Indledning (E. Coli)

Almindeligvis omtales som E. coli, Escherichia coli, en bakterie, der istypically findes i en række miljøer, herunder forskellige fødevarer, jord andanimal tarmene. E. coli er meget forskelligartet og tilhører slægtenscherichia., Mens de fleste af stammerne er harmløse (og ogsåvigtige i den menneskelige tarmkanal), er andre skadelige og kan forårsage megetalvorlige sundhedsmæssige konsekvenser. Et godt eksempel på dette er E coli 0157: H7.,v>

Bortset fra mad forgiftning, der kan causediarrhea og andre problemer i fordøjelsessystemet, og skadelige stammer af E colican medføre følgende sundhedsproblemer.

  • Infektion af urinarytract
  • Lungebetændelse
  • Respiratorisk sygdom

I tarmkanalen, E coli spiller animportant rolle i, at det aids i fordøjelsen og støtter absorption ofvital vitaminer fra mad i kroppen., In addition, it has been shown to bebeneficial in that it prevents the growth and proliferation of other harmfulspecies of bacteria that would otherwise cause health problems.

Main Category of Pathogenic (Diarrheagenic) E. Coli.

  • Shiga toxin-producing Ecoli (STEC)
  • Enterotoxigenic E coli(ETEC)
  • Enteropathogenic E coli(EPEC)
  • Enteroaggregative E., coli(EAEC)
  • Enteroinvasive E coli(EIEC)
  • Diffust karakteristisk E coli(DAEC)

Gram Pletten

E. coli er beskrevet som en Gram-negativebacterium. Dette skyldes, at de pletter negativt ved hjælp af Gramstain.

Gram-pletten er en differentieret teknik, somer almindeligt anvendt til klassificering af bakterier. Farvningsteknikken skelner mellem to hovedtyper af bakterier (gram positive oggram negative) ved at give farve på cellerne.,

som Gram-negative bakterier har E. coli en yderligere ydre membran,der er sammensat af phospholipider oglipopolysaccharider. Tilstedeværelsen lipopolysaccharider på den ydre membran afbakterier giver det en samlet negativ ladning til cellevæggen. På grund af disseegenskaber bevarer E. coli ikke krystalviolet under Gram-farvningsprocessen.

Se side der forklarer Gram positive og Gram negative bakterier,

E., Coli Mikroskopi

for At afgøre, om en stamme(r) ispresent i en prøve, er det nødvendigt at bejdse prøve. Her bruges Gram-plet, da det hjælper med at skelne mellem de gram-positive og gramnegative bakterier i en prøve.

som en differentiel plet er Gram-pletten mere kompleks sammenlignet med mere enkle pletter som methylen blue.As sådan anvendes mere end en plet med det formål at differentiere dets cellulære komponenter.,

For this technique, 3 different stains are used.These include:

  • Crystal violet
  • Iodine
  • Safranin

Requirements

  • Microscope glass slide
  • A collecting wire loop
  • A heater (Burner)
  • Sample (E., Coli Kultur)
  • Destilleret vand
  • Gram farvning (krystalviolet,Jod pletten og Carbol Fuschin)
  • Alkohol

Smøre Forberedelse

  • Før øse den prøve,varm wire loop og muliggøre køling (for at gøre sterile).
  • brug trådsløjfen til at scoopog læg bouillonkulturen på et rent, sterilt objektglas.,
  • fordeles Forsigtigt inoculumto omkring en centimeter i diameter (spredning prøven på diaset)
  • For plade kulturer (ofbacteria) brug en steril wire loop til at droppe saltopløsning i themiddle/midten af objektglasset
  • Brug anden sterile wireloop (varme og lov til at køle) scoop af en lille mængde af prøven, og der omrøres onthe dråbe vand til at danne en emulsion

Fastsættelse

Her er der varme, der anvendes til fastsættelse., Varmen fastsættelse af procedure indebærer følgende trin:

  • Air dry slide for at smøre tørre
  • Passere objektglasset gennem flammen på et par gange (2 eller 3 gange) smøre side op

* Under varme repareres, for at undgå overophedning af dias.,d=”448ac82572″>

Gram Farvning

  • Sted slide på astaining rack og oversvømmelse smøre med krystalviolet i omkring et minut
  • Lidt tilt slide andrinse med vand (destilleret eller rindende vand) forsigtigt – Undgå groft vask theslide
  • Oversvømmelse prøven med iodineand give skub til at stå for omkring 1 minut for
  • Lidt tilt slideagain, og skyl efter hjælp tryk let på ordistilled vand (forsigtigt).,
  • Tilt glide-og decolorize hjælp 95% ethylalcohol/acetone – decolorizing bør gøres ved at anvende alkohol i dropsfor omkring 8 sekunder
  • Skyl forsigtigt med vand
  • Dup den tør slide
  • Anbring objektglasset onmicroscope og få vist prøve

, Når de ses under mikroskop, Gram-negativeE. Coli vises lyserød i farve., Fraværet af dette (af lilla farve) erindikativ for Gram-positive bakterier og fraværet af Gram-negativ E. Coli.

Dråbe Metode

hængende slip-metoden henviser til en techniquethat hjælper med at undersøge små, levende og ufarvede organismer. Det kan bruges tilsådanne bevægelige bakterier som Ps. fluorescens og E. coli.,

Hjælp hængende droptechnique er også meget vigtigt, da det hjælper med at skelne mellem Brownianmovement (bevægelsen af partikler, der er suspenderet i en væske) og motilityof mikroorganismer., løkke,omhyggeligt placere en loopful af bouillon på til midten af glas cover slip

  • Drej objektglas overståetde prøve på dækglasset at have den prøve, der ligger mellem dias og thecover slip
  • Sted slide på themicroscope til visning (dækglasset skal være på toppen)
  • Start med den laveste powerand udsigt prøven

    • for At afgøre, om de bakterier, isreally bevæger sig, er det vigtigt at sikre, at det bevæger sig i differentdirections og at ændre holdning., Dette adskiller motilitet af organismenfra blotte bro .nian bevægelse.

    Se Også: Bakterier under Mikroskop, Se Eubacteria side, læs mere om Coliforme bakterier, Mikroskopi Kultur og Følsomhed

    vende Tilbage til Mikroskop Eksperimenter, BrightField Mikroskopi og Objektglas Forberedelse

    Retur fra E., Coli under Mikroskop for at MicroscopeMaster Hjem