Einführung (E. Coli)

Allgemein als E. coli bezeichnet, Escherichia coli ist ein Bakterium, das istypisch in einer Reihe von Umgebungen, einschließlich verschiedener Lebensmittel, Boden Undtierdärme gefunden. E. coli ist sehr vielfältig und gehört zur Genusscherichia., Während die meisten Stämme harmlos sind (und auchwichtig im menschlichen Darmtrakt), sind andere schädlich und können sehr schwerwiegende gesundheitliche Auswirkungen haben. Ein gutes Beispiel dafür ist E coli 0157: H7.,v>

Abgesehen von Lebensmittelvergiftungen, die verursachendiarrhö und andere Probleme im Verdauungssystem, schädliche Stämme von E colican verursachen die folgenden gesundheitlichen Probleme;

  • Infektion des Harntraktes
  • Lungenentzündung
  • Atemwegserkrankungen

Im Darmtrakt spielt E coli eine wichtige Rolle, da es die Verdauung unterstützt und die Aufnahme vonvitalen Vitaminen aus der Nahrung im Körper unterstützt., In addition, it has been shown to bebeneficial in that it prevents the growth and proliferation of other harmfulspecies of bacteria that would otherwise cause health problems.

Main Category of Pathogenic (Diarrheagenic) E. Coli.

  • Shiga toxin-producing Ecoli (STEC)
  • Enterotoxigenic E coli(ETEC)
  • Enteropathogenic E coli(EPEC)
  • Enteroaggregative E., coli(EAEC)
  • E coli Enteroinvasive(EIEC)
  • Diffus adhärente E coli(DAEC)

Gram-Färbung

E. coli beschrieben wird, als ein Gramm-negativebacterium. Dies liegt daran, dass sie mit dem Gramstain negativ färben.

Der Gram-Fleck ist eine differentielle Technik, dieist häufig zum Zwecke der Klassifizierung von Bakterien verwendet. Die Färbetechnik unterscheidet zwischen zwei Haupttypen von Bakterien (grampositiv und gramnegativ), indem sie den Zellen Farbe verleiht.,

Als gramnegative Bakterien haben E. coli eine zusätzliche äußere Membran,die aus Phospholipiden Undlipopolysacchariden besteht. Die Anwesenheit Lipopolysaccharide auf der äußeren Membran vonBakterien gibt es eine insgesamt negative Ladung an die Zellwand. Aufgrund dieser Eigenschaften behält E. coli während des Gram-Färbeprozesses kein Kristallviolett.

Siehe Seite, auf der grampositive und gramnegative Bakterien erklärt werden

E., Coli-Mikroskopie

Um festzustellen, ob ein Stamm in einer Probe vorhanden ist, muss die Probe gefärbt werden. Hier wird gramnegativ verwendet, da es hilft, zwischen den grampositiven und gramnegativen Bakterien in einer Probe zu unterscheiden.

Als differentieller Fleck ist der Fleck im Vergleich zu einfacheren Flecken wie Methylen komplexer blue.As solche, mehr als ein Fleck wird für die Zwecke der Differenzierung der seine zellulären Komponenten verwendet.,

For this technique, 3 different stains are used.These include:

  • Crystal violet
  • Iodine
  • Safranin

Requirements

  • Microscope glass slide
  • A collecting wire loop
  • A heater (Burner)
  • Sample (E., Coli Kultur)
  • Destilliertes wasser
  • Gram fleck (Kristall violett,Jod fleck und Carbol Fuschin)
  • Alkohol

Abstrichvorbereitung

  • Vor dem Schöpfen der Probe die Drahtschleife erwärmen und abkühlen lassen (steril machen).
  • Mit der Drahtschleife schöpfen und die Brühkultur auf eine saubere, sterile Folie legen.,
  • Das Inokulum vorsichtig auf einen Durchmesser von etwa einem Zentimeter verteilen (die Probe auf dem Objektträger verteilen)
  • Verwenden Sie für Plattenkulturen (Ofbakterien) eine sterile Drahtschlaufe, um Kochsalzlösung in der Mitte/Mitte des Objektträgers abzulegen
  • Mit einem anderen sterilen Wireloop (erhitzen und abkühlen lassen)) schöpfen Sie eine kleine Menge der Probe und rühren Sie weiterder Wassertropfen bildet eine Emulsion

Fixing

Hier wird Wärme zum Fixieren verwendet., Wärme fixierung verfahren beinhaltet die folgenden schritte:

  • Luft trocknen die rutsche für die abstrich zu trocknen
  • Pass die rutsche durch die flamme ein paar mal (2 oder 3 mal) abstrich seite up

* Während der wärme fixierung, vermeiden Sie eine Überhitzung der Folie.,d=“448ac82572″>

Gram Staining

  • Legen Sie die Folie auf ein Farbregal und überfluten Sie den Abstrich etwa eine Minute lang mit Kristallviolett
  • Leicht kippen die rutsche andrinse mit wasser (destilliertem oder tap wasser) sanft – Vermeiden grob waschen theslide
  • Flut die probe mit iodand lassen sie die rutsche zu stehen für über 1 minute
  • Leicht kippen die slideagain und spülen mit tap ordistilliertem wasser (sanft).,
  • Kippen Sie die Folie und entfärben Sie sie mit 95% Ethylalkohol/Aceton – Die Entfärbung sollte durch Auftragen des Alkohols in Tropfen für etwa 8 Sekunden erfolgen
  • Vorsichtig mit Wasser abspülen
  • Die Folie trocken tupfen
  • Legen Sie die Folie aufmikroskop und sehen Sie sich die Probe an

Bei Betrachtung unter dem Mikroskop Gramnegativee. Coli erscheint rosa in der Farbe., Das Fehlen dieser (lila Farbe) istindikativ für grampositive Bakterien und das Fehlen von gramnegativen E. Coli.

Hängende Drop-Methode

Die hängende Drop-Methode bezieht sich auf eine Technikdas hilft, kleine, lebende und nicht gefärbte Organismen zu untersuchen. Es kann forsuch motile Bakterien als Ps verwendet werden. fluorescens und E. coli.,

Die Verwendung der hängenden droptechnique ist ebenfalls sehr wichtig, da sie dabei hilft, zwischen der braunen Bewegung (der Bewegung von Partikeln, die in einer Flüssigkeit suspendiert sind) und der Beweglichkeit von Mikroorganismen zu unterscheiden., schleife,legen sie vorsichtig eine loopful der folie auf die mitte der glas abdeckung slip

  • Drehen die glas rutsche overthe probe auf die abdeckung slip zu haben die probe liegen zwischen der rutsche und thecover slip
  • Ort die rutsche auf themicroscope für betrachtung (die abdeckung slip sollte auf top)
  • Beginnen Sie mit der niedrigsten Leistung und sehen Sie sich das Exemplar an

    • Um festzustellen, ob sich das Bakterium tatsächlich bewegt, ist es wichtig sicherzustellen, dass es sich in verschiedenen Richtungen bewegt und sich ändert Position., Dies unterscheidet Motilität des Organismenvon bloßer brownscher Bewegung.

    Siehe Auch: Bakterien unter dem Mikroskop, Siehe Eubakterien seite, Erfahren Sie mehr über Coliformen, Mikroskopie Kultur und Empfindlichkeit

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