une patiente de 30 ans a été admise en février 2017 au département et à la clinique D’Allergologie, D’Immunologie clinique et de maladies internes en raison de réactions allergiques récurrentes suite à la consommation
ces réactions étaient en grande partie dermiques, sous forme d’urticaire sur tout le corps., Des symptômes d’urticaire généralisée récurrente ont été ressentis après l’ingestion de divers plats particulièrement complexes contenant de nombreux ingrédients différents. Le patient a associé ces symptômes à la consommation de poivrons, de clémentines, de miel de sarrasin et de vin rouge.
la réaction allergique la plus grave dans la vie du patient s’est produite après avoir mangé un fruit de mangue. En quelques minutes, le patient a développé une urticaire généralisée, suivie d’un œdème facial, de fortes douleurs à l’estomac et d’une diarrhée aqueuse. Les ambulanciers ont été appelés. Le patient a reçu de l’adrénaline, des stéroïdes et des antihistaminiques.,
des antécédents médicaux détaillés ont révélé que pendant les 6 années précédentes, le patient présentait des symptômes de rhinite saisonnière (larmoiement, démangeaisons des paupières et écoulement nasal aqueux).
à l’époque, le patient était également traité par la lévothyroxine pour l’hypothyroïdie. Les antécédents familiaux du patient sont atteints de maladies allergiques: la mère du patient est allergique aux allergènes inhalatoires et son père au bouleau et au chat.
dans ce cas complexe, le diagnostic nécessitait un large éventail de méthodes de diagnostic., Dans le cadre des diagnostics effectués dans le département et la clinique D’Allergologie, D’Immunologie clinique et de maladies internes, le patient a subi des tests cutanés avec un ensemble d’allergènes inhalatoires (Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides pteronyssinus, herbe/céréales, mauvaises herbes, Aspergillus fumigatus, Cladosporium herbarum, fourrure de chat, peuplier, noisetier, aulne, bouleau, armoise, plantain ribwort) et allergènes alimentaires (œuf de poule, lait farine, arachides, noisette, porc, viande de poulet, orange) de Allergopharma-Nexter SP. z o.o. (Ltd.,), ainsi que des tests cutanés indigènes avec des aliments frais (Miel de sarrasin, poivrons, mangue, Clémentine, carotte, céleri, arachides, banane, moutarde, curcuma, carvi, vin rouge).,le système ImmunoCap (ThermoFisher Scientific, Uppsala, Suède) a permis de déterminer des vels d’ge spécifiques pour certains allergènes (armoise, absinthe, mélange d’herbe précoce, mélange d’herbe tardive, céleri, poivrons, carotte, mangue, banane, pêche, pomme, arachides, noisettes, Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, mélange d’arbres précoces, mélange d’arbres tardifs, bouleau, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, Alternaria tenius, protéine de lait de vache, mélange d’assaisonnement, moutarde), en utilisant L’équipement Phadia100 selon les instructions du fabricant (immunocap specifi i, fluoroenzymeimmunoessay, 52-5291-FR/05).,
le diagnostic a été élargi par une détermination du niveau d’ge spécifique pour les composants allergènes, en utilisant la méthode ImmunoCap ISAC.
chacun de ces tests a une spécificité et une sensibilité différentes et, non moins important, une disponibilité et un coût différents. Les tests cutanés sont considérés comme une méthode rapide et peu coûteuse avec des résultats immédiats. Malheureusement, leur taux de détection dans l’allergie alimentaire est limité. Dans un article récent de Griffiths et al. les taux de détection pour SPTs (53%) et ISAC (59%) étaient similaires, avec un taux de détection plus élevé pour les tests ImmunoCAP (66%)., Chez les patients allergiques aux noix, les tests de sensibilisation aux noix ont obtenu des résultats similaires, mais avec une sensibilité plus élevée (71%) pour les tests ImmunoCAP que les tests SPT (53%) ou ISAC (65%). Par conséquent, nous avons étendu le diagnostic dans ce cas à la détermination in vitro de la concentration d’ge spécifiques aux allergènes. L’étalon-or dans le diagnostic de l’allergie alimentaire est toujours le défi alimentaire contrôlé par placebo à double insu. Dans ce cas, le patient n’a pas consenti aux défis de provocation.,
Les tests cutanés ont été positifs pour les extraits allergènes suivants (diamètre moyen en millimètres): herbe 7 mm; mauvaises herbes: 8 mm; fourrure de chat: 5 mm; armoise: 6 mm; plantain à nervures: 4 mm; céleri: 2 mm; Clémentine: 2 mm (histamine 4 mm, témoin négatif 0 mm, un résultat a été interprété comme positif dans le cas d’un diamètre moyen ≥ 3 mm). Aucune réaction cutanée n’a été observée pour les autres extraits allergènes testés. Le niveau total D’ge était de 406,53 kU/L.
les résultats des tests natifs étaient positifs pour la mangue 5 mm, le céleri 3 mm.,
Les résultats pour des niveaux spécifiques d’ge testés à l’aide de la méthode ImmunoCap sont présentés dans le tableau 1. Des niveaux élevés d’ge (supérieurs à 0,35 kU/L) ont été trouvés contre l’armoise, l’absinthe, le mélange d’herbe précoce, le mélange d’herbe tardive, le céleri, les poivrons, la carotte, la mangue, la banane, la pêche, la pomme, les arachides.
Après que le patient soit sorti de l’hôpital, nous avons reçu les résultats des tests IMMUNOCAP ISAC (Tableau 2)., Un niveau élevé d’ge spécifique pour Art v 1 (défensine) de l’armoise et Phl p 1 de timothy a été particulièrement remarquable. Il convient de souligner qu’il n’y avait pas de niveaux élevés d’ge spécifiques aux composants des allergènes alimentaires disponibles dans ImmunoCap ISAC. Il est possible que les symptômes de L’OEA chez ce patient résultent d’une réactivité croisée avec des allergènes de Timothée et d’armoise. Les symptômes de l’urticaire peuvent également résulter de la sensibilité à l’un des allergènes alimentaires mentionnés ci-dessus., La seule réaction anaphylactique dans la vie des patients s’est produite après la consommation de mangue, et cette hypersensibilité était celle qui, nous avons décidé, nécessitait un diagnostic plus approfondi.
Il convient ici de préciser clairement que le test IMMUNOCAP ISAC n’a pas indiqué si, dans ce cas particulier, l’allergie du patient à la mangue était le résultat d’une allergie croisée avec L’Art v 1, ou d’une allergie à une autre molécule, indépendante de l’armoise. ImmunoCap ISAC n’a aucun composant allergène de mangue disponible.
pour clarifier cela, le test D’inhibition ImmunoCap a été appliqué, en utilisant l’extrait d’allergène de mangue fraîche., L’étude était basée sur le modèle SPHIA (Single Point Highest Inhibition Achievable Assay) décrit par Bernardi et al. en 2011 .
la méthodologie de ce test d’inhibition est toujours considérée comme expérimentale, bien que des tests d’inhibition similaires aient été appliqués précédemment par plusieurs auteurs. Par exemple, dans notre unité de recherche, un cas de patient allergique aux graines de tournesol a été décrit, où le test D’inhibition D’ImmunoCap ISAC a été utilisé pour prouver la réactivité croisée. Dans le test d’inhibition art v 1, Art v 3 et cruche r 3 ont été inhibés par la protéine présente dans l’extrait d’allergène de graine de tournesol .,
pour effectuer le test d’inhibition, une mangue mûre a été achetée dans une épicerie locale offrant des aliments écologiques. Le fruit a été lavé, pelé et la fosse a été enlevée pour obtenir la partie comestible. L’extrait de pulpe contenant des protéines a été obtenu à l’aide de méthodes décrites précédemment . Les fruits coupés en dés ont été congelés dans de l’azote liquide et mélangés pour obtenir une pulpe lisse. La pulpe a ensuite été mélangée avec 1 m de NaCl dans le rapport 2:1 (2:1, v/v) et laissée à 2-8 °C pendant 24 h. Après ce temps, le mélange a été centrifugé à température ambiante à 12 000×g pendant 60 min. L’extrait a été obtenu contenant 2,35 mg / dL de protéine., Dans le test d’inhibition, l’extrait obtenu a été mélangé avec le sérum sanguin du patient au rapport volumique de 1:1 et incubé à 2-8 °C pendant 24 h. Un échantillon à l’aveugle a été préparé simultanément afin de tenir compte de la dilution du sérum. À cette fin, le sérum sanguin du patient a été mélangé avec 1 m de NaCl (1:1, v/v), puis incubé à 2-8 °C pendant 24 h. Après ce temps, le niveau d’ge spécifique à l’armoise, à L’Art v1 et à la mangue a été déterminé dans le matériau préparé, à la fois inhibé et dilué, ,
dans le test d’inhibition, nous avons obtenu les résultats suivants:le taux initial d’armoise sige dans le sérum du patient était de 144,32 kU/L. dans l’échantillon à l’aveugle, après l’avoir dilué avec 1 m de NaCl 1: 1, la concentration de sIgE était de 72,16 kU/l. après incubation du sérum du patient avec un extrait d’allergène de mangue, le taux D’ort d’armoise était de 48,81 kU/L. Il a ainsi été démontré que l’extrait d’allergène de mangue inhibait la liaison de la mangue.armoise i de 32,38%.
le taux initial de tar v 1 sIgE dans le sérum du patient était de 99,8 kU/l., Dans l’échantillon aveugle, après l’avoir dilué avec 1 m de NaCl 1: 1, la concentration de sIgE était de 49,9 kU/L. après incubation du sérum du patient avec l’extrait d’allergène de mangue, le taux D’Art Art v 1 était de 35,2 kU/L. Il a ainsi été démontré que l’extrait d’allergène de mangue inhibait la liaison desge art v 1 de 29,5%. Sur la base des procédures de diagnostic effectuées, il a été démontré que les symptômes présents chez le patient pouvaient être le résultat d’une réaction croisée entre les allergènes de la mangue et L’Art v 1. Les résultats du test d’inhibition sont présentés à la Fig. 1.
résultats du test d’inhibition avec extrait de mangue
en raison du fait que ce test d’inhibition était une méthode expérimentale et que le protocole précédemment décrit a été modifié pour accompagner les besoins de ce cas spécifique, un test d’inhibition selon un protocole différent a été effectué afin de fournir une confirmation finale de l’allergie croisée. Le sérum du patient a été incubé avec l’extrait d’allergène d’un fruit de mangue, en utilisant la matrice ImmunoCap., L’ImmunoCap a été prélavé quatre fois: deux fois avec L’ImmunoCap wash worksolution, et deux fois avec le tampon de phosphate de pH neutre. 50 µL de sérum testé ont été ajoutés à L’ImmunoCap préparé de cette façon, et incubés pendant 1 h à température ambiante, puis centrifugés à 1500×g pendant 2 min. Le sérum appauvri en anticorps obtenu et le sérum natif ont été analysés pour la présence du composant allergène Art v 1, en utilisant la méthode ImmunoCap.
le taux initial de tar v 1 sIgE dans le sérum des patients était de 99,8 kU/L., Dans ce cas, le sérum du patient n’était pas dilué, un contrôle négatif n’était donc pas nécessaire. Après incubation du sérum du patient avec la matrice de mangue ImmunoCap, le taux D’Art Art v 1 était de 56,5 kU/L. en conséquence, il a été montré que la matrice de mangue ImmunoCap inhibait la liaison des Art Art v 1 de 43,4%. Ces résultats sont présentés dans la Fig. 2.
les Résultats de l’inhibition de la mangue allergène sur la ImmunoCap matrice
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