 mL Thiobarbituric Acid (TBA) (0.67% w/v) bylo přidáno a všechny trubky byly uchovávány ve vroucí vodní lázni po dobu 20 min., Trubky byly přesunuty do ledové lázně a centrifugovány při 3000 ot / min po dobu 10 min. Množství TBARS vytvořeny v každém ze vzorků byla hodnocena pomocí měření absorbance supernatantu při 535 nm spojil s činidlem prázdná bez homogenátu tkáně (Wright et al., 1981).

Stanovení aktivity katalasy z ledvin supernatant: Katalasy aktivita byla analyzují pomocí Clairborne (1985). Test směs se skládala z 1.95 mL fosfátového pufru (0,05 M, pH 7), 1 mL H2O2 (0.019 M) a 0,05 mL ledvin supernatant (20% w/v)., Změny absorbance byly zaznamenány při 280 nm po dobu 2 minut s intervalem 60 s pomocí spektrofotometru.

Stanovení SOD činnost ledvin supernatant: SOD aktivita v homogenátu byla odhadnuta pomocí reagent kit získány od Sigma-Aldrich Laboratorní.

stanovení indexu ledvin: poměr tělesné hmotnosti ledvin (index ledvin) byl vypočítán porovnáním hmotnosti ledvin s tělesnou hmotností potkana.

Histologické hodnocení: Dvacet čtyři hodin po 4. týdnu terapie, potkanů ve všech skupinách byly obětovány, a obě ledviny byly rychle odstraněny., Ledviny každého zvířete byly fixovány v pufrovaném formalinu. Ledviny byly zpracovány a vloženy do parafinového vosku. Tři mikro-mitterové tlusté parafínové části byly obarveny hematoxylinem a eosinem pro vyšetření světelným mikroskopem.

Statistická analýza data byla analyzována pomocí t-testu a one-way ANOVA následovanou post-hoc LSD test pomocí SPSS balíčky (verze 15.0). Hodnoty p<0.05 byly považovány za významné.,

VÝSLEDKY

Účinek extraktu na funkci ledvin zlepšení gentamicin-piroxicam vyvolané selhání ledvin: Čtyři parametry funkce ledvin byly stanoveny, včetně biochemických markerů (sérových koncentrací kreatininu a močoviny v krvi), oxidační stres, varhany index a ledvin histologie.,

Vliv na hladiny kreatininu v séru a histopatologické průřez po 7 po sobě jdoucích denní podávání gentamicinu-piroxikam: podávání gentamicinu a piroxikam pro 7 po sobě jdoucích dnů, aby každý z testované skupiny může zvýšit koncentrace kreatininu 2-3 krát výrazně na první týden (1. týden), kdy v porovnání s negativní kontrolní skupinou (Obr. 1). Mezi indukovanými skupinami nebyly žádné významné rozdíly., Poznatky o biochemických parametrech byly také podpořeny histopatologickými výsledky, které ukazovaly změny profilu struktury ledvin jak v kůře, tak v medulle (obr. 2, 3). Bylo jasně zjištěno, že jakákoli tubulární degenerace, glomerulární atrofie, tvorba vakuoly a hematurie na několika místech v průřezu indukovaných skupin. Zvýšení koncentrace kreatininu následované závažnějším poškozením, které lze pozorovat na mikroskopické části.,

Účinek extraktu na koncentrace kreatininu v séru: týden 2, jako obecné, každý z vyvolané skupinu (zahrnují pozitivní kontrolní skupina) zaznamenaly snížení koncentrace kreatininu (předpokládá se, protože tělo homeostázy). Koncentrace kreatininu pozitivní kontrolní skupiny však byla vyšší a výrazně odlišná ve srovnání s testovací skupinou a negativní kontrolní skupinou., V pozitivní kontrolní skupině nebyly zjištěny žádné významné rozdíly mezi koncentracemi kreatininu v týdnu léčby (týden 2, 3 4 a 5) oproti výchozí hodnotě (hladiny kreatininu v séru v týdnu 1). Každý z testovací skupiny, a to buď jednotlivě nebo v kombinaci, zkušený snížení koncentrace kreatininu, který byl výrazně odlišný ve srovnání s pozitivní kontrolní skupina a základní hodnoty každé skupiny. Mezi testovacími skupinami nebyly žádné významné rozdíly., Z těchto údajů lze vidět, že extrakt v kombinaci s poloviční dávkou by mohl vyvolat účinky více či méně srovnatelné s jedinou formou extraktu. Podávání v kombinaci s jednou dávkou neposkytovalo žádnou významnou lepší aktivitu než kombinace s jedním extraktem a poloviční dávkou. To lze jasně vidět na obr. 1.

účinek extraktu na hladiny močoviny v séru: podobné profily byly také nalezeny u druhého parametru, hladiny močoviny v séru (obr. 4).

Obr., 1: Účinek extraktu správy, jednotné a kombinace, proti koncentrace kreatininu každý týden; *Různé výrazně proti pozitivní kontrolní skupině (p<0.05); **Různé výrazně proti negativní kontrolní skupině (p<0.05); a: Různé výrazně proti pozitivní kontrolní skupině (p<0.10); b: Liší výrazně proti negativní kontrolní skupině (p<0.10); c: výrazně Liší oproti první týden je hodnota sama o sobě (p<0.,05); d: Liší výrazně ve srovnání s prvním týdnu je hodnota sama o sobě (p<0.10)

Obr. 2(a-f): Histopatologické profil kůry ledvin jeden týden po induktor správy na 100x zvětšení; (a) Pozitivní kontrolní skupiny, (b) Kukuřice hedvábí testovací skupiny, (c) Binahong testovací skupiny, (d) Kukuřice hedvábí binahong půl dávky kombinace testovací skupiny, (e), Kukuřice hedvábí binahong jedna dávka kombinaci test skupina a (f) Negativní kontrolní skupina., Arrow sign (→) showed glomerular atrophy, whereas, (*) showed vacuolization

Fig., 3(a-f): Histopathological profile of kidney medulla one week after inductor administration on 100x magnification; (a) Positive control group, (b) Corn silk test group, (c) Binahong test group, (d) Corn silk binahong half dose combination test group, (e) Corn silk binahong one dose combination test group and (f) Negative control group

Fig., 4: Účinek extraktu správy, jednotné a kombinace, proti koncentrace močoviny každý týden; *Různé výrazně proti pozitivní kontrolní skupině (p<0.05); **Různé výrazně proti negativní kontrolní skupině (p<0.05); a: Různé výrazně proti pozitivní kontrolní skupině (p<0.10); b: Liší výrazně proti negativní kontrolní skupině (p<0.10); c: výrazně Liší oproti první týden je hodnota sama o sobě (p<0.,05); d: Liší výrazně ve srovnání s prvním týdnu je hodnota sama o sobě (p<0.10)

poškození Ledvin ve všech vyvolané skupiny způsobené podání gentamicinu a piroxikamu bylo potvrzeno zvýšení sérové koncentrace močoviny v 1.týdne. Hladiny močoviny v séru pozitivní kontrolní skupiny byly v následujících týdnech sníženy, ale mají tendenci se zvyšovat v 5.týdnu. Tendence nebyla nalezena ve zkušebních skupinách, které dostaly extrakt.,

účinek extraktu z listů na renální histopatologii: výsledky mikroskopického průřezu ukázaly zlepšení struktury ledvin po podání extraktu. Ačkoli zlepšení bylo také pozorováno v pozitivní kontrolní skupině, každý z mikroskopických průřezů zkušební skupiny vykazoval lepší výkon a začal přistupovat k negativní kontrolní skupině, zejména v části medulla (obr. 5, 6).

Obr., 6(a-f): Histopatologické profil dřeně ledvin v 5. týdnu na 100x zvětšení; (a) Pozitivní kontrolní skupiny, (b) Kukuřice hedvábí testovací skupiny, (c) Binahong testovací skupiny, (d) Kukuřice hedvábí binahong půl dávky kombinace testovací skupiny, (e), Kukuřice hedvábí binahong jedna dávka kombinaci test skupina a (f) Negativní kontrolní skupiny

Účinek extraktu na TBARS úrovně: V této studii bylo zjištění o nárůst ve výši TBARS ve skupině vyvolané gentamicin a piroxikam., Každá zkušební skupina, která dostala extrakt, měla menší množství TBARŮ než a výrazně se lišila od pozitivní kontrolní skupiny(obr. 7).

vliv extraktu na aktivitu katalázy: pozitivní kontrolní skupina zaznamenala výrazně nižší hladinu katalázy ve srovnání s negativní kontrolní skupinou. Skupina, která byla léčena s extraktem zaznamenána výrazně zvýšená hladina katalázy označující obnovení úrovně kataláza blíže k normálu, neléčená zvířata (Obr. 8).

účinek extraktu na aktivitu SOD: bylo zjištěno, že selhání ledvin vyvolané skupinou má sníženou aktivitu SOD., Léčba extraktem vedla k významnému zvýšení hladin těchto enzymů (obr. 9).

vliv extraktu na index orgánů: pozitivní kontrolní skupina měla nejvyšší renální index mezi ostatními skupinami a byla výrazně odlišná ve srovnání s negativní kontrolní skupinou.

Obr. 7: účinek podání extraktu, jeden a kombinace, proti úrovni TBARS v týdnu 5; * významně se liší oproti pozitivní kontrolní skupině (p<0.,05); **Different significantly against negative control group (p<0.05)

Fig. 8: Effect of extract administration, single and combination, against catalase activity in week 5; a Different significantly against positive control group (p<0.10)

Fig., 9: Effect of extract administration, single and combination, against SOD activity in week 5; *Different significantly against positive control group (p<0.05); **Different significantly against negative control group (p<0.05)

Fig., 10: Účinek extraktu správy, jednotné a kombinace, proti ledvin index v 5. týdnu; **Různé výrazně proti negativní kontrolní skupině (p<0.05)

extrakt skupina měla nižší renální index ve srovnání s pozitivní kontrolní skupinou a nebyly zjištěny žádné rozdíly mezi experimentálními skupinami (Obr. 10).,

DISKUSE

výsledky, které byly prokázány zvýšení kreatininu a močoviny v koncentraci, v prvním týdnu léčby, podporuje předchozí výzkum, který naznačil, že krysa modely selhání ledvin může být vytvořen rychle tím, že kombinace gentamicinu a piroxikam (Sukandar et al., 2011). Dávky byly podávány po dobu 7 dnů po dobu trvání bylo hlášeno k vyvolání poškození ledvin., Zvýšení kreatininu v krvi, je uvedeno, že induktor, zejména gentamicinu, může způsobit pokles glomerulární filtrace funkce, vzhledem k tomu, histologické výsledky ukázaly, že gentamicin dát velký vliv na tubulu, a to zejména v proximálním tubulu (Rybář et al., 1987; Dehghani et al., 2011; Ozbek et al., 2009). Tubulární poškození bylo pravděpodobně odvozeno v důsledku apoptózy, která je v podstatě jedním z důležitých procesů pro udržení homeostázy., V tomto procesu vysílají lysosomy i mitochondrie signály, které způsobují prasknutí membrán a uvolňování hydroláz kyseliny lysozomální (De Souza et al., 2009; Denamur et al., 2008).

profil koncentrace kreatininu v kombinované testovací skupině vykazuje tendenci, že extrakty pracují aditivním a časově závislým způsobem. Zlepšení funkce ledvin by proto mohlo být dosaženo prodloužením doby aplikace spíše než zvýšením dávky.,

zvyšující se hladina močoviny byla jasně pozorována v pátém týdnu léčby, což potvrdilo závažnou úroveň poškození ledvin (Parlakpinar et al., 2005). Zvýšení naznačilo, že škoda pravděpodobně zůstane v pozitivní kontrolní skupině. Tendence k převýšení nebyla nalezena ve zkušebních skupinách, kterým byly podány extrakty. Tento výsledek potvrdil ochrannou aktivitu ledvin poskytovanou extraktem.

poškození ledvin bylo také podpořeno hodnotami indexu orgánů, které byly vyšší ve srovnání s negativní kontrolní skupinou., Vysoké hodnoty indexu pozitivní kontroly skupiny a zkušební skupina může být v důsledku výskytu otoků a hromadění tekutin v patologické extravazálního prostoru, zejména v interstitium, v důsledku tubulární nekróza (Meliani, 2006; Zulkarnain, 2009) a může být také způsobena tím, proliferaci a apoptózu mesangiálních buněk současně. Tyto mezangiální buňky jsou speciální buňky, které se nacházejí v okolí krevních cév v ledvinách. V jedné studii, buď in vivo nebo in vitro způsobem, bylo zjištěno, že gentamicin stimuloval mezangiální buněčnou kontrakci a proliferaci., Gentamicin byl také schopen zvýšení exprese nebo aktivace proapoptosis protein tak, že by to mohlo způsobit prasknutí lysosomální membrány a uvolnění kyselých hydroláz, které přispěly k apoptóze a nekróze proximálních tubulárních buněk (De Souza et al., 2009; Martinez-Salgado et al., 2004).

vzhledem k tomu, že index vysoké hodnoty testovací skupiny, lze konstatovat, že extrakt nefungoval při prevenci nebo opravě poškození mezangiálních buněk., Nicméně, extrakt byl schopen prokázat zlepšení v biochemické a histologické parametry, takže je možné, že extrakt může maximalizovat výkon mesangiální buňky, které byly stále funkční.

Další parametry, které jsou analyzovány v této studii, souvisejí s oxidačním stresem. Oxidační stres je abnormální stav, ve kterém zvýšený oxidační produkt nemohl být proti zvýšené produkci antioxidantů. Absence způsobuje, že rovnováha těla není v bezpečné zóně (Rico et al., 2006; Kandemir et al., 2011).,

různé studie prokázaly zapojení oxidačního stresu do mnoha degenerativních onemocnění ,z nichž jedním je selhání ledvin (Polat et al., 2006). Uremie sama o sobě způsobuje zvýšenou produkci volných radikálů a dokonce i hemodialýza může někdy zvýšit množství radikálů (Galle, 2001). Tyto věci způsobují vyšší riziko morbidity a pravděpodobnost utrpení jiných onemocnění pacienta se selháním ledvin ve srovnání s běžnými pacienty bez selhání ledvin (Luciak, 2004)., Existuje několik parametrů, které mohou být použity k předpovídat úroveň oxidačního stresu u pacientů se selháním ledvin, jako je konjugovaný dien, antioxidační enzymy, produkty peroxidace metilguanidin jako kreatininu, sérové antioxidační aktivitu a peroxidace lipidů (Gotoh et al., 1997).

bylo zjištěno, že kyslík radikální druhů, jako je superoxid anion, peroxid vodíku a hydroxylové radikály, vzal roli v patofyziologii gentamicin. Kyslíkové radikální druhy způsobují rychlé změny ve složení membránových lipidů nebo lépe známé jako peroxidace lipidů., Kromě toho buňky rychle ztrácejí osmotickou rovnováhu, což vede ke zvýšení hladin intracelulárního vápníku. To vede k edému/otoku buněk, které jsou časným projevem poškození, které je stále reverzibilní (Kadkhodaee et al., 2005; Derakhshanfar et al., 2007). Na druhé straně radikální druhy mohou konzumovat většinu výkonu enzymu, jako je superoxiddismutáza (SOD) a kataláza, čímž se snižuje aktivita těchto enzymů (Abdel-Raheem et al., 2010).,

peroxidace lipidů by mohla být definována jako oxidační poškození lipidových struktur, které obsahují dvojné vazby mezi uhlíky. Další definice vyplývá, že lipidové peroxidace je proces, spojený s volnými radikály, proces, který není pod kontrolou a může běžet nepřetržitě, což způsobuje narušení membrány, lipidů a dalších buněčných komponent. Peroxidace lipidů, která se vyskytuje nepřetržitě, může být hlavním faktorem patogeneze komplikací selhání ledvin (Shanmugam et al., 2009)., Jak je uvedeno v předchozím odstavci, v lidském těle se struktura lipidů běžně vyskytuje v buněčných membránách. To je složitější je, že membrána se stává první obranou pro každou buňku, jako jsou mitochondrie, plazma, endoplazmatické retikulum, lysosomy, peroxizomy a další. Navíc metabolitů vzniklých mezi oxidační procesy může dát nepříznivé účinky na jiných místech, než místo původu oxidace (Devasagayam et al., 2003).,

jedním z výsledků peroxidace lipidů jsou sloučeniny aldehydů, které mohou reagovat s kyselinou za vzniku růžového thiobarbiturátu, který lze snadno detekovat pomocí spektrofotometru. Takové sloučeniny jsou často označovány jako kyselé reaktivní sloučeniny tiobarbiturat nebo TBARS (reaktivní látky kyseliny thiobarbiturové). TBARS jako jeden z produktů peroxidace lipidů lze použít jako reference pro předpovídání, kolik je produkce radikálů. V této studii bylo zjištěno zvýšení množství TBARŮ indukovaných gentamicinem a piroxikamem., Každá zkušební skupina má méně než množství TBARŮ a výrazně se liší od pozitivní kontrolní skupiny(obr. 7).

zdá se, že selhání ledvin má tendenci oslabovat obranný systém proti volným radikálům. To činí vysoké množství volných radikálů, které mají vliv na vysokou úroveň poškození tkáně. Tyto skutečnosti potvrzují výsledky mikroskopického průřezu, které vykazují vyšší hladiny tubulární nekrózy v pozitivní kontrolní skupině než testovací skupina nebo negativní kontrolní skupina., Mnoho důkazů navrhl, že nadměrné množství volných radikálů v důsledku selhání ledvin může zhoršit onemocnění a zvýšit riziko komplikací. Z těchto výsledků se zdá pravděpodobné, že extrakt má antioxidační aktivitu, protože může snížit hladinu peroxidace lipidů ve zkušební skupině. Pokles může být způsoben aktivita membránových lipidů ochranu, opravy tkáně, která je poskytována extrakty, nebo volný radikál tlumení, které snižují přímo množství volných radikálů našel tak, že tam nejsou radikální, že může zaútočit na lipidové membrány., Tyto výsledky navíc potvrzují předchozí údaje, které ukazují, že podávání kombinace neposkytuje lepší aktivitu než jednorázové použití extraktu (Prasanna a Purnima, 2011).

z obr. 7, lze vidět, že hladina peroxidace lipidů v každé zkušební skupině je nižší než negativní kontrolní skupina, i když pouze testovací skupina kukuřičného hedvábí, která se ve srovnání s negativní kontrolní skupinou výrazně lišila. Ukazuje, že extrakt může zlepšit odolnost buněčné membrány proti oxidant, takže poškození tkáně může být zabráněno nebo opraveno., Vyšší úroveň rezistence způsobuje nižší koncentraci kreatininu v séru ve zkušební skupině ve srovnání s její počáteční hodnotou a může napodobovat sérový kreatinin negativní kontrolní skupiny.

ochranný systém proti druhům kyslíkových radikálů nebo oxidačním produktům lipidů, proteinů a DNA je zajištěn antioxidačními enzymy, jako je SOD a kataláza. Jinými slovy, SOD a kataláza jsou dva hlavní příklady radikálních bojových enzymů in vivo. Bylo zjištěno, že došlo ke snížení aktivity obou enzymů, SOD a katalázy, ve stavu selhání ledvin., Výsledkem bylo zvýšení počtu superoxidových aniontů a peroxidu vodíku za vzniku hydroxylových radikálů. Nakonec může hydroxylový radikál iniciovat peroxidaci lipidů. Tento proces může zvýšit úroveň poškození ledvin (Palani et al., 2009). SOD může katalyzovat superoxide dismutase aniontů do peroxidu vodíku, které jsou pak deaktivován kataláza do vody (Kim et al., 2012). To naznačuje, že ve stavu oxidačního stresu došlo ke snížení aktivity nebo inaktivace antioxidačního obranného systému (Olagunju et al., 2009; Palani et al., 2009)., Snížená aktivita enzymu je někdy kompenzací zvýšeného počtu radikálů. Jinými slovy, zvýšení počtu radikálů nutí imunitní systém vydávat více práce na odstranění oxidantu. Může však vyvolat řadu dalších, škodlivějších účinků (Geo Vigila a Baskaran, 2011). Extrakt, buď samostatně nebo v kombinaci, může zvýšit aktivitu enzymu SOD a katalázy ve srovnání s pozitivní kontrolní skupinou(obr. 8, 9).,

výsledky tato studie potvrdila, že podávání induktorů, gentamicin a piroxicam, by zvýšení peroxidace lipidů v ledvinách, která byla charakterizována zvýšenou TBARS a snížení antioxidační aktivity enzymu i jiné mechanizmy poškození může dojít také. Tam byla tendence, že buď kukuřičný hedvábí nebo binahong extrakty mají antioxidační aktivitu, která by mohla chránit ledviny před nefrotoxicity. Ukázalo se, že antioxidační činidla mají schopnost zabránit nebo opravit poškození ledvin., Výše uvedené údaje ukázaly, že extrakt může pomoci zlepšit antioxidační stav u potkaního modelu selhání ledvin.

tyto údaje potvrzují výsledky předchozích studií týkajících se kukuřičného hedvábí. Různé studie odhalily antioxidační aktivitu kukuřičného hedvábí, která může být způsobena vysokým obsahem flavonoidů nebo fenolických sloučenin (Ebrahimzadeh et al., 2008; Alam, 2011; Bhaigyabati et al., 2011). V souvislosti s antioxidačním extraktem se extrakt z kukuřičného hedvábí také potenciálně používá k léčbě dalších onemocnění spojených s oxidačním stresem.,

zatímco binahong odchází, není mnoho výzkumných publikací, které odhalují aktivity spojené s antioxidanty. Některé studie odhalují aktivitu binahongu jako antibakteriální a hojení ran (Astuti et al., 2011). Je však možné, že binahong má také antioxidační aktivitu vzhledem k flavonoidu obsaženému v extraktu.

flavonoidy jsou fenolické sloučeniny nalezené v mnoha rostlinách. Rostliny používané k použití flavonoidů se chrání před oxidačním poškozením inhibicí nebo snížením volných radikálů a reaktivních druhů kyslíku, které vznikají v důsledku slunečního záření., Je způsobena přítomností konjugovaných prstencových struktur a hydroxylových skupin. Proto, to je navrhl, že vysoké flavonoidy mají roli v prevenci kyslík radikální druhy způsobují cytotoxicitu a poškození tkání u lidí (Anila a Vijayalakshmi, 2003).

potlačení aktivity proti oxidačnímu stresu může být také generováno interakcí mezi složkami obsaženými v extraktu., Některé studie ukazují, že izoláty obsahující alkaloid mají antioxidační účinky a může zlepšit jaterní funkce dříve poškozen používáním CCl4 (oba kukuřice hedvábí a “binahong” listy extrakt obsahují alkaloid). V tomto případě, CCl4 způsobit škody přes volné radikály tak, tam jsou podobnosti, které lze racionalizovat o podmínkách této studie (Maiza-Benabdesselam et al., 2007; Singh et al., 2010; Parthasarathy et al., 2009; Ravikumar and Gnanadesigan, 2011). Předpokládá se také, že přítomnost taninových látek v kukuřičném hedvábí může poskytnout ochranu před poškozením., Taninové látky mají adstringentní podobné aktivity, které mohou způsobit srážení proteinů v buněčné membráně, které tvoří bariéru, která zabraňuje útoku volnými radikály.

závěr

jak hedvábí kukuřice (Zea mays L.), tak binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) listy extrakty by mohly zlepšit funkci ledvin u potkanů modelu selhání ledvin. Kombinace poloviční dávky každého extraktu vykazovala účinky srovnatelné nebo o něco lepší než individuální extrakt, který vykazuje alespoň aditivní účinek., Snížení oxidačního stresu poskytovaného jednotlivými extrakty a jejich kombinací může být korelováno s mechanismem Opravy selhání ledvin.