VERWENDUNGSZWECK
Hardy Diagnostics Mannitolsalz-Agar (MSA) wird zur Verwendung als selektives und differentielles Medium zur Isolierung pathogener Staphylokokken empfohlen.
ZUSAMMENFASSUNG
Koch berichtete über die Verwendung eines Mediums, das 7,5% Natriumchlorid als selektives Mittel zur Isolierung von Staphylokokken im Jahr 1942 enthielt.,(5) Die Ergebnisse wurden 1945 von Chapman durch Zugabe dieser Salzkonzentration zu Phenol Red Mannitol Agar bestätigt und verbessert, da Staphylococcus aureus normalerweise Mannitol fermentiert.(3) Nicht pathogene Staphylokokken zeigen auf diesem Medium nach der Inkubationszeit in der Regel ein weniger üppiges Wachstum.
Eine Natriumchloridkonzentration von 7,5% ist fast zehnmal so hoch wie in den meisten Medien üblich. Es dient dazu, die meisten Organismen außer Staphylokokken in Mischflora Proben zu hemmen. Der Rindfleischextrakt und die Peptone liefern die wesentlichen Elemente Kohlenstoff, Stickstoff und Schwefel., Mannitol wird hinzugefügt, um die Fermentationsfähigkeit der Organismen zu zeigen. Die Säureproduktion als Ergebnis der Fermentation dieses Zuckers führt zur Bildung von Kolonien mit einer gelben Zone. Diese Staphylokokken, die Mannitol nicht fermentieren, zeigen eine violette oder rote Zone um die Kolonien.
Mannitol Salz Agar (MSA) wird von der American Public Health Association für die Aufzählung von Staphylokokken in Lebensmitteln und Milchprodukten empfohlen.,(9,10)
FORMULA
Ingredients per liter of deionized water:*
Sodium Chloride | 75.0gm |
Proteose Peptone | 10.0gm |
Mannitol | 10.0gm |
Beef Extract | 1.0gm |
Phenol Red | 0.025gm |
Agar | 15.0gm |
Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.,
* Nach Bedarf angepasst und/oder ergänzt, um Leistungskriterien zu erfüllen.
LAGERUNG UND HALTBARKEIT
Lagerung: Nach Erhalt bei 2-8ºC vor direktem Licht lagern. Medien sollten nicht verwendet werden, wenn Anzeichen einer Verschlechterung (Schrumpfung, Rissbildung oder Verfärbung), Kontamination oder Verfallsdatum vorliegen. Produkt ist licht und temperatur empfindlich; schützen von licht, übermäßige wärme, feuchtigkeit, und einfrieren.
VORSICHTSMAßNAHMEN
Probenentnahme: Informationen zur Probenentnahme finden Sie in den aufgeführten Referenzen.,(1,2,4,7) Infektiöses Material sollte unverzüglich direkt dem Labor vorgelegt und vor übermäßiger Hitze und Kälte geschützt werden. Wenn die Verarbeitung verzögert werden soll, sollte die Probe auf ein geeignetes Transportmedium geimpft und bis zur Impfung gekühlt werden.
Art der Anwendung: Die Platten vor der Impfung auf Raumtemperatur erwärmen und die Agaroberfläche trocknen lassen. Die Probe so schnell wie möglich nach der Entnahme stark impfen und streifen. Wenn sich das zu kultivierende Exemplar auf einem Tupfer befindet, rollen Sie den Tupfer über eine kleine Fläche der Agaroberfläche., Streifen für die Isolierung mit einer sterilen Schleife. Inkubieren Platten aerob bei 35-37 ° C für 24-48 Stunden. Untersuche die koloniale Morphologie.
INTERPRETATION DER ERGEBNISSE
Mannitolfermentoren wie S. aureus erscheinen als gelbe Kolonien mit gelben Zonen in den Medien. Nicht-Mannitolfermentoren wie S. epidermidis haben, falls vorhanden, klare rosa bis rote Kolonien ohne gelbe Farbänderung im Medium. Konsultieren Sie die aufgeführten Referenzen für die Identifizierung der Kolonie Morphologie und weitere biochemische Tests zur Identifizierung erforderlich.,(1,2,4,7)
EINSCHRÄNKUNGEN
Die meisten anderen Organismen als Staphylokokken werden durch die hohe Salzkonzentration in Mannitolsalz-Agar gehemmt, mit Ausnahme einiger halophiler Meeresorganismen.
ERFORDERLICHE, ABER NICHT ZUR VERFÜGUNG GESTELLTE MATERIALIEN
Mikrobiologische Standardvorräte und-geräte wie Schleifen, Tupfer, Applikatorstäbchen, andere Kulturmedien, Verbrennungsanlagen, Inkubatoren usw. sowie serologische und biochemische Reagenzien, sind nicht vorgesehen.,
QUALITY CONTROL
Test Organisms | Inoculation Method* | Incubation | Results | |||
Time | Temperature | Atmosphere | ||||
Mannitol Salt Agar (Cat. no., J330): | ||||||
Staphylococcus aureus ATCC® 6538 |
J | 18hr | 35°C | Aerobic | Growth; yellow colonies and media at 18-24 hours | |
Escherichia coli ** ATCC® 8739 |
B | 72hrs | 35°C | Aerobic | Partial to complete inhibition | |
Mannitol Salt Agar (Cat. no.,“>Aerobic | Partial to complete inhibition | |||||
Escherichia coli ATCC® 8739 |
A | 72hr | 30-35°C | Aerobic | Partial to complete inhibition |
USER QUALITY CONTROL
Physical Appearance
Mannitol Salt Agar (MSA) should appear clear, slightly opalescent, and pinkish-red in color.,
Staphylococcus aureus (ATCC® 25923) Kolonien wachsen auf Mannitol-Salz-Agar. Aerob für 48 Stunden bei 35ºC inkubiert.
Proteus mirabilis (ATCC® 12453) Wachstum gehemmt auf Mannitol-Salz-Agar. Aerob für 48 Stunden bei 35ºC inkubiert.
2. Tille, P. Bailey und Scotts Diagnostic Microbiology, C. V. Mosby Company, St. Louis, MO.
3. Chapman, G. H. 1945. J. Bacteriol.; 50:201.
4. Isenberg, H. D., Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol., I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, D. C.
5. Koch, F. E. 1942. Zentr. Bakt. Labt. Orig.; 149:122.
7. Jorgensen, J. H., et al. 2015. Handbuch der klinischen Mikrobiologie, 11. American Society for Microbiology, Washington, D. C.
8. Qualitätssicherung für kommerziell hergestellte mikrobiologische Kulturmedien, M22. Klinische und LaboratoryStandards Institute (CLSI – ehemals NCCLS), Wayne, PA.
9. American Public Health Association. 1993. Standardmethoden für die Untersuchung von Milchprodukten, 16. APHA, Washington, D.,C.
10. APHA Technischer Ausschuss für mikrobiologische Methoden für Lebensmittel. 2001. Kompendium der Methoden zur mikrobiologischen Untersuchung von Lebensmitteln, 4.Aufl. APHA, Washington, D. C.
ATCC ist eine eingetragene Marke der American Type Culture Collection.
IFU-10553
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