Un pacient de sex feminin, 30 de ani, a fost internat în februarie 2017 la Catedra și Clinica de Alergologie, Imunologie Clinică și Boli Interne din cauza recurente reacții alergice în urma consumului de diverse alimente.aceste reacții au fost în mare parte dermice, sub formă de urticarie pe întregul corp., Simptomele urticariei generalizate recurente au fost experimentate după ingerarea diferitelor feluri de mâncare deosebit de complexe care conțin multe ingrediente diferite. Pacientul a asociat aceste simptome cu consumul de ardei, Clementine, miere de hrișcă și vin roșu.cea mai severă reacție alergică din viața pacientului a avut loc după ce a consumat un fruct de mango. În câteva minute, pacientul a dezvoltat o urticarie generalizată, urmată de edem facial, dureri puternice de stomac și diaree apoasă. Au fost chemați paramedicii. Pacientului i s-au administrat adrenalină, steroizi și antihistaminice.,un istoric medical detaliat a arătat că în ultimii 6 ani pacientul a prezentat simptome de rinită sezonieră (lacrimare, pleoape mâncărime și descărcare nazală apoasă).
pacientul la momentul respectiv a fost, de asemenea, tratat cu levotiroxină pentru hipotiroidism. Istoricul familial al pacientului este însoțit de boli alergice: mama pacientului este alergică la alergenii inhalatori, iar tatăl ei la mesteacăn și pisică.în acest caz complex, diagnosticul a necesitat o gamă largă de metode de diagnosticare., Ca o parte de diagnosticare efectuate în Catedra și Clinica de Alergologie, Imunologie Clinică și Boli Interne, pacientul a avut prick teste cu un set de prin inhalare alergeni (Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides pteronyssinus, iarba/cereale, buruieni, Aspergillus fumigatus, Cladosporium herbarum, blana pisicii, plop, alun, arin, mesteacan, pelin, patlagina ribwort) și alergeni alimentari (ou, lapte de vacă, roșii, crap, banane, făină de secară, făină de grâu, arahide, alune, carne de porc, carne de pui, portocaliu) de la Allergopharma-Nexter Sp. z o. O. (Ltd.,), precum și teste cutanate native cu alimente proaspete (miere de hrișcă, ardei, mango, clementină, morcov, țelină, arahide, banane, muștar, turmeric, chimen, vin roșu).,nivelurile de imunoglobuline IgE specifice pentru anumite alergeni (pelin, pelin, mai devreme iarbă amestec, târziu iarbă amestec, telina, ardei, morcov, mango, banane, piersici, mere, arahide, alune, Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, mai devreme copaci se amestecă, târziu copaci se amestecă, mesteacan, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, Alternaria tenius, vacă proteine din lapte, mix de condimente, muștar) au fost determinate cu ImmunoCap (ThermoFisher Scientific, Uppsala, Suedia) sistem folosind Phadia100 echipamentul în conformitate cu instrucțiunile producătorului (ImmunoCAP specifice IgE, fluoroenzymeimmunoassay, 52-5291-RO/05).,diagnosticul a fost extins prin determinarea nivelului de IgE specific componentelor alergene, utilizând metoda ImmunoCap ISAC.fiecare dintre aceste teste are specificitate și sensibilitate diferite și, nu mai puțin important, disponibilitate și cost. Testele de înțepătură a pielii sunt considerate o metodă rapidă, ieftină, cu rezultate imediate. Din păcate, rata lor de detectare în alergia alimentară este limitată. Într-un articol recent de Griffiths et al. ratele de detecție pentru SPTs (53%) și ISAC (59%) au fost similare, cu o rată de detecție mai mare pentru testarea ImmunoCAP (66%)., La pacienții cu alergii la nuci, testele de sensibilizare la nuci au marcat în mod similar, dar cu o sensibilitate mai mare (71%) pentru testele Imunocap decât SPT (53%) sau ISAC (65%). Prin urmare, am extins diagnosticul în acest caz la determinarea in vitro a concentrației de IgE specific alergenului. Standardul de aur în diagnosticul alergiilor alimentare este în continuare provocarea alimentară dublu-orb controlată cu placebo. În acest caz, pacientul nu a fost de acord cu provocări provocare.,
prick teste au fost pozitive pentru următoarele extracte de alergen (papula cu diametrul mediu în milimetri): iarba de 7 mm; buruieni: 8 mm; blana pisicii: 5 mm; pelin: 6 mm; sau patlagina: 4 mm; telina: 2 mm; clementine: 2 mm (histamina 4 mm, control negativ 0 mm, rezultatul a fost interpretat ca fiind pozitiv în caz de o papula cu diametrul de mediu ≥ 3 mm). Nu a fost observată nicio reacție cutanată pentru alte extracte alergene testate. Nivelul total de IgE a fost de 406,53 kU/L.
rezultatele testelor native au fost pozitive pentru mango 5 mm, țelină 3 mm.,rezultatele pentru nivelurile IgE specifice testate prin metoda ImmunoCap sunt prezentate în tabelul 1. Niveluri ridicate de IgE (peste 0,35 kU/L) au fost găsite împotriva mugwort, pelin, amestec de iarbă timpurie, amestec de iarbă târzie, țelină, ardei, morcov, mango, banane, piersici, mere, arahide.
După ce pacientul a fost externat din spital am primit rezultatele de la ImmunoCap ISAC teste (Tabelul 2)., Un nivel ridicat de IgE specific pentru Art v 1 (defensin) din mugwort și Phl p 1 din timothy a fost deosebit de demn de remarcat. Merită subliniat faptul că nu au existat niveluri ridicate de IgE specifice componentelor alergenilor alimentari disponibili în ImmunoCap ISAC. Este posibil ca simptomele OAS la acest pacient să rezulte din reactivitatea încrucișată cu alergenii Timotei și mugwort. Simptomele urticariei pot fi, de asemenea, rezultatul sensibilității la unul dintre alergenii alimentari menționați mai sus., Singura reacție anafilactică în viața pacienților a apărut după consumul de mango, iar această hipersensibilitate a fost cea care, am decis, a necesitat un diagnostic suplimentar.
Aici trebuie să fie indicat în mod clar că ImmunoCap ISAC test nu indică dacă în acel caz particular, pacientul are alergie la mango a fost un rezultat de o cross-alergie cu Arta v 1, sau o alergie la o altă moleculă, independent de pelin. ImmunoCap ISAC nu are componente alergene de mango disponibile.
pentru a clarifica acest lucru, apoi, testul de inhibare a Imunocapului a fost aplicat, folosind extractul alergen din fructe proaspete de mango., Investigația s-a bazat pe modelul SPHIA (Single Point Highest Inhibition Achievable Assay) descris de Bernardi et al. în 2011 .metodologia acestui test de inhibare este încă considerată experimentală, deși teste de inhibare similare au fost aplicate anterior de mai mulți autori. De exemplu, în unitatea noastră de cercetare a fost descris un caz al unui pacient alergic la semințele de floarea-soarelui, unde testul de inhibare ImmunoCap ISAC a fost utilizat pentru a dovedi reactivitatea încrucișată. În testul de inhibare Art v 1, Art v 3 și Jug R 3 au fost inhibate de proteina prezentă în extractul de alergen din semințe de floarea soarelui .,pentru a efectua testul de inhibare, un fruct de mango copt a fost cumpărat într-o băcănie locală care oferă alimente ecologice. Fructul a fost spălat, curățat și groapa a fost îndepărtată pentru a obține partea comestibilă. Extractul de pulpă care conține proteine a fost obținut utilizând metodele descrise anterior . Fructele cubulete au fost congelate în azot lichid și amestecate pentru a netezi pulpa. Pulpa a fost apoi amestecată cu 1 M NaCl în raport de 2: 1 (2: 1, v/v) și lăsată la 2-8 °C timp de 24 h. după acest timp amestecul a fost centrifugat la temperatura camerei la 12.000×g timp de 60 min. Extractul a fost obținut conținând 2,35 mg/dL de proteine., În testul de inhibare, extractul obținut a fost amestecat cu serul de sânge al pacientului la un raport de volum de 1: 1 și incubat la 2-8 °C timp de 24 de ore . O probă orb a fost preparată simultan pentru a ține cont de diluarea serului. În acest scop, pacientul este serul sanguin a fost amestecat cu 1 M NaCl (1:1, v/v), și apoi incubate la temperaturi de 2-8 °C timp de 24 h. După acel moment, nivelul de IgE specifice pentru pelin, Art v1, și mango a fost determinată în material pregătit, atât de inhibat și diluat, și inhibarea raport a fost calculat.,
În inhibarea test am obținut următoarele rezultate la nivel de bază de pelin sIgE în serul pacientului a fost 144.32 kU/L. În orb de probă, după diluarea cu 1 M NaCl 1:1, concentrația de sIgE fost 72.16 kU/L. După incubare din serul pacientului cu un mango, extract de alergen nivelul de pelin IgE a fost 48.81 kU/L. astfel, s-A arătat că mango, extract de alergen inhibat obligatorii de pelin IgE de 32.38%.
valoarea inițială a tar v 1 sIgE în serul pacientului a fost de 99,8 kU / L., În proba orb, după diluarea cu 1 M NaCl 1: 1, concentrația de sIgE a fost de 49,9 kU/L. după incubarea serului pacientului cu extractul de alergen mango, nivelul Art v 1 IgE a fost de 35,2 ku/L. s-a arătat astfel că extractul de alergen mango a inhibat legarea IgE Art v 1 cu 29,5%. Pe baza procedurilor de diagnostic efectuate s-a demonstrat că simptomele prezente la pacient pot fi rezultatul unei reacții încrucișate între alergenii mango și Art v 1. Rezultatele testului de inhibare sunt prezentate în Fig. 1.
Rezultatele de la testul de inhibiție cu extract de mango
Datorită faptului că acest test de inhibare a fost o metoda experimentală și cele descrise anterior, protocolul a fost modificat pentru a însoți are nevoie de acest caz specific, un test de inhibare în conformitate cu un protocol diferit fost efectuate în scopul de a oferi o confirmare finală a cross-alergie. Serul pacientului a fost incubat cu extractul alergen dintr-un fruct de mango, folosind matricea ImmunoCap., La ImmunoCap a fost pre-spălate de patru ori: de două ori cu spălare worksolution ImmunoCap, și de două ori cu tampon fosfat pH neutru. S-au adăugat 50 µL de ser testat în Imunocapul preparat în acest mod și s-au incubat timp de 1 oră la temperatura camerei și apoi s-au centrifugat la 1500×g timp de 2 minute. Serul cu depleție de anticorpi obținut și serul nativ au fost analizate pentru prezența componentei alergene Art v 1, utilizând metoda ImmunoCap.
valoarea inițială a tar v 1 sIgE la pacienții serici a fost de 99, 8 kU / L., În acest caz, serul pacientului nu a fost diluat, astfel încât controlul negativ nu a fost necesar. După incubarea serului pacientului cu matricea ImmunoCap mango nivelul Art v 1 IgE a fost de 56,5 kU/L. ca rezultat, s-a demonstrat că matricea ImmunoCap mango a inhibat legarea Art v 1 IgE cu 43,4%. Aceste rezultate sunt prezentate în Fig. 2.
Rezultatele de inhibiție cu mango alergen pe ImmunoCap matrice
Lasă un răspuns