introduktion (E. Coli)

vanligen kallad E. coli, Escherichia coli är en bakterie som istypiskt finns i ett antal miljöer, inklusive olika livsmedel, jord-ochanimala tarmar. E. coli är mycket varierande och tillhör genusenscherichia., Medan de flesta av stammarna är ofarliga (och ocksåviktigt i människans tarmkanal), andra är skadliga och kan orsaka mycketallvarliga hälsokonsekvenser. Ett bra exempel på detta är E coli 0157: H7.,v>

förutom matförgiftning som kan orsakadiarré och andra problem i matsmältningssystemet orsakar skadliga stammar av e colican följande hälsoproblem;

  • infektion av urinarytrakten
  • lunginflammation
  • respiratorisk sjukdom

I tarmkanalen spelar E coli en viktig roll genom att den hjälper till i matsmältningen och stöder absorptionen avvitala vitaminer från mat i kroppen., In addition, it has been shown to bebeneficial in that it prevents the growth and proliferation of other harmfulspecies of bacteria that would otherwise cause health problems.

Main Category of Pathogenic (Diarrheagenic) E. Coli.

  • Shiga toxin-producing Ecoli (STEC)
  • Enterotoxigenic E coli(ETEC)
  • Enteropathogenic E coli(EPEC)
  • Enteroaggregative E., coli(EAEC)
  • Enteroinvasiv E coli(EIEC)
  • diffus vidhäftande E coli(DAEC)

gramfläck

E. coli beskrivs som ett Gramnegativbakterium. Detta beror på att de fläckar negativa med hjälp av Gramstain.

gramfläcken är en differentialteknik som vanligtvis används för att klassificera bakterier. Färgtekniken skiljer mellan två huvudtyper av bakterier (gram positiv ochgram negativ) genom att ge färg på cellerna.,

eftersom gramnegativa bakterier har E. coli ytterligare ett yttre membran som består av fosfolipider ochlipopolysackarider. Närvaron lipopolysackarider på det yttre membranet avbakterier ger den en övergripande negativ laddning till cellväggen. På grund av dessaegenskaper behåller E. coli inte kristallviolett under Gramfärgningsprocessen.

se sidan förklara grampositiva och gramnegativa bakterier

E., Coli-mikroskopi

för att avgöra om en stam(er) är närvarande i ett prov är det nödvändigt att fläcka provet. Här är Gramfläckanvänds eftersom det hjälper skilja mellan grampositiva och gramnegativa bakterier i ett prov.

att vara en differentiell fläck är Gram-fläcken mer komplex jämfört med enklare fläckar som metylen blue.As sådan används mer än en fläck för att differentiera dess cellulära komponenter.,

For this technique, 3 different stains are used.These include:

  • Crystal violet
  • Iodine
  • Safranin

Requirements

  • Microscope glass slide
  • A collecting wire loop
  • A heater (Burner)
  • Sample (E., Div id=”ec88356dd9″>destillerat vatten
  • gramfläck (kristallviolett,Jodfläck och karbol Fuschin)
  • alkohol

smear preparation

  • innan du Scoopar provet,värm trådslingan och låt svalna (för att göra steril).
  • använd trådslingan, scoopand placera buljongkulturen på en ren, steril bild.,
  • Försiktigt sprida inoculumto ungefär en centimeter i diameter (sprida prov på bilden)
  • För plattan kulturer (ofbacteria) använd en steril wire loop-för att droppa koksaltlösning i themiddle/mitten av bilden
  • Använda annan steril wireloop (värme och kyla) ta en liten mängd av provet och rör om droppe vatten för att bilda en emulsion

Fastställande

Här är värme som används för fastställande., Värmefixeringsproceduren innebär följande steg:

  • lufttorka sliden för att smeten ska torka
  • passera gliden genom lågan några gånger (2 eller 3 gånger) smeta sida upp

* under värmefixering, undvik överhettning av bilden.,D=”448ac82572″>

Gramfärgning

  • placera bilden på astaining rack och översvämma smeten med kristallviolett i ungefär en minut
  • luta gliden ochrinse något med vatten (destillerat eller kranvatten) försiktigt – undvik att tvätta grovt theslide
  • översvämma provet med Jodinoch låt gliden stå i ca 1 minut
  • luta lätt slideagain och skölj med kran ellerstillerat vatten (försiktigt).,
  • luta bilden och avfärga med 95% etylalkohol/aceton – avfärgning bör göras genom att applicera alkoholen i dropparför ca 8 sekunder
  • skölj med vatten försiktigt
  • Blot bilden torr
  • placera bilden påmikroskop och visa provet

när det ses under mikroskopet, gram-negativee. Coli kommer att visas rosa i färg., Frånvaron av detta (av lila färg) ärindikativ för Gram-positiva bakterier och frånvaron av Gram-negativ E. Coli.

hängande droppmetod

den hängande droppmetoden avser en tekniksom hjälper till att undersöka små, levande och ofärgade organismer. Det kan användas förSådana rörliga bakterier som Ps. fluorescens och E. coli.,

Med hängande droptechnique är också mycket viktigt med tanke på att det hjälper till att skilja mellan Brownianmovement (förflyttning av partiklar som är suspenderade i en vätska) och motilityof mikroorganismer., loop genom att försiktigt placera en loopful av buljongen till mitten av glas täckglaset

  • Vrid glasskiva overthe prov på täckglaset att ha provet som ligger mellan bild och thecover slip
  • Placera objektglaset på themicroscope för visning (täckglaset ska vara på topp)
  • Börja med den lägsta kraft och visa prov

    • för Att avgöra om bakterierna isreally att flytta, det är viktigt att se till att den rör sig i differentdirections och ändra position., Detta skiljer organismens motilitet från enbart Brownian motion.

    se även: bakterier under mikroskopet, se Eubacteria sidan, Läs mer om koliformer, mikroskopi kultur och känslighet

    återgå till Mikroskopförsök, BrightField mikroskopi och objektglas förberedelse

    tillbaka från E., Coli under mikroskopet till MicroscopeMaster Home