En kvinnelig pasient, 30 år gammel, ble innlagt i februar 2017 til Institutt og Klinikk of Allergology, Klinisk Immunologi og Interne Sykdommer på grunn av tilbakevendende allergiske reaksjoner etter inntak av ulike matvarer.
Disse reaksjonene var stort sett dermal, i form av urticaria på hele kroppen., Symptomer av tilbakevendende, generalisert urticaria ble opplevd etter inntak ulike særlig komplekse retter som inneholder mange ulike ingredienser. Pasienten de symptomer assosiert med konsum av paprika, clementines, bokhvete honning, og rødvin.
Den mest alvorlig allergisk reaksjon i pasientens liv oppstod etter å ha spist en mango frukt. I flere minutter pasienten utviklet en generell urticaria, etterfulgt av ansikts ødemer, sterke magesmerter og vandig diaré. Ambulansepersonell ble kalt. Pasienten ble gitt adrenalin, steroider, og antihistaminer.,
En detaljert medisinsk historie viste at for de siste 6 årene pasienten hadde symptomer på sesongbestemte rhinitis (lacrimation, kløe på øyelokkene, og vannaktig nasal discharge).
pasienten på den tiden var også blir behandlet med levotyroksin for hypotyreose. Pasientens familie historie er kjørt med allergiske sykdommer: pasientens mor er allergisk mot inhalatory allergener, og hennes far til å bjørk og katt.
I denne komplekse saken diagnose kreves et bredt spekter av diagnostiske metoder., Som en del av diagnosen som er utført i den Avdeling og Klinikk of Allergology, Klinisk Immunologi og Interne Sykdommer, pasienten hadde hud stikke tester med et sett av inhalatory allergener (Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides pteronyssinus, gress/korn, ugress, Aspergillus fumigatus, Cladosporium herbarum, kattens pels, poppel, hassel, or, bjørk, burot, ribwort kokebanan) og mat allergener (kylling, egg, kumelk, tomat, karpe, banan, rugmel, hvetemel, peanøtter, hasselnøtt, svinekjøtt, kylling, kjøtt, oransje) fra Allergopharma-Nexter Sp. z o.o. (Ltd.,), samt native huden tester med ferske matvarer (bokhvete honning, paprika, mango, clementine, gulrot, selleri, peanøtter, banan, sennep, gurkemeie, karve, rødvin).,nivåer av IgE-spesifikke for utvalgte allergener (burot, malurt, tidlig gress mix, sent gress mix, selleri, paprika, gulrot, mango, banan, fersken, eple, peanøtter, hasselnøtter, Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, tidlig trær mix, sent trær mix, bjørk, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, Alternaria tenius, kumelk protein, krydder blanding, sennep) ble bestemt med ImmunoCap (ThermoFisher Vitenskapelige, Uppsala, Sverige) system, ved hjelp av Phadia100-utstyr i henhold til produsentens instruksjoner (ImmunoCAP specifi IgE, fluoroenzymeimmunoassay, 52-5291-NO/05).,
diagnose-ble utvidet med en fastsettelse av nivået av IgE-spesifikke for allergenkomponenter, ved hjelp av ImmunoCap ISAC-metoden.
Hver av disse testene har ulik spesifisitet og sensitivitet og, ikke mindre viktig, tilgjengelighet og pris. Huden stikke tester er å anse som en rask, billig metode med umiddelbare resultater. Dessverre, deres oppklaringsprosenten i mat allergi er begrenset. I en fersk artikkel av Griffiths et al. påvisning priser for SPTs (53%) og ISAC (59%) var lik, med en høyere oppklaringsprosenten for ImmunoCAP testing (66%)., Hos pasienter med mutter allergier, tester for allergi mot nøtter scoret på samme måte, men med en større følsomhet (71%) for ImmunoCAP tester enn SPT (53%) eller ISAC (65%). Derfor har vi utvidet diagnose i dette tilfellet til in vitro-bestemmelse av konsentrasjonen av allergenspesifikke IgE. Gullstandarden i diagnosen matvareallergi er fortsatt dobbelt-blind, placebo kontrollert mat utfordring. I dette tilfellet pasienten ikke samtykker til provokasjon utfordringer.,
Huden stikk testene var positive for følgende allergen ekstrakt (wheal gjennomsnittlig diameter i millimeter): gress 7 mm; ugress: 8 mm; kattens pels: 5 mm; burot: 6 mm; ribwort plantain: 4 mm; selleri: 2 mm; clementine: 2 mm (histamin 4 mm, negativ kontroll, 0 mm, et resultat ble tolket som positive i tilfelle av en wheal gjennomsnittlig diameter ≥ 3 mm). Ingen hud reaksjon ble observert for andre testet allergen ekstrakt. Total IgE nivå var 406.53 kU/L.
Resultatene av innfødte testene var positive for mango 5 mm, selleri 3 mm.,
Resultatene for spesifikke IgE-nivåene som ble testet ved hjelp av ImmunoCap-metoden er presentert i Tabell 1. Forhøyede nivåer av IgE (over forbruk av 0,35 kU/L) ble funnet mot burot, malurt, tidlig gress mix, sent gress mix, selleri, paprika, gulrot, mango, banan, fersken, eple, peanøtter.
Etter at pasienten ble utskrevet fra sykehuset fikk vi resultatene av ImmunoCap ISAC tester (Tabell 2)., Et høyt nivå av IgE-spesifikke for Kunst v 1 (defensin) fra burot og Phl p 1. timoteus var spesielt bemerkelsesverdig. Det er verdt å understreke at det var ingen forhøyede nivåer av IgE-spesifikke komponenter i mat allergener tilgjengelig i ImmunoCap ISAC. Det er mulig at symptomer på OAS i denne pasient som følge av kryssreaktivitet med timothy og burot allergener. Symptomer på urticaria kan også være et resultat av følsomhet til ett av mat allergener som er nevnt ovenfor., Den eneste anafylaktisk reaksjon i pasienter livet oppstod etter forbruk av mango, og dette overfølsomhet var den som bestemte vi oss for, kreves ytterligere diagnose.
Her må det være klart uttalt at ImmunoCap ISAC-test ikke viste om i det aktuelle tilfellet pasientens allergi mot mango var et resultat av en cross-allergi med Kunst v 1, eller en allergi til en annen molekyl, uavhengig av burot. ImmunoCap ISAC har ingen mango allergenkomponenter tilgjengelig.
for Å avklare dette, da, ImmunoCap hemming test ble brukt, ved hjelp av allergen ekstrakt fra fersk mango frukt., Undersøkelsen var basert på SPHIA modell (Single Point Høyeste Hemming Oppnåelig Analyse) beskrevet av Bernardi et al. i 2011 .
metodikk hemming av denne analysen er fortsatt anses som eksperimentell, selv om lignende hemming analysene ble brukt tidligere av flere forfattere. For eksempel, i vår research unit en sak om pasienten er allergisk mot solsikkefrø ble beskrevet, hvor ImmunoCap ISAC hemming test ble brukt for å bevise kryssreaktivitet. I hemmingsanalyse Art v 1, v Art 3, og Jug r 3 hemmet av protein til stede i solsikkefrø allergen ekstrakt .,
for Å utføre hemmingsanalyse en moden mango frukt ble kjøpt i en lokal butikk som tilbyr øko-mat. Frukten ble vaskes, skrelles og grav ble fjernet for å få tak i den spiselige delen. Protein-inneholder masse ekstrakt ble innhentet ved hjelp av metodene som er beskrevet tidligere . Terninger frukt var frosset i flytende nitrogen og blandet til en jevn masse. Massen ble deretter blandet med 1 M NaCl i forholdet 2:1 (2:1, v/v) og venstre ved 2-8 °C i 24 timer. Etter som tiden blandingen ble sentrifugerte ved romtemperatur på rundt 12 000×g i 60 min. Ekstraktet ble innhentet inneholder 2.35 mg/dL av protein., I hemming teste fikk ekstrakt ble blandet med pasientens blod serum på volum-forhold på 1:1, og inkubert ved 2-8 °C i 24 timer . En blind eksempel ble samtidig klargjort for å ta hensyn til fortynning av serum. For dette formål, pasientens blod serum ble blandet med 1 M NaCl (1:1 v/v), og deretter inkubert ved 2-8 °C i 24 timer. Etter som tiden, nivået av IgE-spesifikke for burot, Kunst v1, og mango var fastsatt i det utarbeidet materiale, både hemmet og utvannet, og hemming forholdet ble beregnet.,
I hemmingsanalyse vi oppnådd følgende resultater—den opprinnelige nivået av burot sIgE i pasientens serum var 144.32 kU/L. I blinde eksempel, etter å fortynne den med 1 M NaCl 1:1, konsentrasjonen av sIgE var 72.16 kU/L. Etter inkubering av pasientens serum med en mango allergen ekstrakt nivået av burot IgE ble 48.81 kU/L. Det var således vist at mango allergen ekstrakt hemmet binding av burot IgE ved 32.38%.
Den opprinnelige nivået av Kunst v 1 sIgE i pasientens serum var 99.8 kU/L., I blind eksempel, etter å fortynne den med 1 M NaCl 1:1, konsentrasjonen av sIgE var 49.9 kU/L. Etter inkubering av pasientens serum med mango allergen ekstrakt nivået av Kunst v 1 IgE ble 35.2 kU/L. Det var således vist at mango allergen ekstrakt hemmet binding av IgE-Art v 1 ved 29.5%. Basert på de utførte diagnostiske prosedyrer, som det ble vist at symptomene er til stede i pasient kan være et resultat av en cross-reaksjon mellom allergener av mango og Kunst v 1. Resultatene av hemming test er presentert i Fig. 1.
Resultatene av hemming test med mango ekstrakt
på Grunn av det faktum at dette hemming test var en eksperimentell metode og tidligere beskrevet protokollen ble endret til å følge behovene til denne konkrete saken, en hemming test i henhold til en annen protokoll som ble utført for å gi en endelig bekreftelse på korset-allergi. Pasientens serum ble inkubert med allergen ekstrakt fra mango frukt, med ImmunoCap matrise., ImmunoCap var pre-vasket fire ganger: to ganger med vask worksolution ImmunoCap, og to ganger med nøytral pH-fosfat buffer. 50 µL testet serum ble lagt til ImmunoCap forberedt på den måten, og inkubert for 1 time ved romtemperatur, og så sentrifugerte på 1500×g i 2 min. De fikk antistoff-utarmet serum, og de innfødte serum ble analysert for forekomst av Art v 1 allergen komponent, ved hjelp av ImmunoCap-metoden.
Den opprinnelige nivået av Kunst v 1 sIgE pasienter i serum var 99.8 kU/L., I dette tilfellet pasientens serum var ikke utvannet, slik negativ kontroll ikke var nødvendig. Etter inkubering av pasientens serum med ImmunoCap mango matrix nivået av Kunst v 1 IgE ble 56.5 kU/L. Som et resultat det ble vist at ImmunoCap mango matrix hemmet binding av Kunst v 1 IgE ved 43.4%. Disse resultatene er presentert i Fig. 2.
Resultatene av hemming med mango allergen på ImmunoCap matrix
Legg igjen en kommentar