INTRODUZIONE
Rene è uno degli organi vitali del corpo. Il rene svolge ruoli di eliminatore, manutentore, regolatore e produttore. Come eliminatore, il rene ha la funzione di rimuovere i prodotti di scarto metabolici, come l’urea, la creatinina e l’ammoniaca., Come manutentore e regolatore, il rene dovrebbe mantenere un equilibrio tra volume del fluido extracellulare, concentrazione di elettrolita inorganico nel fluido extracellulare, osmolarità del fluido extracellulare, equilibrio acido-base e pressione sanguigna. Inoltre, il rene svolge un ruolo nella produzione di vitamina D e ormoni (Scanlon e Sanders, 2003; Kelly, 2004; National Kidney Federation, 2003).
L’insufficienza renale è una condizione in cui il rene è danneggiato in modo che non possa più svolgere correttamente la funzione di escrezione., Queste condizioni possono causare l’accumulo di prodotti di scarto metabolici che causano tossicità nel corpo. Inoltre, l’insufficienza renale è spesso seguita da una varietà di altri disturbi fisiologici, come malattie cardiovascolari, anemia, osteodistrofia, acidosi, ecc. (Thye, 1998; Zdanowicz, 2003; CDC, 2010). È noto che l’incidenza di insufficienza renale negli Stati Uniti è raddoppiata negli ultimi due decenni. Ogni anno, c’è un aumento di circa il 7-8% della popolazione mondiale. Circa il 10% degli Stati Uniti, popolazione o circa 20 milioni di persone soffrono di insufficienza renale (National Kidney Federation, 2003; The American Society of Nefrology, 2012). L’incidente aumenta nella popolazione diabetica e ipertensiva (CDC, 2010).
La malattia renale è generalmente irreversibile e può portare a condizioni di ESRD (End Stage Renal Diseases). Fino ad ora non ci sono terapie specifiche per trattare la malattia. I trattamenti utilizzati sono principalmente sintomatici e solo per la sostituzione della funzionalità renale, come la dialisi o il trapianto di rene., Di conseguenza, dovrebbero essere fatti di routine, tuttavia sono costosi e forniscono risposte che variano per ogni persona. Pertanto, sono necessarie terapie alternative per inibire la progressione di questa malattia. La terapia alternativa dovrebbe essere sicura e non costosa poichè queste gestioni di malattia richiedono la durata lunga.
La ricerca precedente ha dimostrato che l’uso singolo di estratti di foglie di binahong o estratti di seta di mais potrebbe aiutare a migliorare la funzione renale che è stata precedentemente manomessa utilizzando agenti nefrotossici (Sukandar et al., 2011; Fadliah, 2008)., Pertanto, questo studio ha testato l’attività della combinazione di estratti contro il miglioramento della funzione renale. Lo scopo di questo studio era determinare se le attività fornite dalla combinazione dei due estratti fossero sinergiche, additive o antagonistiche. La potenza della combinazione rispetto all’attività di un singolo potere-suola.
MATERIALI E METODI
Animali: ratti Wistar maschi di età compresa tra 8-12 settimane, del peso di 175-225 g, sono stati tenuti in condizioni di gestione usuali nella casa animale convenzionale della School of Pharmacy, Bandung Institute of Technology., I ratti sono stati nutriti con una dieta standard di laboratorio e acqua ad libitum.
Materiale vegetale: seta di mais (Zea mays L.) dan binahong foglie (Anredera cordifolia (Dieci.) Steenis) sono stati acquistati da Manoko farm a Lembang, Bandung e identificati da esperti della School of Biological Science and Technology, Bandung Institute of Technology, Indonesia.
Preparazione dell’estratto: polvere macinata di seta di mais e foglie di binahong ciascuna è stata estratta con etanolo usando il metodo di reflusso e filtrata attraverso la carta da filtro Whatman., L’estratto totale è stato evaporato utilizzando evaporatore sottovuoto rotante (Buchi R-124) per ottenere estratto viscoso che si riferiva come estratto di etanolo.
Procedura sperimentale: Questo studio è stato condotto secondo Guida per la cura e l’uso di animali da laboratorio, Istituto per la ricerca sugli animali da laboratorio. NRC, 1996 Washington, DC: National Academy Press.
I ratti sperimentali sono stati divisi in 6 gruppi, 5 ratti ciascuno (sono usati 8 ratti ogni gruppo nella 0a settimana; 3 ratti per ogni gruppo sono stati sezionati dopo 7 giorni di somministrazione di gentamicina e piroxicam)., Tutti i gruppi, tranne il sesto gruppo, sono stati trattati con 100 mg kg-1 al giorno di gentamicina per via intraperitoneale e 3,6 mg kg-1 al giorno di piroxicam per via orale per 7 giorni consecutivi per indurre insufficienza renale (Hosaka et al., 2004). Il gruppo 1 ha continuato con la somministrazione di piroxicam per via orale fino alla 4a settimana di terapia. Questo gruppo ha servito come gruppo di controllo positivo. Il gruppo 2 ha continuato con la ricezione simultanea di 75 mg kg-1 b. wt. al giorno estratto di seta di mais e piroxicam per via orale fino alla 4a settimana di terapia. Questo gruppo è servito come un singolo gruppo di test di seta di mais. Il gruppo 3 è stato somministrato con 100 mg kg-1 peso corporeo., al giorno binahong lascia l’estratto e piroxicam per via orale fino alla 4a settimana di terapia. Questo gruppo è servito come binahong singolo gruppo di prova. Il gruppo 4 è stato consegnato con 37,5 mg kg-1 peso corporeo. giorno-1 estratto di seta di mais, 50 mg kg-1 peso corporeo. giorno-1 estratto di foglie di binahong e piroxicam fino alla 4a settimana di terapia. Questo gruppo denominato come corn silk-binahong mezza dose gruppo di test di combinazione, mentre il gruppo 5 che ha nominato, corn silk-binahong un gruppo di test di combinazione di dose è stato dato 75 mg kg-1 b. wt. giorno-1 estratto di seta di mais, 100 mg kg-1 peso corporeo. giorno-1 binahong ” lascia estratto e piroxicam., Gruppo 6 sono stati iniettati con soluzione salina normale e tragacanth come placebo per 7 giorni consecutivi e 4 settimane di terapia. Tragacanth è stato utilizzato come veicolo per piroxicam ed estratto di etanolo. Questo gruppo fungeva da gruppo di controllo negativo.
I livelli di creatinina sono stati determinati in campioni di siero ogni settimana. Ventiquattro ore dopo la 4a settimana di terapia, i ratti di tutti i gruppi sono stati sacrificati ed entrambi i reni sono stati rapidamente rimossi. I reni sono stati pesati e fissati con una soluzione di formalina tamponata al 10% da incorporare in parafina per l’osservazione istopatologica mediante microscopia ottica., I reni rimanenti immediatamente e accuratamente lavati con soluzione salina fisiologica ghiacciata. Il tessuto è stato omogeneizzato in fosfato tampone freddo (pH 7,4) in un omogeneizzatore per 10 min (la concentrazione era del 20%). L’omogenato è stato centrifugato a 3000 giri / min per 10 minuti e il surnatante è stato utilizzato per analizzare l’attività di MDA (malondialdeide), catalasi e SOD (superossido dismutasi).
Determinazione del livello di creatinina sierica: il livello di creatinina sierica è stato determinato utilizzando kit di reagenti HumanR secondo il metodo cinetico di Jaffè (Lustgarten e Wenk, 1972)., L’assorbanza è stata misurata a 546 nm tramite spettrofotometro.
Determinazione del livello di urea sierica: il livello di urea sierica è stato misurato con spettrofotometro utilizzando il kit di enzimi ureasi (Wilcox et al., 1966). Principio di questo metodo è idrolizzazione di urea in presenza di acqua e ureasi per produrre ammoniaca e anidride carbonica. Gli ioni ammoniaca reagiscono con ipoclorito e sono catalizzati da nitroferricianuro per dare colorante blu scuro / verde. Il colore del colorante è stato misurato a 578 nm. L’intensità del colore è proporzionale alla concentrazione di urea nel campione.,
la Determinazione di lipidperoxidation misurando thiobarbituric acid sostanze reattive del rene surnatante: In 1 mL di reazione confusione, 0.58 mL di tampone fosfato (0.1 M, pH 7.4), 0,2 mL di rene surnatante (20% w/v), 0,2 mL di acido ascorbico (100 mM) e 0,02 mL di cloruro ferrico (100 mM) è stato incubato a 37°C in un bagnomaria per 1 h. La reazione era intasato con l’aggiunta di 1 mL di acido tricloroacetico (TCA) (10% w/v), successivamente 1 mL Thiobarbituric Acid (TBA) (0.67% w/v) è stato aggiunto e tutti i tubi sono stati tenuti in un bagno di acqua bollente per 20 min., I tubi sono stati spostati a bagno di ghiaccio e centrifugati a 3000 giri / min per 10 min. La quantità di TBARS formata in ciascuno dei campioni è stata valutata misurando l’assorbanza del surnatante a 535 nm alleato con reagente bianco senza omogeneizzato tissutale (Wright et al., 1981).
Determinazione dell’attività della catalasi dal surnatante renale: l’attività della catalasi è stata analizzata da Clairborne (1985). La miscela di dosaggio consisteva in 1,95 ml di tampone fosfato (0,05 M, pH 7), 1 ml di H2O2 (0,019 M) e 0,05 ml di surnatante renale (20% p/v)., Le variazioni di assorbanza sono state registrate a 280 nm per 2 min con intervallo di 60 sec utilizzando uno spettrofotometro.
Determinazione dell’attività della SOD dal surnatante renale: l’attività della SOD nell’omogenato è stata stimata utilizzando il kit di reagenti ottenuto dal laboratorio Sigma-Aldrich.
Determinazione dell’indice renale: il rapporto organo-peso corporeo del rene (indice renale) è stato calcolato confrontando il peso dei reni con il peso corporeo del ratto.
Valutazione istologica: ventiquattro ore dopo la 4a settimana di terapia, i ratti di tutti i gruppi sono stati sacrificati ed entrambi i reni sono stati rapidamente rimossi., I reni di ciascun animale sono stati fissati in formalina tamponata. I reni sono stati elaborati e incorporati nella cera di paraffina. Tre sezioni di paraffina di spessore micrometrico sono state macchiate con ematossilina ed eosina per l’esame al microscopio ottico.
Analisi statistica: I dati sono stati analizzati utilizzando t-test e ANOVA unidirezionale seguiti da test LSD post-hoc utilizzando pacchetti SPSS (versione 15.0). I valori di p< 0.05 sono stati considerati significativi.,
RISULTATI
Effetto dell’estratto sul miglioramento della funzionalità renale nell’insufficienza renale indotta da gentamicina-piroxicam: sono stati determinati quattro parametri della funzione renale inclusi marcatori biochimici (livelli di creatinina sierica e urea), livelli di stress ossidativo, indice d’organo e istologia renale.,
Effetto su di creatinina sierica e istopatologici sezione dopo 7 giorni consecutivi di amministrazione di gentamicina-piroxicam: La somministrazione di gentamicina e piroxicam per 7 giorni consecutivi per ciascuna delle testate del gruppo potrebbe aumentare la concentrazione di creatinina 2-3 piega in modo significativo alla prima settimana (settimana 1) rispetto al gruppo di controllo negativo (Fig. 1). Non ci sono state differenze significative tra i gruppi indotti., I risultati sui parametri biochimici sono stati supportati anche dai risultati istopatologici che mostravano cambiamenti nel profilo della struttura renale sia nella corteccia che nel midollo (Fig. 2, 3). È stato chiaramente trovato qualsiasi degenerazione tubulare, atrofia glomerulare, formazione di vacuolo ed ematuria in diversi punti nella sezione trasversale dei gruppi indotti. Aumento della concentrazione di creatinina seguito da un danno più grave che può essere osservato sulla sezione microscopica.,
Effetto dell’estratto sui livelli di creatinina sierica: alla settimana 2, come generale, ciascuno dei gruppi indotti (include il gruppo di controllo positivo) ha sperimentato una riduzione della concentrazione di creatinina (è previsto a causa dell’omeostasi del corpo). Tuttavia, la concentrazione di creatinina del gruppo di controllo positivo era più alta e significativamente diversa rispetto al gruppo di test e al gruppo di controllo negativo., Nel gruppo di controllo positivo, non sono state riscontrate differenze significative tra le concentrazioni di creatinina nella settimana di trattamento (settimana 2, 3 4 e 5) rispetto al valore basale (livelli di creatinina sierica nella settimana 1). Ciascun gruppo di test, da solo o in associazione, ha registrato una riduzione della concentrazione di creatinina significativamente diversa rispetto al gruppo di controllo positivo e al valore basale di ciascun gruppo. Non ci sono state differenze significative tra i gruppi di test., Da questi dati, si è potuto vedere che l’estratto in combinazione a metà dose potrebbe produrre effetti più o meno paragonabili alla singola forma di estratto. La somministrazione in combinazione di una dose non ha fornito alcuna attività significativa migliore rispetto alla combinazione di singolo estratto e metà dose. Questo potrebbe essere visto chiaramente in Fig. 1.
Effetto dell’estratto sui livelli di urea sierica: profili simili sono stati trovati anche sul secondo parametro, il livello di urea sierica (Fig. 4).
Fig., 1: | Effetto di estratto di amministrazione, singolo e combinato, sono contro la concentrazione di creatinina ogni settimana; *Diverse significativamente, contro il risultato positivo del gruppo di controllo (p<0.05); **Differenti in modo significativo rispetto al valore negativo del gruppo di controllo (p<0.05); a: Diversi significativamente, contro il risultato positivo del gruppo di controllo (p<0.10); b: Diversi in modo significativo rispetto al valore negativo del gruppo di controllo (p<0.10); c: Differenti in modo significativo rispetto alla prima settimana del valore di se stesso (p<0.,05); d: Diverso significativamente rispetto al valore della prima settimana di se stesso (p<0.10) |
Fig. 2 (a-f): | Profilo istopatologico della corteccia renale una settimana dopo la somministrazione dell’induttore con ingrandimento 100x; (a) Gruppo di controllo positivo, (b) Gruppo di test di seta di mais, (c) Gruppo di test Binahong, (d) Gruppo di test di combinazione di mezza dose di seta di mais, (e) Gruppo di test di combinazione di una dose di, Arrow sign (→) showed glomerular atrophy, whereas, (*) showed vacuolization |
Fig., 3(a-f): | Histopathological profile of kidney medulla one week after inductor administration on 100x magnification; (a) Positive control group, (b) Corn silk test group, (c) Binahong test group, (d) Corn silk binahong half dose combination test group, (e) Corn silk binahong one dose combination test group and (f) Negative control group |
Fig., 4: | Effetto di estratto di amministrazione, singolo e combinato, sono contro la concentrazione di urea ogni settimana; *Diverse significativamente, contro il risultato positivo del gruppo di controllo (p<0.05); **Differenti in modo significativo rispetto al valore negativo del gruppo di controllo (p<0.05); a: Diversi significativamente, contro il risultato positivo del gruppo di controllo (p<0.10); b: Diversi in modo significativo rispetto al valore negativo del gruppo di controllo (p<0.10); c: Differenti in modo significativo rispetto alla prima settimana del valore di se stesso (p<0.,05); d: Diverso significativamente rispetto al valore della prima settimana di se stesso (p<0.10) |
Il danno renale in tutti i gruppi indotti causato dalla somministrazione di gentamicina e piroxicam è stato confermato dall’aumento della concentrazione di urea sierica nella settimana 1. I livelli sierici di urea nel gruppo di controllo positivo sono diminuiti nelle settimane successive, ma tendono ad aumentare alla settimana 5. La tendenza non è stata trovata nei gruppi di test a cui è stato somministrato l’estratto.,
Effetto dell’estratto di foglie sull’istopatologia renale: I risultati della sezione trasversale microscopica hanno mostrato un miglioramento della struttura renale dopo la somministrazione dell’estratto. Sebbene il miglioramento sia stato osservato anche nel gruppo di controllo positivo, ciascuna sezione trasversale microscopica del gruppo di test ha mostrato prestazioni migliori e ha iniziato ad avvicinarsi al gruppo di controllo negativo, specialmente nella parte del midollo (Fig. 5, 6).
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Fig., 6(a-f): | Istopatologici profilo di rene midollo in settimana, 5 su ingrandimento 100x; (a) gruppo di controllo Positivo, (b) seta di Mais prova del gruppo, (c) Binahong il gruppo di test (d) Mais seta binahong metà di combinazione a dose test di gruppo, (e) seta di Mais binahong una combinazione a dose test di gruppo e (f) Gruppo di controllo negativo |
l’Effetto di estratto i livelli di TBARS: In questo studio, c’è stata una ricerca di un aumento della quantità di TBARS in gruppo indotta dalla gentamicina e piroxicam., Ogni gruppo di prova a cui è stato somministrato l’estratto aveva una quantità di TBAR inferiore e significativamente diversa dal gruppo di controllo positivo (Fig. 7).
Effetto dell’estratto sull’attività della catalasi: il gruppo di controllo positivo ha registrato un livello significativamente inferiore di catalasi rispetto al gruppo di controllo negativo. Il gruppo trattato con estratto ha registrato livelli significativamente elevati di catalasi indicando il ripristino dei livelli di catalasi più vicini agli animali normali non trattati (Fig. 8).
Effetto dell’estratto sull’attività della SOD: è stato riscontrato che l’insufficienza renale indotta dal gruppo ha ridotto l’attività della SOD., Il trattamento con estratto ha prodotto un aumento significativo di questi livelli enzimatici (Fig. 9).
Effetto dell’estratto sull’indice degli organi: Il gruppo di controllo positivo aveva il più alto indice renale tra gli altri gruppi ed era significativamente diverso rispetto al gruppo di controllo negativo.
Fig. 7: | Effetto della somministrazione dell’estratto, singola e combinata, contro il livello di TBARS nella settimana 5; * Diverso significativamente rispetto al gruppo di controllo positivo (p< 0.,05); **Different significantly against negative control group (p<0.05) |
Fig. 8: | Effect of extract administration, single and combination, against catalase activity in week 5; a Different significantly against positive control group (p<0.10) |
Fig., 9: | Effect of extract administration, single and combination, against SOD activity in week 5; *Different significantly against positive control group (p<0.05); **Different significantly against negative control group (p<0.05) |
Fig., 10: | Effetto di estratto di amministrazione, unico e combinazione, contro rene indice in settimana 5; **Differenti in modo significativo rispetto al valore negativo del gruppo di controllo (p<0.05) |
estrarre il gruppo aveva renale inferiore dell’indice rispetto al gruppo di controllo positivo e non c’erano differenze tra i gruppi di prova (Fig. 10).,
DISCUSSIONE
I risultati che sono stati mostrati dall’aumento della concentrazione di creatinina e urea nella prima settimana di trattamento, hanno supportato precedenti ricerche che hanno suggerito che i modelli di insufficienza renale nel ratto potrebbero essere formati rapidamente dando una combinazione di gentamicina e piroxicam (Sukandar et al., 2011). Le dosi sono state somministrate per 7 giorni per la durata era stato segnalato per indurre danni renali., L’aumento dei livelli di creatinina ha indicato che l’induttore, in particolare la gentamicina, potrebbe causare una diminuzione della funzione di filtrazione glomerulare, mentre i risultati istologici hanno mostrato che la gentamicina ha un’influenza importante sul tubulo, in particolare sul tubulo prossimale (Rybak et al., 1987; Dehghani et al., 2011; Ozbek et al., 2009). Il danno tubulare è stato probabilmente derivato come risultato dell’apoptosi che è essenzialmente uno dei processi importanti per mantenere l’omeostasi., In questo processo, sia i lisosomi che i mitocondri inviano segnali che causano la rottura delle membrane e il rilascio di idrolasi acide lisosomiali (De Souza et al., 2009; Denamur et al., 2008).
Il profilo della concentrazione di creatinina del gruppo di test di combinazione mostra una tendenza che gli estratti stanno lavorando in modo additivo e dipendente dal tempo. Pertanto, il miglioramento della funzionalità renale potrebbe essere ottenuto prolungando il periodo di applicazione piuttosto che aumentando la dose.,
Il livello crescente di urea è stato chiaramente visto nella quinta settimana di terapia che è stato confermato il grave livello di danno renale (Parlakpinar et al., 2005). L’aumento ha indicato che è probabile che il danno rimanga nel gruppo di controllo positivo. La tendenza all’elevazione non è stata trovata nei gruppi di test a cui sono stati somministrati estratti. Questo risultato ha confermato l’attività protettiva del rene fornita dall’estratto.
Il danno renale è stato supportato anche dai valori dell’indice di organo che erano più alti rispetto al gruppo di controllo negativo., I valori elevati dell’indice del gruppo di controllo positivo e il gruppo di test potrebbe essere a causa del verificarsi di edema e di accumulo di liquido nella patologia extravasal spazio, soprattutto nell’interstizio, a causa della necrosi tubulare (Meliani, 2006; Zulkarnain, 2009) e potrebbe anche essere causato dalla proliferazione e l’apoptosi delle cellule mesangiali contemporaneamente. Queste cellule mesangiali sono cellule speciali che si trovano intorno ai vasi sanguigni nei reni. In uno studio, sia in vivo che in vitro, è stato rivelato che la gentamicina ha stimolato la contrazione e la proliferazione delle cellule mesangiali., La gentamicina è stata anche in grado di aumentare l’espressione o l’attivazione della proteina proapoptosi in modo che, potrebbe causare la rottura della membrana lisosomiale e il rilascio di idrolasi acide che hanno contribuito all’apoptosi e alla necrosi delle cellule tubulari prossimali (De Souza et al., 2009; Martinez-Salgado et al., 2004).
Poiché l’indice di alto valore del gruppo di test, si potrebbe concludere che l’estratto non ha funzionato nel prevenire o riparare il danno delle cellule mesangiali., Tuttavia, l’estratto è stato in grado di mostrare un miglioramento dei parametri biochimici e istologici, quindi è stato possibile che l’estratto potesse massimizzare le prestazioni delle cellule mesangiali che erano ancora funzionanti.
Altri parametri che vengono analizzati in questo studio sono legati allo stress ossidativo. Lo stress ossidativo è una condizione anormale in cui l’aumento del prodotto ossidante non può essere contrastato dall’aumento della produzione di antiossidanti. L’assenza rende l’equilibrio del corpo non sono in una zona sicura (Rico et al., 2006; Kandemir et al., 2011).,
Vari studi hanno dimostrato il coinvolgimento dello stress ossidativo in molte delle malattie degenerative, una delle quali è l’insufficienza renale (Polat et al., 2006). L’uremia stessa causa un aumento della produzione di radicali liberi e persino la procedura di emodialisi potrebbe talvolta aumentare la quantità di radicali (Galle, 2001). Queste cose causano un maggiore rischio di morbilità e probabilità di soffrire di altre malattie del paziente con insufficienza renale rispetto ai pazienti comuni senza insufficienza renale (Luciak, 2004)., Esistono diversi parametri che possono essere utilizzati per prevedere il livello di stress ossidativo nei pazienti con insufficienza renale, come il diene coniugato, gli enzimi antiossidanti, i prodotti di perossidazione della metilguanidina come creatinina, l’attività antiossidante sierica e la perossidazione lipidica (Gotoh et al., 1997).
Si è scoperto che le specie radicali dell’ossigeno, come l’anione superossido, il perossido di idrogeno e i radicali idrossilici, hanno avuto un ruolo nella fisiopatologia della gentamicina. Le specie radicali dell’ossigeno causano rapidi cambiamenti nella composizione dei lipidi di membrana o meglio noti come perossidazione lipidica., Inoltre, le cellule perdono rapidamente il loro equilibrio osmotico con conseguente aumento dei livelli di calcio intracellulare. Questo porta ad edema / gonfiore delle cellule che sono una manifestazione precoce del danno che è ancora reversibile (Kadkhodaee et al., 2005; Derakhshanfar et al., 2007). D’altra parte, le specie radicali possono consumare la maggior parte delle prestazioni dell’enzima, come la superossido dismutasi (SOD) e la catalasi, riducendo così l’attività di questi enzimi (Abdel-Raheem et al., 2010).,
La perossidazione lipidica potrebbe essere definita come danno ossidativo alle strutture lipidiche che contengono doppi legami tra i carboni. Un’altra definizione rivela che la perossidazione lipidica è un processo associato ai radicali liberi, un processo che non è controllato e può funzionare continuamente causando interruzioni sulla membrana, sui lipidi e su altri componenti cellulari. La perossidazione lipidica che si verifica continuamente può essere un fattore importante nella patogenesi delle complicanze dell’insufficienza renale (Shanmugam et al., 2009)., Come indicato nel paragrafo precedente, nel corpo umano, la struttura dei lipidi si trova comunemente nelle membrane cellulari. Che lo rende più complesso è che la membrana diventa prima difesa per ciascuna delle cellule, come i mitocondri, plasma, reticolo endoplasmatico, lisosomi, perossisomi e altri. Inoltre i metaboliti formati tra i processi di ossidazione possono dare effetti negativi su altri luoghi rispetto al luogo di origine ossidazione (Devasagayam et al., 2003).,
Un risultato di perossidazione lipidica è composti aldeidi che possono reagire con l’acido per formare un tiobarbiturat rosa che sono facilmente rilevabili utilizzando uno spettrofotometro. Tali composti sono spesso indicati come composti reattivi all’acido tiobarbiturat o TBARS (sostanze reattive dell’acido tiobarbiturico). TBARS come uno dei prodotti di perossidazione lipidica può essere utilizzato come riferimento per prevedere quanti sono i radicali di produzione. In questo studio, è stato trovato un aumento della quantità di TBARS indotta da gentamicina e piroxicam., Ogni gruppo di test ha meno della quantità di TBARS e significativamente diverso dal gruppo di controllo positivo (Fig. 7).
Sembra che l’insufficienza renale tende a indebolire il sistema di difesa contro i radicali liberi. Questo rende l’elevata quantità di radicali liberi che hanno un impatto sugli alti livelli di danno tissutale. Questi fatti confermano i risultati della sezione trasversale microscopica che mostrano livelli più elevati di necrosi tubulare nel gruppo di controllo positivo rispetto al gruppo di test o al gruppo di controllo negativo., Molte prove hanno suggerito che l’eccessiva quantità di radicali liberi a causa di insufficienza renale può peggiorare la malattia e aumentare il rischio di complicanze. Da questi risultati, sembra probabile che l’estratto abbia attività antiossidante perché può diminuire il livello di perossidazione lipidica nel gruppo di test. Il declino può essere causato dall’attività di protezione lipidica della membrana, dal tessuto di riparazione fornito dagli estratti o dallo smorzamento dei radicali liberi che riducono direttamente la quantità di radicali liberi trovati in modo che non ci siano radicali che possono attaccare le membrane lipidiche., Inoltre, questi risultati confermano dati precedenti che dimostrano che la somministrazione di combinazione non dà attività superiore piuttosto che l’uso di estratto singolo (Prasanna e Purnima, 2011).
Da Fig. 7, si può vedere che il livello di perossidazione lipidica di ciascun gruppo di test è inferiore al gruppo di controllo negativo anche se solo il gruppo di test di seta di mais che era significativamente diverso rispetto al gruppo di controllo negativo. Mostra che l’estratto può migliorare la resistenza della membrana cellulare contro l’ossidante in modo che il danno tissutale possa essere prevenuto o corretto., Più alto livello di resistenza causa più bassa concentrazione di creatinina sierica del gruppo di prova rispetto al suo valore iniziale e può imitare creatinina sierica del gruppo di controllo negativo.
Il sistema di protezione contro le specie radicali dell’ossigeno o i prodotti di ossidazione di lipidi, proteine e DNA è fornito da enzimi antiossidanti come SOD e catalasi. In altre parole, SOD e catalasi sono i due principali esempi di enzimi radicali combattenti in vivo. È stato trovato che c’era attività diminuita di entrambi gli enzimi, SOD e catalasi, nello stato di insufficienza renale., Di conseguenza, è stato aumentato il numero di anioni superossido e perossido di idrogeno per produrre radicali idrossilici. Alla fine, il radicale idrossilico può iniziare la perossidazione lipidica. Questo processo può aumentare il livello di danno ai reni (Palani et al., 2009). SOD può catalizzare la dismutasi degli anioni superossido in perossido di idrogeno che vengono poi disattivati dalla catalasi in acqua (Kim et al., 2012). Ciò indica che in uno stato di stress ossidativo, vi è stata una diminuzione dell’attività o dell’inattivazione del sistema di difesa antiossidante (Olagunju et al., 2009; Palani et al., 2009)., La diminuzione dell’attività dell’enzima a volte è una compensazione per l’aumento del numero di radicali. In altre parole, un aumento del numero di forze radicali il sistema immunitario a emettere più lavoro per eliminare l’ossidante. Tuttavia, può innescare una serie di altri effetti più dannosi (Geo Vigila e Baskaran, 2011). L’estratto, da solo o in combinazione, può aumentare l’attività dell’enzima SOD e catalasi rispetto al gruppo di controllo positivo (Fig. 8, 9).,
I risultati di questo studio hanno confermato che la somministrazione di induttori, gentamicina e piroxicam, potrebbe aumentare la perossidazione lipidica nel rene caratterizzato da un aumento dei TBAR e da una diminuzione dell’attività enzimatica antiossidante, sebbene possano verificarsi anche altri meccanismi di danno. C’era una tendenza che la seta di mais o gli estratti di binahong hanno attività antiossidante che potrebbe proteggere il rene dalla nefrotossicità. Gli agenti antiossidanti hanno dimostrato di avere la capacità di prevenire o riparare i danni ai reni., I dati di cui sopra hanno indicato che l’estratto può aiutare a migliorare lo stato antiossidante nel modello di ratto di insufficienza renale.
Questi dati confermano i risultati di precedenti studi relativi alla seta di mais. Vari studi hanno rivelato l’attività antiossidante della seta di mais che può essere causata dall’alto contenuto di composti flavonoidi o fenolici (Ebrahimzadeh et al., 2008; Alam, 2011; Bhaigyabati et al., 2011). In connessione con il suo estratto antiossidante, estratto di seta di mais sono anche potenzialmente essere usato per trattare altre malattie associate con lo stress ossidativo.,
Mentre binahong lascia, non molte pubblicazioni di ricerca che rivelano le attività associate agli antiossidanti. Alcuni studi rivelano l’attività di binahong come antibatterico e guarigione delle ferite (Astuti et al., 2011). Tuttavia, è possibile che binahong abbia anche attività antiossidante dato il flavonoide contenuto nell’estratto.
I flavonoidi sono composti fenolici presenti in molte piante. Piante utilizzate per utilizzare i flavonoidi per proteggersi dai danni ossidativi inibendo o riducendo i radicali liberi e le specie reattive dell’ossigeno che si presentano a causa dell’esposizione al sole., È causato dalla presenza di strutture ad anello coniugato e gruppi idrossilici. Pertanto, si suggerisce che gli alti flavonoidi abbiano un ruolo nel prevenire che le specie radicali dell’ossigeno causino citotossicità e danni ai tessuti negli esseri umani (Anila e Vijayalakshmi, 2003).
L’attività di soppressione contro lo stress ossidativo può anche essere generata dall’interazione tra i componenti contenuti nell’estratto., Alcuni studi rivelano che gli isolati contenenti alcaloidi hanno effetti antiossidanti e possono migliorare la funzionalità epatica precedentemente danneggiata dall’uso di CCl4 (sia la seta di mais che l’estratto di foglie binahong contengono alcaloidi). In questo caso, CCl4 produce danni attraverso la produzione di radicali liberi quindi, ci sono somiglianze che possono essere razionalizzate sulle condizioni di questo studio (Maiza-Benabdesselam et al., 2007; Singh et al., 2010; Parthasarathy et al., 2009; Ravikumar e Gnanadesigan, 2011). Si prevede inoltre che la presenza di sostanze tanniche nella seta di mais possa fornire protezione contro i danni., Le sostanze tanniche hanno attività astringenti che possono causare la precipitazione delle proteine nella membrana cellulare che formano la barriera che impedisce l’attacco dei radicali liberi.
CONCLUSIONE
Sia seta di mais (Zea mays L.) e binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) gli estratti di foglie potrebbero migliorare la funzione renale nel modello di ratto di insufficienza renale. La combinazione di una mezza dose di ciascun estratto ha mostrato effetti comparabili o leggermente migliori di un singolo estratto che mostrava di avere almeno un effetto additivo., La riduzione dello stress ossidativo fornito da ciascun estratto e dalle loro combinazioni potrebbe essere correlata al meccanismo di riparazione dell’insufficienza renale.
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