FORMÅL-BRUG
Hardy Diagnostik Mannitol Salt Agar (MSA) anbefales til brug som en selektiv og differentieret medium til isolering af patogene stafylokokker.
OVERSIGT
Koch rapporterede brug af et medium, der indeholder 7.5% natriumchlorid som en selektiv agent til isolering af stafylokokker i 1942.,(5) resultaterne blev bekræftet og forbedret af Chapman i 1945 ved tilsætning af denne saltkoncentration til Phenolrød Mannitolagar, da Staphylococcus aureus normalt fermenterer mannitol.(3) ikke-patogene stafylokokker viser normalt mindre frodig vækst på dette medium efter inkubationsperioden.
et natriumchlorid, koncentration på 7, 5%, er næsten ti gange den sædvanlige koncentration, der ses i de fleste medier. Det tjener til at hæmme de fleste organismer undtagen stafylokokker i blandede floraprøver. Oksekød ekstrakt og peptoner levere de væsentlige elementer kulstof, nitrogen og svovl., Mannitol tilsættes for at vise organismernes fermenteringsevne. Syreproduktion som følge af fermentering af dette sukker resulterer i dannelsen af kolonier med en gul zoneone. De stafylokokker, der ikke fermenterer mannitol, viser en lilla eller rød zoneone omkring kolonierne.
Mannitol Salt Agar (MSA) anbefales af American Public Health Association til tælling af stafylokokker i fødevarer og mejeriprodukter.,(9,10)
FORMULA
Ingredients per liter of deionized water:*
Sodium Chloride | 75.0gm |
Proteose Peptone | 10.0gm |
Mannitol | 10.0gm |
Beef Extract | 1.0gm |
Phenol Red | 0.025gm |
Agar | 15.0gm |
Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.,
* justeret og / eller suppleret efter behov for at opfylde ydeevnekriterierne.
opbevaring og holdbarhed
opbevaring: ved modtagelse opbevares ved 2-8CC væk fra direkte lys. Medier bør ikke anvendes, hvis der er tegn på forringelse (krympning, revner eller misfarvning), forurening, eller hvis udløbsdatoen er gået. Produktet er let og temperaturfølsomt; beskytter mod lys, overdreven varme, fugt og frysning.
forholdsregler
prøveopsamling: se de anførte referencer for oplysninger om prøveopsamling.,(1,2,4,7) infektiøst materiale skal straks indsendes direkte til laboratoriet og beskyttes mod overdreven varme og kulde. Hvis behandlingen skal forsinkes, skal prøven inokuleres på et passende transportmedium og nedkøles indtil inokulering.
anvendelsesmetode: lad pladerne varme op til stuetemperatur, og agaroverfladen tørre, før de inokuleres. Inokulere og stribe prøven så hurtigt som muligt efter indsamling. Hvis prøven, der skal dyrkes, er på en vatpind, skal du rulle vatpinden over et lille område af agaroverfladen., Stribe til isolering med en steril sløjfe. Pladerne inkuberes aerobt ved 35-37 .c i 24-48 timer. Undersøg kolonial morfologi.
fortolkning af resultater
Mannitolfermentorer såsom S. aureus vises som gule kolonier med gule mediaoner i medierne. Ikke-mannitol fermentorer såsom S. epidermidis, hvis de findes, vil have klare lyserøde til røde kolonier uden gul farveændring i mediet. Se de anførte referencer for identifikation af kolonimorfologi og yderligere biokemiske test, der kræves til identifikation.,(1,2,4,7)
begrænsninger
de fleste andre organismer end stafylokokker hæmmes af den høje saltkoncentration, der findes i Mannitolsaltagar, bortset fra nogle halofilliske marine organismer.
materialer, der kræves, men ikke leveres
standard mikrobiologiske forsyninger og udstyr såsom sløjfer, s swabsabs, applikatorstænger, andre dyrkningsmedier, forbrændingsanlæg, inkubatorer osv., såvel som serologiske og biokemiske reagenser, leveres ikke.,
QUALITY CONTROL
Test Organisms | Inoculation Method* | Incubation | Results | |||
Time | Temperature | Atmosphere | ||||
Mannitol Salt Agar (Cat. no., J330): | ||||||
Staphylococcus aureus ATCC® 6538 |
J | 18hr | 35°C | Aerobic | Growth; yellow colonies and media at 18-24 hours | |
Escherichia coli ** ATCC® 8739 |
B | 72hrs | 35°C | Aerobic | Partial to complete inhibition | |
Mannitol Salt Agar (Cat. no.,”>Aerobic | Partial to complete inhibition | |||||
Escherichia coli ATCC® 8739 |
A | 72hr | 30-35°C | Aerobic | Partial to complete inhibition |
USER QUALITY CONTROL
Physical Appearance
Mannitol Salt Agar (MSA) should appear clear, slightly opalescent, and pinkish-red in color.,
Staphylococcus aureus (ATCC® 25923) kolonier vokser på Mannitol Salt Agar. Inkuberet aerobt i 48 timer ved 35CC.
Proteus mirabilis (ATCC® 12453) vækst hæmmes på Mannitol Salt Agar. Inkuberet aerobt i 48 timer ved 35CC.
2. Tille, P. Bailey and Scott ‘ s Diagnostic Microbiology, C. V. Mosby Company, St. Louis, MO.
3. Chapman, G. H. 1945. J. Bacteriol.; 50:201.
4. Isenberg, H. D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol., I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, DC,
5. Koch, F. E. 1942. Zentr. Bakt. Labt. Orig.; 149:122.
7. Jørgensen, J. H., Et al. 2015. Manual of Clinical Microbiology, 11.udgave. American Society for Microbiology, 8ashington, D. C.
8. Kvalitetssikring af kommercielt fremstillede mikrobiologiske dyrkningsmedier, M22. Klinisk og Laboratorietstandards Institute( CLSI-tidligere NCCLS), PAAYNE, PA.
9. American Public Health Association. 1993. Standardmetoder til undersøgelse af mejeriprodukter, 16.udgave. APHA, Washington, D.,C.
10. APHA ‘ s tekniske komit.for mikrobiologiske metoder til levnedsmidler. 2001. Kompendium af metoder til mikrobiologisk undersøgelse af fødevarer, 4.udgave. APHA, Washingtonashington, DC
ATCC er et registreret varemærke tilhørende American Type Culture Collection.
IFU-10553
Skriv et svar