Introduksjon (E. Coli)

Ofte referert til som E. coli, Escherichia coli er en bakterie som istypically finnes i en rekke miljøer, inkludert ulike matvarer, jord andanimal tarmen. E. coli er svært mangfoldig, og tilhører genusEscherichia., Mens de fleste av stammer er ufarlig (og alsoimportant i den menneskelige tarmen), andre er skadelige og kan føre til veryserious helsemessige konsekvenser. Et godt eksempel på dette er E coli 0157:H7.,v>

Bortsett fra matforgiftning som kan causediarrhea og andre problemer i fordøyelsessystemet, og skadelige stammer av E colican forårsake følgende helseproblemer,

  • Smitte av urinarytract
  • Lungebetennelse
  • luftveissykdom

I tarmkanalen, E coli spiller animportant rolle i at det hjelper på fordøyelsen og støtter absorpsjon ofvital vitaminer fra maten i kroppen., In addition, it has been shown to bebeneficial in that it prevents the growth and proliferation of other harmfulspecies of bacteria that would otherwise cause health problems.

Main Category of Pathogenic (Diarrheagenic) E. Coli.

  • Shiga toxin-producing Ecoli (STEC)
  • Enterotoxigenic E coli(ETEC)
  • Enteropathogenic E coli(EPEC)
  • Enteroaggregative E., coli(EAEC)
  • Enteroinvasive E coli(EIEC)
  • Diffust tilhenger E coli(DAEC)

gramfarging

E. coli er beskrevet som en Gram-negativebacterium. Dette er fordi de flekken negative bruke Gramstain.

Den gramfarging er en differensial teknikk thatis ofte brukt til hensikt å klassifisere bakterier. Den stainingtechnique skiller mellom to hovedtyper av bakterier (gram positive andgram negative) ved å formidle farge på cellene.,

Er Gram-negative bakterier,E. coli, har en ekstra ytre membran som består av fosfolipider andlipopolysaccharides. Tilstedeværelsen lipopolysaccharides på den ytre membran ofbacteria gir det en samlet negativ ladning til cellevegg. På grunn av theseproperties, E. coli ikke beholde crystal violet under Gram stainingprocess.

Se side som forklarer Gram positive og Gram negative bakterier

E., Coli Mikroskopi

for Å avgjøre om det er en belastning(s) ispresent i en prøve, er det nødvendig å farge eksempel. Her, gramfarging isused som det bidrar til å skille mellom gram positive og gramnegative bakterier i en prøve.

å Være en differensial flekken,gramfarging er mer komplisert i forhold til mer enkle flekker som methylene blå.Som sådan, mer enn en flekk brukes for det formål å differensiere sine cellulære komponenter.,

For this technique, 3 different stains are used.These include:

  • Crystal violet
  • Iodine
  • Safranin

Requirements

  • Microscope glass slide
  • A collecting wire loop
  • A heater (Burner)
  • Sample (E., Coli Kultur)
  • Destillert vann
  • gramfarging (Crystal violet,Jod flekken og Carbol Fuschin)
  • Alkohol

Smøre Forberedelse

  • Før og vant prøven,varme wire loop og tillater kjøling (for å lage steril).
  • ved Hjelp av wire loop, scoopand sted suppen kultur på en ren, sterile lysbilde.,
  • Forsiktig spre inoculumto om en centimeter i diameter (spre eksempel på lysbilde)
  • For plate kulturer (ofbacteria) bruk en steril wire loop for å slippe saltvann i themiddle/midten av lysbildet
  • Bruk en annen steril wireloop (varme og kjøle seg) ta en liten mengde av prøven og rør onthe slipp av vann og danner en emulsjon

Fikse

Her, varmen som brukes for å feste., Varme fikse prosedyren innebærer følgende fremgangsmåte:

  • tørk lysbildet for å smøre tørr
  • Passere gli gjennom flammen et par ganger (2 eller 3 ganger) smøre side opp

* Under varme fikse, unngå overoppheting lysbildet.,d=»448ac82572″>

Gram-Farging

  • Plasser dekselet på astaining rack og flom smøre med crystal violet for omtrent ett minutt
  • Vipp dekselet andrinse med vann (destillert eller vann fra springen) forsiktig – Unngå omtrent vask theslide
  • Flom prøven med iodineand la skyv å stå i ca 1 minutt
  • vipp slideagain og skyll ved å trykke ordistilled vann (forsiktig).,
  • Vippe dekselet og decolorize med 95% ethylalcohol/aceton – decolorizing bør gjøres ved bruk av alkohol i dropsfor ca 8 sekunder
  • Skyll forsiktig med vann
  • Blot skyv tørr
  • Plasser lysbildet onmicroscope og vise eksempel

Når den vises under mikroskopet, Gram-negativeE. Coli vises rosa i farge., Fravær av denne (lilla farge) isindicative av Gram-positive bakterier og fravær av Gram-negative E. Coli.

Dråpe Metode

hengende slipp-metoden refererer til en techniquethat bidrar til å undersøke små -, oppholds-og unstained organismer. Det kan brukes forsuch motile bakterier som Ps. fluorescens og E. coli.,

Bruke den hengende droptechnique er også svært viktig med tanke på at det bidrar til å skille mellom Brownianmovement (bevegelse av partikler som er suspendert i en væske) og motilityof mikroorganismer., loop,nøye sted en loopful av suppen på midten av glass dekkglass

  • Slå på glassplaten utlevering eksempel på dekkglass å ha prøven lå mellom lysbilde-og thecover slip
  • Plasser dekselet på themicroscope for visning (dekkglass bør være på toppen)
  • Start med laveste powerand vise prøven

    • for Å finne ut om det er bakterier isreally å bevege seg, det er viktig å sikre at det er bevegelse i differentdirections og endre posisjon., Dette skiller motilitet av organismfrom bare Brownske bevegelser.

    Se Også: Bakterier i Mikroskop, Ser Eubacteria side, Lære mer om koliforme bakterier, Mikroskopi Kultur og Følsomhet

    gå Tilbake til Mikroskop Eksperimenter, BrightField Mikroskopi og Objektglass Forberedelse

    Tilbake fra E., Coli under Mikroskop for å MicroscopeMaster Hjem