rzeka miała wielkie znaczenie w historii rdzennych Amerykanów, ponieważ wzdłuż jej doliny uformowały się liczne prehistoryczne i historyczne cywilizacje. Przez tysiące lat Indianie używali rzeki jako głównego szlaku transportowego i handlowego. Jego wody łączyły społeczności.,

w ciągu pięciu stuleci przed Europejskim podbojem Kultura Mississippi zbudowała wiele regionalnych chiefdoms i głównych kopców ziemnych w Dolinie Ohio, takich jak Angel Mounds w pobliżu Evansville w stanie Indiana, a także w Dolinie Mississippi i na południowym wschodzie. Historyczne ludy Osage, Omaha, Ponca i Kaw żyły w Dolinie Ohio, ale pod presją handlu futrami z Narodów Irokezów na północnym wschodzie, migrowały na zachód od rzeki Missisipi w XVII wieku do terytorium określanego obecnie jako Missouri, Arkansas i Oklahoma.,

istnieje kilka relacji o odkryciu i przemierzeniu rzeki Ohio przez Europejczyków w drugiej połowie XVII wieku: ekspedycje Trans-Appalachów wirginijskiego Anglika Abrahama Wooda w latach 1654-1664; ekspedycja Ohio Francuza Roberta De La Salle w 1669; i dwie ekspedycje Wirginijczyków sponsorowane przez pułkownika Wooda: Ekspedycja Battów i Fallam w 1671 oraz ekspedycja Needhama i Arthura w latach 1673-74., Pierwszym Europejczykiem, który przebył długość rzeki, od źródeł Allegheny do jej ujścia na Missisipi, był Holender z Nowego Jorku, Arnout Viele, w 1692 roku.

w 1749 roku Wielka Brytania założyła Ohio Company, aby osiedlić się i handlować w okolicy. Eksploracja terytorium i handel z Indianami w regionie w pobliżu Forks sprowadziły Brytyjczyków z Pensylwanii i Wirginii przez góry, a obie kolonie zajęły to terytorium., Ruch brytyjskich osadników w Allegheny Mountains i roszczenia do terenów w pobliżu dzisiejszego Pittsburgha doprowadziły do konfliktu z Francuzami, którzy mieli forty w dolinie rzeki Ohio. Konflikt ten został nazwany wojną francusko-indyjską i połączył się w ogólnoświatową walkę angielsko-francuską-wojnę siedmioletnią. W 1763 roku, po klęsce w wojnie, Francja przekazała swój obszar na wschód od rzeki Missisipi Wielkiej Brytanii, a tym samym osadnikom w koloniach Wielkiej Brytanii.,

Brytyjski Traktat z Fort Stanwix z 1768 roku z kilkoma plemionami otworzył Kentucky na osadnictwo kolonialne i ustanowił rzekę Ohio jako południową granicę terytorium Indian amerykańskich. W 1774 ustawa Quebecka przywróciła Quebecowi tereny na wschód od rzeki Missisipi i na północ od rzeki Ohio, czyniąc Ohio południową granicą Kanady. To uspokoiło brytyjskich poddanych Kanady, ale rozgniewało kolonistów z trzynastu kolonii., Wojna Lorda Dunmore ' a na południe od rzeki Ohio przyczyniła się również do przekazania Ziemi na północ Quebecowi, aby powstrzymać dalsze wkraczanie brytyjskich kolonizatorów na ziemie tubylcze. Podczas Rewolucji Amerykańskiej, w 1776 roku brytyjski inżynier wojskowy John Montrésor stworzył mapę rzeki pokazującą strategiczne położenie Fortu Pitt, w tym szczegółowe informacje nawigacyjne na temat rapidów i dopływów rzeki Ohio w tym obszarze. Jednak Traktat Paryski (1783) przekazał całą dolinę Ohio Stanom Zjednoczonym.,

zbudowany w latach 1847-1849, Wheeling Suspension Bridge był pierwszym mostem przez rzekę i kluczowym elementem drogi krajowej.

ekonomiczne połączenie kraju Ohio ze Wschodem zostało znacznie zwiększone w 1818 roku, kiedy droga krajowa budowana na zachód od Cumberland w stanie Maryland dotarła do Wheeling w Wirginii (obecnie Wirginia Zachodnia), zapewniając łatwiejsze połączenie lądowe od rzeki Potomac do rzeki Ohio., Wheeling Suspension Bridge został zbudowany nad rzeką w Wheeling w latach 1847-1849, co ułatwiło podróż na zachód. Przez krótki czas, aż do 1851 roku, był to największy most wiszący na świecie. Most przetrwał amerykańską wojnę secesyjną, po ulepszeniu w 1859 roku. Został odnowiony ponownie w 1872 roku i pozostaje w użyciu jako najstarszy most wiszący w USA

Louisville zostało założone w 1779 roku przy jedynej głównej naturalnej barierze nawigacyjnej na rzece, Falls Of The Ohio. Wodospady były serią rapidów, w których rzeka spadła 26 stóp (7 .,9 m) na odcinku ok. Na tym obszarze rzeka płynęła przez twarde, bogate w skamieniałości pokłady wapienia. Pierwsze śluzy na rzece-Louisville i Portland Canal-zostały zbudowane w latach 1825-1830 w celu opłynięcia wodospadu. Obawy przed upadkiem przemysłu przeładunkowego w Louisville okazały się nieuzasadnione: jednak rosnąca wielkość parowców i barek na rzece oznaczała, że przestarzałe śluzy mogły służyć tylko najmniejszym statkom do końca wojny secesyjnej, kiedy to wprowadzono ulepszenia. Stany Zjednoczone, W latach sześćdziesiątych XX wieku ponownie rozbudowano Korpus inżynierów, tworząc dzisiejsze śluzy i zapory McAlpine.

w XIX wieku emigranci z Wirginii, Karoliny Północnej i Kentucky podróżowali rzeką i osiedlali się wzdłuż jej północnego brzegu. Znane jako butternuts, tworzyli dominującą kulturę w południowych częściach Ohio, Indiana I Illinois ze społeczeństwem, które było przede wszystkim południe w kulturze. W dużej mierze poświęcając się rolnictwu, wysyłali wiele swoich produktów wzdłuż rzeki do portów, takich jak Cincinnati.,

ponieważ rzeka Ohio płynęła na zachód, stała się wygodnym środkiem ruchu na zachód przez pionierów podróżujących z zachodniej Pensylwanii. Po dotarciu do ujścia Ohio osadnicy wyruszyli na północ rzeką Missisipi do St. Louis w stanie Missouri., Tam, niektóre ciągnęły się w górę rzeki Missouri, niektóre w górę Missisipi, a niektóre dalej na zachód nad szlakami lądowymi. Na początku XIX wieku Piraci rzeczni, tacy jak Samuel Mason, działający w Cave-In-Rock w stanie Illinois, waili podróżnych w drodze w dół rzeki. Zabijali podróżników, kradli ich towary i podpalali łodzie. Folktales o Mike Fink przypominają keelboats używane do handlu w pierwszych dniach amerykańskiego osadnictwa. The Ohio River boatmen zainspirował wykonawcę dana Emmetta, który w 1843 roku napisał piosenkę „The Boatman ' s Dance”.,

statki handlowe podróżowały na południe Missisipi do Nowego Orleanu, a czasem dalej do Zatoki Meksykańskiej i innych portów w obu Amerykach i Europie. Zapewniało to bardzo potrzebną drogę eksportu towarów z zachodu, ponieważ wędrówka na wschód przez Appalachów była długa i żmudna. Potrzeba dostępu do portu w Nowym Orleanie przez osadników w Dolinie Ohio jest jednym z czynników, które doprowadziły do zakupu Luizjany przez Stany Zjednoczone w 1803 roku.,

ponieważ rzeka stanowi południową granicę Ohio, Indiany i Illinois, była częścią granicy między wolnymi i niewolniczymi stanami w latach poprzedzających amerykańską wojnę secesyjną. Wyrażenie „sprzedane w dół rzeki” powstało jako lament niewolników z górnego południa, zwłaszcza z Kentucky, którzy byli wysyłani przez Ohio i Missisipi do plantacji bawełny i cukru na głębokim południu. Zmiany w uprawach na Górnym południu doprowadziły do sprzedaży niewolników na południu, gdzie kwitła ekspansja plantacji bawełny., Wynalezienie ginu bawełnianego sprawiło, że uprawa bawełny o krótkich odcinkach przynosiła zyski w całym czarnym pasie tego regionu.

przed i w czasie wojny secesyjnej Rzeka Ohio była nazywana „rzeką Jordan” przez niewolników przekraczających ją, aby uciec na wolność na północy podziemną koleją. Więcej uciekających niewolników, szacowanych na tysiące, odbywało niebezpieczną podróż na północ do wolności przez rzekę Ohio, niż gdziekolwiek indziej na granicy północ-południe., Harriet Beecher Stowe 's Uncle Tom' s Cabin, bestsellerowa powieść, która napędzała pracę abolicjonistów, była najbardziej znana z powieści anty-niewolniczych, które przedstawiały takie ucieczki w całym Ohio. Czasy zostały wyrażone przez 20-wiecznych powieściopisarzy, jak również, jak noblista Toni Morrison, którego powieść ukochany został zaadaptowany jako film o tym samym tytule. Skomponowała również libretto do Opery Margaret Garner (2005), opartej na życiu i procesie zniewolonej kobiety, która uciekła z rodziną za rzekę.,

karta kolonialna dla Wirginii określała jej terytorium jako rozciągające się na północny brzeg Ohio, tak że koryto rzeki było „własnością” Wirginii. Tam, gdzie rzeka służy jako granica między Stanami, Kongres wyznaczył całą rzekę do przynależności do stanów na wschodzie i południu, tj. Wirginii Zachodniej i Kentucky w momencie przyjęcia do Unii, które zostały podzielone od Wirginii. Tak więc Wheeling Island, największa zamieszkana wyspa na rzece Ohio, należy do Wirginii Zachodniej, chociaż jest bliżej brzegu Ohio niż do brzegu Wirginii Zachodniej., Kentucky pozwało stan Indiana na początku lat 80.z powodu budowy nigdy nie ukończonej elektrowni jądrowej Marble Hill w Indianie, która odprowadzałaby ścieki do rzeki. Miało to niekorzystny wpływ na zaopatrzenie Kentucky w wodę.

Sąd Najwyższy Stanów Zjednoczonych orzekł, że jurysdykcja Kentucky (a w domyśle-Wirginii Zachodniej) rozciągała się tylko do znaku nizinnego z 1793 roku (ważne, ponieważ rzeka została intensywnie zaporowana dla żeglugi, tak że obecny brzeg rzeki znajduje się na północ od Starego znaku nizinnego.,) Podobnie, w 1990 roku, Kentucky zakwestionował prawo Illinois do pobierania podatków od kasyna rzecznego zadokowanego w Metropolis, powołując się na własną kontrolę nad całą rzeką. W tym samym czasie otwarto prywatną łódkę z kasynem, która zacumowała w Evansville w stanie Indiana na rzece Ohio. Chociaż takie łodzie pływały po rzece Ohio w owalnym wzorze w górę iw dół, stan Kentucky wkrótce zaprotestował. Inne państwa musiały ograniczyć swoje rejsy do posuwania się naprzód, a następnie cofania i cofania się tylko na wybrzeżu Indiany., Zarówno Illinois i Indiana już dawno zmieniły swoje prawa, aby umożliwić kasyna riverboat być na stałe zadokowane, z Illinois zmienia się w 1999 i Indiana w 2002.

Silver Bridge w Point Pleasant, Wirginia Zachodnia, który zawalił się do rzeki Ohio 15 grudnia 1967, zabijając 46 osób.

Srebrny Most w Point Pleasant w Wirginii Zachodniej zawalił się do rzeki 15 grudnia 1967 roku. W wyniku zawalenia zginęło 46 osób, które przechodziły przez most., Most został zbudowany w 1929 roku, a do 1967 roku przenosił zbyt duże obciążenie jak na jego konstrukcję. Most został odbudowany około 1,5 km dalej i służył jako Silver Memorial Bridge w 1969 roku.

na początku lat 80.XX wieku w Clarksville w stanie Indiana utworzono rezerwat przyrody Falls Of The Ohio National Wildlife Conservation Area.