avsedd användning

Hardy diagnostik Mannitol Salt Agar (MSA) rekommenderas för användning som ett selektivt och differentiellt medium för isolering av patogena stafylokocker.

sammanfattning

Koch rapporterade användningen av ett medium innehållande 7,5% natriumklorid som selektivt medel för isolering av stafylokocker 1942.,(5) resultaten bekräftades och förbättrades av Chapman 1945 genom tillsats av denna saltkoncentration till Fenolröd mannitol Agar, eftersom Staphylococcus aureus vanligtvis fermenterar mannitol.(3) icke-patogena stafylokocker visar vanligtvis mindre frodig tillväxt på detta medium efter inkubationsperioden.

en natriumklorid, koncentration på 7, 5%, är nästan tio gånger den vanliga koncentrationen som ses i de flesta medier. Det tjänar till att hämma de flesta organismer utom stafylokocker i blandade floraprover. Nötköttextraktet och peptonerna levererar de väsentliga elementen kol, kväve och svavel., Mannitol tillsätts för att visa organismernas fermentationskapacitet. Syraproduktion som ett resultat av jäsning av detta socker resulterar i bildandet av kolonier med en gul zon. De stafylokocker som inte jäser mannitol visar en lila eller röd zon runt kolonierna.

Mannitol Salt Agar (MSA) rekommenderas av American Public Health Association för uppräkning av stafylokocker i livsmedel och mejeriprodukter.,(9,10)

FORMULA

Ingredients per liter of deionized water:*

Sodium Chloride 75.0gm
Proteose Peptone 10.0gm
Mannitol 10.0gm
Beef Extract 1.0gm
Phenol Red 0.025gm
Agar 15.0gm

Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.,

* justerat och / eller kompletterat efter behov för att uppfylla prestandakriterier.

lagring och hållbarhet

lagring: vid mottagandet lagra vid 2-8ºC bort från direkt ljus. Media ska inte användas om det finns tecken på försämring (krympning, sprickbildning eller missfärgning), kontaminering eller om utgångsdatumet har passerat. Produkten är ljus och temperaturkänslig; skydda mot ljus, överdriven värme, fukt och frysning.

försiktighetsåtgärder

provsamling: se listade referenser för information om provsamling.,(1,2,4,7) infektiöst material bör utan dröjsmål lämnas in direkt till laboratoriet och skyddas mot stark värme och kyla. Om bearbetningen ska försenas bör preparatet ympas in i ett lämpligt transportmedium och kylas till dess ympning sker.

användningsmetod: låt plattorna värmas till rumstemperatur och agarytan torka före ympning. Starkt inokulera och strimma provet så snart som möjligt efter insamling. Om provet som ska odlas är på en bomullstopp, rulla pinnen över ett litet område av agarytan., Strimma för isolering med en steril slinga. Inkubera plattor aerobt vid 35-37ºC för 24-48 timmar. Undersök kolonial morfologi.

tolkning av resultat

Mannitolfermentorer som S. aureus visas som gula kolonier med gula zoner i media. Icke-mannitol fermentorer som S. epidermidis, om närvarande, kommer att ha klar rosa till röda kolonier utan gul färgförändring i mediet. Konsultera listade referenser för identifiering av kolonimorfologi och ytterligare biokemiska tester som krävs för identifiering.,(1,2,4,7)

begränsningar

de flesta andra organismer än stafylokocker hämmas av den höga saltkoncentrationen som finns i Mannitolsaltagar utom för vissa halofilliska marina organismer.

material som krävs men inte tillhandahålls

standard mikrobiologiska förnödenheter och utrustning såsom loopar, kompressorspinnar, applikatorspinnar, andra odlingsmedier, förbränningsugnar, inkubatorer etc., liksom serologiska och biokemiska reagenser, tillhandahålls inte.,

QUALITY CONTROL

Test Organisms Inoculation Method* Incubation Results
Time Temperature Atmosphere
Mannitol Salt Agar (Cat. no., J330):
Staphylococcus aureus
ATCC® 6538
J 18hr 35°C Aerobic Growth; yellow colonies and media at 18-24 hours
Escherichia coli **
ATCC® 8739
B 72hrs 35°C Aerobic Partial to complete inhibition
Mannitol Salt Agar (Cat. no.,”>Aerobic Partial to complete inhibition
Escherichia coli
ATCC® 8739
A 72hr 30-35°C Aerobic Partial to complete inhibition

USER QUALITY CONTROL

Physical Appearance

Mannitol Salt Agar (MSA) should appear clear, slightly opalescent, and pinkish-red in color.,

Staphylococcus aureus (ATCC® 25923) kolonier som växer på Mannitolsaltagar. Inkuberas aerobt i 48 timmar vid 35ºC.

Proteus mirabilis (ATCC® 12453) tillväxt hämmas på mannitol Salt Agar. Inkuberas aerobt i 48 timmar vid 35ºC.

2. Tille, P. Bailey och Scott Diagnostik Mikrobiologi, C. V. Mosby ’ Företag, St. Louis, MO.

3. Chapman, G. H. 1945. J. Bacteriol.; 50:201.

4. Isenberg, H. D. Klinisk Mikrobiologi Förfaranden Handbook, Vol., I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

5. Koch, F. E. 1942. Zentr. Bakt. Labt. Orig.; 149:122.

7. Jorgensen, J. H., et al. 2015. Manual för Klinisk Mikrobiologi, 11th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

8. Kvalitetssäkring för kommersiellt beredda mikrobiologiska odlingsmedier, M22. Kliniska och LaboratoryStandards Institute (CLSI (tidigare NCCLS), Wayne, PA.

9. American Public Health Association. 1993. Standardmetoder för undersökning av mejeriprodukter, 16th ed. APHA, Washington, D.,C.

10. Apha tekniska kommittén för mikrobiologiska metoder för livsmedel. 2001. Kompendium av metoder för mikrobiologisk undersökning av livsmedel, 4: e ed. APHA, Washington, D. C.

ATCC är ett registrerat varumärke som tillhör American type Culture Collection.

IFU-10553