Hämozytometer

Um das Hämozytometer zu verwenden, stellen Sie zunächst sicher, dass der mit der Zählkammer versehene Spezialcoverslip ordnungsgemäß auf der Oberfläche der Zählkammer positioniert ist. Wenn die beiden Glasoberflächen in einwandfreiem Kontakt sind, können Newtons Ringe beobachtet werden. Wenn ja, wird die Zellsuspension auf die Kante des Deckels aufgebracht, um durch Kapillarwirkung in den Hohlraum gesaugt zu werden, wodurch die Kammer vollständig mit der Probe gefüllt wird. Die Anzahl der Zellen in der Kammer kann durch direkte Zählung unter Verwendung eines Mikroskops bestimmt werden, und visuell unterscheidbare Zellen können differentiell gezählt werden., Die Anzahl der Zellen in der Kammer wird verwendet, um die Konzentration oder Dichte der Zellen in der Mischung zu berechnen, aus der die Probe stammt. Es ist die Anzahl der Zellen in der Kammer geteilt durch das Volumen der Kammer, die von Anfang an unter Berücksichtigung etwaiger Verdünnungen und Zählbedingungen bekannt ist:

wobei das Volumen der verdünnten Probe (nach Verdünnung) geteilt durch das Volumen der ursprünglichen Mischung in der Probe (vor Verdünnung) der Verdünnungsfaktor ist., Wenn beispielsweise das Volumen der ursprünglichen Mischung 20µL betrug und es einmal verdünnt wurde (durch Zugabe von 20µL Verdünnungsmittel), beträgt der zweite Term in Klammern 40µL/20µL. Das Volumen der gezählten Quadrate ist das in der Tabelle oben gezeigte, abhängig von der Größe (siehe Abbildung rechts). Die Anzahl der gezählten Zellen ist die Summe aller Zellen, die über Quadrate in einer Kammer gezählt werden. Der Anteil der gezählten Zellen gilt, wenn nicht alle inneren Quadrate innerhalb eines festgelegten Quadrats gezählt werden (dh wenn nur 4 der 20 in einem Eckquadrat gezählt werden, entspricht dieser Begriff 0,2).,

Für die meisten Anwendungen werden nur die vier großen Eckquadrate verwendet. Die Zellen, die sich auf der oberen und linken Linie befinden oder diese berühren, werden gezählt, aber diejenigen, die auf der rechten oder unteren Linie liegen oder diese berühren, werden ignoriert.