En kvindelig patient, 30 år gammel, blev indlagt i februar 2017 til Afdeling og Klinik for Allergologi og Klinisk Immunologi og Indre Sygdomme på grund af tilbagevendende allergiske reaktioner efter indtagelse af forskellige fødevarer.
disse reaktioner var stort set dermale i form af urticaria på hele kroppen., Symptomer på tilbagevendende, generaliseret urticaria blev oplevet efter indtagelse af forskellige særligt komplekse retter indeholdende mange forskellige ingredienser. Patienten associerede disse symptomer med forbrug af peberfrugter, klementiner, boghvede honning og rødvin.
den mest alvorlige allergiske reaktion i patientens liv opstod efter at have spist en mangofrugt. Inden for adskillige minutter udviklede patienten en generaliseret urticaria efterfulgt af ansigtsødem, stærk mavesmerter og vandig diarr.. Paramedikere blev kaldt. Patienten fik adrenalin, steroider og antihistaminer.,
en detaljeret medicinsk historie afslørede, at patienten i de foregående 6 år havde symptomer på sæsonbetonet rhinitis (lakrimation, kløende øjenlåg og vandig nasal udledning).
patienten på det tidspunkt blev også behandlet med levothyro .in til hypothyreoidisme. Patientens familiehistorie er redet med allergiske sygdomme: patientens mor er allergisk over for inhalatoriske allergener, og hendes far til birk og kat.
i dette komplekse tilfælde krævede diagnosen en bred vifte af diagnostiske metoder., Som en del af den diagnostik, der udføres i Afdelingen og Klinik for Allergologi og Klinisk Immunologi og Indre Sygdomme, patienten havde skin prick test med et sæt indånding af allergener (Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides pteronyssinus, græs/korn, ukrudt, Aspergillus fumigatus, Cladosporium herbarum, kattens pels, poppel, hassel, el, birk, bynke, ribwort vejbred) og fødevareallergener (kylling, æg, komælk, tomat, champignon, bananer, rugmel, hvedemel, jordnødder, hasselnødder, svinekød, kyllingekød, orange) fra Allergopharma-Nexter Sp. Ltd o.o. (Ltd.,), samt indfødte hudprøver med friske fødevarer (boghvede honning, peberfrugter, mango, clementin, gulerod, selleri, jordnødder, banan, sennep, gurkemeje, karve, rødvin).,vels af IgE, der er specifikke for udvalgte allergener (bynke, malurt, tidlig græs mix, sent græs mix, bladselleri, peberfrugt, gulerod, mango, banan, fersken, æble, jordnødder, hasselnødder, Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, tidlige træer mix, sent træer mix, birk, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, Alternaria tenius, ko mælk, protein, krydderier blandes, sennep) blev bestemt med ImmunoCap (ThermoFisher Scientific, Uppsala, Sverige) system, hjælp Phadia100 udstyr i henhold til producentens anvisninger (ImmunoCAP specifi IgE, fluoroenzymeimmunoassay, 52-5291-DA/05).,
diagnosen blev udvidet ved en bestemmelse af niveauet af IgE-specifikt for allergenkomponenter ved anvendelse af ImmunoCap ISAC-metoden.
hver af disse tests har forskellig specificitet og følsomhed og ikke mindre vigtigt tilgængelighed og omkostninger. Skin prick test betragtes som en hurtig, billig metode med øjeblikkelige resultater. Desværre er deres detekteringsrate i fødevareallergi begrænset. I en nylig artikel af Griffiths et al. påvisning priser til SPTs (53%) og ISAC (59%) var ens, med en højere opklaringsprocent for ImmunoCAP test (66%)., Hos patienter med nøddeallergi scorede test for allergi over for nødder på samme måde, men med en større følsomhed (71%) for ImmunoCAP-test end SPT (53%) eller ISAC (65%). Derfor udvidede vi diagnosen i dette tilfælde til in vitro bestemmelse af koncentrationen af allergenspecifik ige. Guldstandarden i diagnosticering af fødevareallergi er stadig den dobbeltblinde placebokontrollerede fødevareudfordring. I dette tilfælde accepterede patienten ikke provokationsudfordringer.,
Skin prick test var positive for følgende allergen ekstrakter (wheal gennemsnitlige diameter i mm): græs 7 mm; ukrudt: 8 mm; kattens pels: 5 mm; bynke: 6 mm; ribwort vejbred: 4 mm; selleri: 2 mm; clementine: 2 mm (histamin 4 mm, negativ kontrol, 0 mm, et resultat blev tolket som positiv i tilfælde af en wheal gennemsnitlige diameter ≥ 3 mm). Der blev ikke observeret nogen hudreaktion for andre testede allergenekstrakter. Det samlede IgE-niveau var 406, 53 kU/L.
resultaterne af native tests var positive for mango 5 mm, selleri 3 mm.,
resultater for specifikke IgE-niveauer testet ved hjælp af ImmunoCap-metoden er vist i tabel 1. Forhøjede niveauer af IgE (over 0,35 kU/L) blev fundet mod mug .ort, malurt, tidlig græsblanding, sen græsblanding, selleri, peberfrugter, gulerod, mango, banan, fersken, æble, jordnødder.
Efter at patienten var udskrevet fra hospitalet, vi har modtaget resultaterne af ImmunoCap ISAC prøver (Tabel 2)., Et højt niveau af IgE specifikt for Art v 1 (defensin) fra mug .ort og Phl p 1 fra timothy var særlig bemærkelsesværdigt. Det er værd at understrege, at der ikke var forhøjede niveauer af IgE specifikke for komponenter af fødevareallergener tilgængelige i ImmunoCap ISAC. Det er muligt, at symptomer på OAS hos denne patient skyldes krydsreaktivitet med timothy og mug .ort allergener. Symptomer på urticaria kan også skyldes følsomhed over for en af de ovennævnte fødevareallergener., Den eneste anafylaktiske reaktion i patienternes liv opstod efter forbruget af mango, og denne overfølsomhed var den, som vi besluttede, krævede yderligere diagnose.
Her skal det tydeligt fremgå, at ImmunoCap ISAC test indikerer ikke, hvis der i det pågældende tilfælde patientens allergi over for mango, som var et resultat af en krydsning-allergi med Kunst v 1, eller en allergi over for et andet molekyle, der er uafhængig af bynke. ImmunoCap ISAC har ingen mango allergen komponenter til rådighed.
for at afklare dette blev ImmunoCap-inhiberingstesten anvendt ved anvendelse af allergenekstraktet fra frisk mangofrugt., Undersøgelsen var baseret på SPHIA-modellen (Assay med enkelt højeste hæmning) beskrevet af Bernardi et al. i 2011.
metoden for denne inhiberingsassay betragtes stadig som eksperimentel, skønt lignende inhiberingsassays tidligere blev anvendt af flere forfattere. For eksempel blev der i vores forskningsenhed beskrevet et tilfælde af en patient, der var allergisk over for solsikkefrø, hvor ImmunoCap ISAC-inhiberingstest blev brugt til at bevise krydsreaktivitet. I inhiberingstesten blev Art v 1, Art v 3 og Kande r 3 hæmmet af det protein, der var til stede i solsikkefrøallergenekstraktet .,
for at udføre hæmningstesten blev der købt en moden mangofrugt i en lokal købmand, der tilbyder øko-mad. Frugten blev vasket, skrællet og pit blev fjernet for at opnå den spiselige del. Det proteinholdige pulpekstrakt blev opnået ved anvendelse af tidligere beskrevne metoder . Hakkede frugter blev frosset i flydende nitrogen og blandet til glat pulp. Pulp blev derefter blandet med 1 M NaCl i forholdet 2:1 (2:1, v/v) og venstre ved 2-8 °C i 24 h. Efter dette tidspunkt blandingen var centrifugeres ved stuetemperatur på 12.000×g i 60 min. Ekstraktet blev opnået indeholdende 2, 35 mg / dL protein., I inhiberingstesten blev det opnåede ekstrakt blandet med patientens blodserum i volumenforholdet 1:1 og inkuberet ved 2-8 .C i 24 timer. En blindprøve blev samtidig fremstillet for at tage højde for fortyndingen af serumet. Til dette formål, patientens blod serum, der var blandet med 1 M NaCl (1:1, v/v), og derefter inkuberes ved 2-8 °C i 24 h. Efter dette tidspunkt niveau af IgE, der er specifikke for bynke, Kunst v1, og mango blev bestemt i det udarbejdede materiale, både hæmmet og udvandet, og hæmning forholdet blev beregnet.,
I inhibitionstest vi opnået følgende resultater—baseline niveau af bynke sIgE i patientens serum blev 144.32 kU/L. I blinde prøve, efter at fortynde det med 1 M NaCl, 1:1, koncentrationen af sIgE var 72.16 kU/L. Efter inkubation af patientens serum med en mango allergen udtrække niveau af bynke IgE var 48.81 kU/L. Det blev således vist, at den mango allergen uddrag hæmmede bindende for bynke IgE ved 32.38%.
baseline niveauet af Art v 1 sIgE i patientens serum var 99, 8 kU / L., I den blinde prøve, efter at fortynde det med 1 M NaCl, 1:1, koncentrationen af sIgE var 49.9 kU/L. Efter inkubation af patientens serum med mango allergen uddrag niveauet for Kunst v 1 IgE var 35.2 kU/L. Det blev således vist, at den mango allergen uddrag hæmme bindingen af IgE-Art v 1 med 29.5%. Baseret på de udførte diagnostiske procedurer blev det påvist, at symptomer, der var til stede i patienten, kunne være et resultat af en krydsreaktion mellem allergener af mango og Art v 1. Resultaterne af hæmningstesten er vist i fig. 1.
Resultaterne af den hæmning test med mango ekstrakt
på Grund af det faktum, at denne hæmning test var en eksperimentel metode, og den tidligere beskrevne protokol, der blev modificeret til at ledsage de behov, i dette specifikke tilfælde, en hæmning test i henhold til en anden protokol, der blev udført med henblik på at give en endelig bekræftelse på tværs af allergi. Patientens serum blev inkuberet med allergenekstraktet fra en mangofrugt ved anvendelse af Immunokapmatrixen., Immunokapen blev forvasket fire gange: to gange med vaskearbejdetopløsning Immunokap og to gange med den neutrale pH-fosfatbuffer. 50 µL testet serum blev tilføjet til ImmunoCap forberedt på den måde, og der inkuberes i 1 time ved stuetemperatur, og derefter centrifugeres 1500×g i 2 min. Det opnåede antistofudarmede serum og det native serum blev analyseret for tilstedeværelsen af Art v 1-allergenkomponenten under anvendelse af ImmunoCap-metoden.
baseline niveau af Art v 1 sIgE i patienter serum var 99, 8 kU / L., I dette tilfælde blev patientens serum ikke fortyndet, så negativ kontrol var ikke nødvendig. Efter inkubation af patientens serum med ImmunoCap mango matrix niveauet for Kunst v 1 IgE var 56,5 kU/L. Som et resultat blev det vist, at den ImmunoCap mango matrix hæmmet bindende for Kunst v 1 IgE ved 43.4%. Disse resultater er præsenteret i Fig. 2.
Resultaterne af den hæmning med mango allergen på ImmunoCap matrix
Skriv et svar