en kvinnlig patient, 30 år gammal, antogs i februari 2017 till avdelningen och kliniken för allergologi, Klinisk Immunologi och inre sjukdomar på grund av återkommande allergiska reaktioner efter konsumtion av olika livsmedel.
dessa reaktioner var till stor del dermala, i form av urtikaria på hela kroppen., Symptom på återkommande, generaliserad urtikaria upplevdes efter intag av olika särskilt komplexa rätter som innehåller många olika ingredienser. Patienten associerade dessa symtom med konsumtion av paprika, klementiner, bovete honung och rött vin.
den allvarligaste allergiska reaktionen i patientens liv inträffade efter att ha ätit en mangofrukt. Inom några minuter utvecklade patienten en generaliserad urtikaria, följt av ansiktsödem, stark magsmärta och vattnig diarré. Ambulanspersonalen ringde. Patienten administrerades adrenalin, steroider och antihistaminer.,
en detaljerad medicinsk historia visade att patienten under de senaste 6 åren hade symtom på säsongsbunden rinit (lacrimation, klåda ögonlock och vattnig nasal urladdning).
patienten vid den tiden behandlades också med levotyroxin för hypotyreos. Patientens familjehistoria är ridd med allergiska sjukdomar: patientens mamma är allergisk mot inhalatoriska allergener och hennes far till björk och katt.
i detta komplexa fall krävde diagnos ett brett spektrum av diagnostiska metoder., Som en del av den diagnostik som utförs på Avdelningen och Kliniken för Allergologi, Klinisk Immunologi och Inre Sjukdomar, patienten hade skin prick test med en uppsättning genom inandning av allergener (Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides pteronyssinus, gräs/spannmål, ogräs, Aspergillus fumigatus, Cladosporium herbarum, kattens päls, poppel, hassel, al, björk, gråbo, svartkämpar) och mat allergener (kyckling ägg, komjölk, tomat, karp, banan, rågmjöl, vetemjöl, jordnötter, hasselnötter, griskött, kycklingkött, orange) från Allergopharma-Nexter Sp. z o. o. (Ltd.,), liksom inhemska hudtester med färska livsmedel (bovete honung, paprika, mango, clementine, morot, selleri, jordnötter, banan, senap, gurkmeja, kummin, rött vin).,vels av IgE specifika för vald allergener (gråbo, malört, tidigt gräs mix, sen gräs mix, selleri, paprika, morot, mango, banan, persika, äpple, jordnötter, hasselnötter, Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, tidigt träd mix, sen träd mix, björk, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, Alternaria tenius, ko mjölk protein, seasoning mix, senap) bestämdes med ImmunoCap (ThermoFisher Vetenskapliga, Uppsala, Sverige) system, hjälp Phadia100 utrustning enligt tillverkarens instruktioner (ImmunoCAP specifi IgE, fluoroenzymeimmunoassay, 52-5291-SV/05).,
diagnosen utvidgades genom en bestämning av nivån av IgE-specifik för allergenkomponenter, med hjälp av ImmunoCap ISAC-metoden.
var och en av dessa tester har olika specificitet och känslighet och, inte mindre viktigt, tillgänglighet och kostnad. Hud pricktest anses vara en snabb, billig metod med omedelbara resultat. Tyvärr är deras detekteringshastighet i matallergi begränsad. I en ny artikel av Griffiths et al. detekteringsfrekvensen för SPT (53%) och ISAC (59%) var likartad, med en högre detekteringshastighet för ImmunoCAP-testning (66%)., Hos patienter med nötallergier gjorde tester för sensibilisering mot nötter på samma sätt, men med större känslighet (71%) för ImmunoCAP-test än SPT (53%) eller ISAC (65%). Därför utvidgade vi diagnosen i detta fall till in vitro bestämning av koncentrationen av allergenspecifik IgE. Guldstandarden vid diagnos av matallergi är fortfarande den dubbelblinda placebokontrollerade matutmaningen. I detta fall samtyckte patienten inte till provokationsutmaningar.,
hudpricktest var positiva för följande allergenextrakt (wheal medeldiameter i millimeter): gräs 7 mm; ogräs: 8 mm; kattens päls: 5 mm; mugwort: 6 mm; ribwort plantain: 4 mm; selleri: 2 mm; clementine: 2 mm (histamin 4 mm, negativ kontroll 0 mm, ett resultat tolkades som positivt vid en wheal medeldiameter ≥ 3 mm). Ingen hudreaktion observerades för andra testade allergenextrakt. Den totala IgE-nivån var 406.53 kU/L.
resultaten av inhemska tester var positiva för mango 5 mm, selleri 3 mm.,
resultat för specifika IgE-nivåer som testats med ImmunoCap-metoden presenteras i Tabell 1. Förhöjda nivåer av IgE (över 0,35 kU/L) hittades mot Gråbo, malört, tidig gräsblandning, sen gräsblandning, selleri, paprika, morot, mango, banan, persika, äpple, jordnötter.
Efter att patienten släpptes ut från sjukhuset fick vi resultat från ImmunoCap ISAC-testerna (Tabell 2)., En hög nivå av specifika IgE för Konst v 1 (defensin) från gråbo och Phl p 1 från timothy var särskilt anmärkningsvärt. Det är värt att betona att det inte fanns några förhöjda nivåer av IgE som är specifika för komponenter av matallergener tillgängliga i ImmunoCap ISAC. Det är möjligt att symtom på OAS i denna patient berodde på korsreaktivitet med Timothy och mugwort allergener. Symptom på urtikaria kan också bero på känslighet för en av de livsmedelsallergener som nämns ovan., Den enda anafylaktiska reaktionen hos patienter livet inträffade efter konsumtion av mango, och denna överkänslighet var den som vi bestämde, krävde ytterligare diagnos.
här måste det tydligt anges att ImmunoCap ISAC-testet inte indikerar om patientens allergi mot mango i det fallet var ett resultat av en korsallergi med Art v 1 eller en allergi mot en annan molekyl, oberoende av mugwort. ImmunoCap ISAC har inga mango allergen komponenter tillgängliga.
för att klargöra detta applicerades ImmunoCap-inhibitionstestet med hjälp av allergenextraktet från färsk mangofrukt., Undersökningen var baserad på SPHIA modell (Single Point Högsta Hämning Möjligt Analys) beskrivs av Bernardi et al. 2011 .
metoden för denna inhiberingstest anses fortfarande vara experimentell, även om liknande inhiberingstest tidigare användes av flera författare. Till exempel, i vår forskningsenhet beskrivs ett fall av en patient som är allergisk mot solrosfrön, där ImmunoCap ISAC inhibitionstest användes för att bevisa korsreaktivitet. I inhiberingstestet Art v 1 hämmades Art v 3 och Kanna r 3 av proteinet närvarande i solrosfröallergenextraktet .,
för att utföra inhiberingstestet köptes en mogen mangofrukt i en lokal livsmedelsbutik som erbjuder eko-mat. Frukten tvättades, skälldes och gropen avlägsnades för att erhålla den ätbara delen. Det proteinhaltiga massaxtraktet erhölls med hjälp av metoder som beskrivits tidigare . Tärnad frukt frystes i flytande kväve och blandades till slät massa. Massan blandades sedan med 1 M NaCl i förhållandet 2: 1 (2:1, v/v) och lämnades vid 2-8 °C under 24 h. efter den tiden centrifugerades blandningen vid rumstemperatur vid 12 000×g under 60 min. Extraktet erhölls innehållande 2,35 mg / dL protein., I inhiberingstestet blandades det erhållna extraktet med patientens blodserum vid volymförhållandet 1: 1 och inkuberades vid 2-8 °C för 24 h . Ett blindprov framställdes samtidigt för att ta hänsyn till utspädning av serumet. För detta ändamål blandades patientens blodserum med 1 M NaCl (1:1, v/v) och inkuberades sedan vid 2-8 °C i 24 h. efter den tiden bestämdes nivån av IgE-specifik för mugwort, Art v1 och mango i det beredda materialet, både inhiberat och utspätt, och inhiberingsförhållandet beräknades.,
i inhiberingstestet uppnådde vi följande resultat—baslinjen för mugwort sIgE i patientens serum var 144,32 kU/L. i det blinda provet, efter utspädning med 1 M NaCl 1:1, var koncentrationen av sIgE 72,16 kU / L. efter inkubation av patientens serum med ett mangoallergenextrakt var nivån av mugwort IgE 48,81 kU / L. Det visades sålunda att mangoallergenextraktet hämmade bindningen av mugwort IgE med 32,38%.
baslinjen för Art v 1 sIgE i patientens serum var 99, 8 kU / L., I det blinda provet, efter utspädning med 1 M NaCl 1: 1, var koncentrationen av sIgE 49,9 kU/L. efter inkubation av patientens serum med mangoallergenextraktet var nivån av Art v 1 IgE 35,2 ku/L. Det visades sålunda att mangoallergenextraktet hämmade bindningen av IgE Art v 1 med 29,5%. Baserat på de utförda diagnostiska procedurerna visades att symtom som finns i patienten kan vara ett resultat av en korsreaktion mellan allergener av mango och Art v 1. Resultaten av inhiberingstestet presenteras i Fig. 1.
resultat av inhiberingstestet med mango extract
På grund av det faktum att detta inhiberingstest var en experimentell metod och det tidigare beskrivna protokollet ändrades för att följa behoven hos detta specifika fall utfördes ett inhiberingstest enligt ett annat protokoll för att för att ge en slutlig bekräftelse på korsallergi. Patientens serum inkuberades med allergenextraktet från en mangofrukt, med hjälp av Immunokapmatrisen., Immunokapen förtvättades fyra gånger: två gånger med tvättverketlösning Immunokap, och två gånger med den neutrala pH fosfatbufferten. 50 µL testat serum tillsattes till Immunokapen beredd på det sättet, och inkuberades för 1 h vid rumstemperatur, och centrifugerades sedan vid 1500×g för 2 min. Det erhållna antikroppsutarmade serumet och det ursprungliga serumet analyserades med avseende på förekomst av allergenkomponenten Art v 1, med användning av ImmunoCap-metoden.
baslinjen för Art v 1 sige hos patienter serum var 99, 8 kU / L., I detta fall späddes patientens serum inte, så negativ kontroll var inte nödvändig. Efter inkubation av patientens serum med ImmunoCap mango matris konstnärlig nivå v 1 IgE var 56,5 kU/L. Som ett resultat visade det sig att den ImmunoCap mango matris hämmade bindande för Konst v 1 IgE av 43.4%. Dessa resultat presenteras i Fig. 2.
resultat av hämningen med mangoallergenen på Immunokapmatrisen
Lämna ett svar