Introducere (E. Coli)

Frecvent menționate ca E. coli, Escherichia coli este o bacterie care istypically găsit într-o serie de medii, inclusiv diverse alimente, sol și intestine. E. coli este foarte diversă și aparține genuluicherichia., În timp ce majoritatea tulpinilor sunt inofensive (și, de asemenea, importante în tractul intestinal uman), altele sunt dăunătoare și pot provoca implicații foarte grave asupra sănătății. Un bun exemplu în acest sens este E coli 0157: H7.,v>

în Afară de intoxicații alimentare care pot causediarrhea și alte probleme în sistemul digestiv, dăunătoare tulpini de E colican provoca următoarele probleme de sănătate;

  • Infecție a urinarytract
  • Pneumonie
  • boli Respiratorii

la nivelul tractului intestinal, E coli, care joacă un rol în faptul că ajută la digestie și facilitează absorbția ofvital vitamine din alimente în organism., In addition, it has been shown to bebeneficial in that it prevents the growth and proliferation of other harmfulspecies of bacteria that would otherwise cause health problems.

Main Category of Pathogenic (Diarrheagenic) E. Coli.

  • Shiga toxin-producing Ecoli (STEC)
  • Enterotoxigenic E coli(ETEC)
  • Enteropathogenic E coli(EPEC)
  • Enteroaggregative E., coli(CEEA)
  • Enteroinvasive E-coli(EIEC)
  • Difuz aderent E-coli(DAEC)

colorație Gram

E. coli este descris ca un Gram-negativebacterium. Acest lucru se datorează faptului că acestea pata negativ folosind Gramstain.

pata Gram este o tehnică diferențială careeste utilizat în mod obișnuit în scopul clasificării bacteriilor. Stainingtechnique distinge între două tipuri principale de bacterii (gram pozitive șigram negativ) prin conferirea culorii celulelor.,

fiind bacterii Gram-negative, E. coli au o membrană exterioară suplimentară care este compusă din fosfolipide șilipopolizaharide. Prezența lipopolizaharidelor pe membrana exterioară debacteriile îi conferă o sarcină negativă generală peretelui celular. Din cauza acestoraproprietăți, E. coli nu reține violetul de cristal în timpul procesului de colorare Gram.

Vezi pagina explicând Gram-pozitive și Gram-negative, bacterii

E., Coli Microscopie

Pentru a determina dacă o tulpină(s) ispresent într-o probă, este necesar să pata eșantion. Aici, pata Gram esteutilizat deoarece ajută la distingerea bacteriilor gram pozitive și gramnegative dintr-o probă.

Fiind o diferențială pata,Gram pata este mult mai complex în comparație cu mult mai simple pete, cum ar fi albastru de metilen.Ca atare, mai mult de o pata este folosit pentru scopuri de diferențiere sale componente celulare.,

For this technique, 3 different stains are used.These include:

  • Crystal violet
  • Iodine
  • Safranin

Requirements

  • Microscope glass slide
  • A collecting wire loop
  • A heater (Burner)
  • Sample (E., Coli de Cultură)
  • apă Distilată
  • Gram (Cristal violet,Iod pata si Carbol Fuschin)
  • Alcool

Frotiu de Pregătire

  • Înainte de a pune mâna pe eșantion,de căldură pe buclă de sârmă și permite de răcire (pentru a face steril).
  • folosind bucla de sârmă, scoateți și așezați cultura bulionului pe o lamelă curată și sterilă.,
  • răspândit Ușor inoculumto aproximativ un centimetru în diametru (răspândirea de probă pe o lamelă)
  • Pentru placa de culturi (ofbacteria) folosiți un tampon steril cu buclă de sârmă pentru a picătură de soluție salină la mijloc/centru de slide
  • Folosind un alt steril wireloop (căldură și lăsat să se răcească) scoop o cantitate mică de probă și se amestecă pe picătură de apă pentru a forma o emulsie

Fixare

Aici, de căldură este folosit pentru fixare., Căldură de fixare procedura implică următoarele etape:

  • Aer uscat diapozitiv pentru frotiul uscat
  • Trece glisați prin flacără de câteva ori (de 2 sau de 3 ori) unge partea de sus

* în Timpul căldură de fixare, pentru a evita supraîncălzirea diapozitiv.,d=”448ac82572″>

Gram Colorare

  • Loc diapozitiv pe astaining raft și inundații unge cu cristal violet pentru aproximativ un minut
  • Înclinați ușor glisați șiclătiți cu apă (distilată sau apă de la robinet) ușor – Evitați aproximativ de spălat theslide
  • Inundații proba cu iodși permite diapozitiv să stea timp de aproximativ 1 minut
  • înclinați Ușor slideagain și clătiți folosind atingeți ordistilled apă (ușor).,
  • Înclinați glisați și decolorize folosind 95% ethylalcohol/acetonă – decolorizing ar trebui să fie făcut prin aplicarea de alcool în dropsfor aproximativ 8 secunde
  • se Clătește cu apă ușor
  • Șterge diapozitive uscat
  • Loc slide onmicroscope și vedere la proba

atunci Când sunt privite la microscop, Gram-negativeE. Coli va apărea de culoare Roz., Absența acestui lucru (de culoare purpurie) esteindicativ al bacteriilor Gram-pozitive și absența E. Coli Gram-negative.

Picătură Metodă

agățat drop metoda se referă la un techniquethat ajută examina mici, care trăiesc și necolorate organisme. Poate fi folosit pentruastfel de bacterii motile ca Ps. fluorescens și E. coli.,

Utilizarea agățat droptechnique este, de asemenea, foarte important având în vedere că-l ajută să se facă distincția între Brownianmovement (mișcarea particulelor suspendate într-un lichid) și motilityof microorganisme., buclă,cu atenție, o loopful de supa pe la centrul de capacul de sticlă alunecare

  • Transforma lamelă de sticlă peste proba pe coperta alunecare pentru a avea proba situată între diapozitive și ansamblulîmbrăcăminte alunecare
  • Loc diapozitiv pe themicroscope pentru vizualizare (capacul alunecare trebuie să fie pe partea de sus)
  • Înceapă cu cea mai mică putereși vizualiza specimen

    • Pentru a determina dacă bacteriile într-adevăr în mișcare, este important să se asigure că se mișcă în differentdirections și schimbă poziția., Aceasta diferențiază motilitatea organismuluidin simpla mișcare browniană.

    Vezi de Asemenea și: Bacterii la Microscop, Vezi Eubacteria pagina, Afla mai multe despre bacterii Coliforme, Microscopie, Cultură și Sensibilitate

    Revenire la Microscop Experimente, Luminos Microscopie și lame de Microscop de Pregătire

    Întoarcere de la E., Coli sub Microscop pentru a MicroscopeMaster Acasă