przeznaczenie
Hardy Diagnostics mannitol Salt Agar (MSA) jest zalecany do stosowania jako środek selektywny i różnicowy do izolacji patogennych gronkowców.
podsumowanie
Koch w 1942 r.zgłosił zastosowanie pożywki zawierającej 7,5% chlorku sodu jako środka selektywnego do izolacji gronkowców.,(5) wyniki zostały potwierdzone i poprawione przez Chapmana w 1945 r.przez dodanie tego stężenia soli do agaru mannitolu Czerwieni fenolowej, ponieważ Staphylococcus aureus Zwykle fermentuje mannitol.(3) gronkowce niepatogenne zwykle wykazują mniej bujny wzrost na tym podłożu po okresie inkubacji.
chlorek sodu, stężenie 7,5%, jest prawie dziesięć razy większe niż zwykle stężenie obserwowane w większości mediów. Służy hamowaniu większości organizmów z wyjątkiem gronkowców u okazów flory mieszanej. Ekstrakt z wołowiny i peptony dostarczają niezbędnych pierwiastków węgla, azotu i siarki., Mannitol dodaje się, aby pokazać możliwości fermentacji organizmów. Produkcja kwasu w wyniku fermentacji tego cukru powoduje powstawanie kolonii o żółtej strefie. Gronkowce, które nie fermentują mannitolu, wykazują fioletową lub czerwoną strefę wokół Kolonii.
Mannitol Salt Agar (MSA) jest zalecany przez Amerykańskie Stowarzyszenie Zdrowia Publicznego do oznaczania gronkowców w żywności i produktach mlecznych.,(9,10)
FORMULA
Ingredients per liter of deionized water:*
Sodium Chloride | 75.0gm |
Proteose Peptone | 10.0gm |
Mannitol | 10.0gm |
Beef Extract | 1.0gm |
Phenol Red | 0.025gm |
Agar | 15.0gm |
Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.,
przechowywanie i trwałość
Przechowywanie: po otrzymaniu przechowywać w temperaturze 2-8ºC z dala od bezpośredniego światła. Nie należy stosować leku w przypadku jakichkolwiek oznak zepsucia (kurczenia się, pękania lub przebarwienia), zanieczyszczenia lub upływu terminu ważności. Produkt jest wrażliwy na światło i temperaturę; chronić przed światłem, nadmiernym ciepłem, wilgocią i zamarzaniem.
środki ostrożności
Kolekcja próbek: zapoznaj się z wymienionymi referencjami, aby uzyskać informacje na temat kolekcji próbek.,(1,2,4,7) Materiał zakaźny należy niezwłocznie przedłożyć bezpośrednio do laboratorium i zabezpieczyć przed nadmiernym ciepłem i zimnem. Jeżeli zachodzi opóźnienie w przetwarzaniu, próbkę należy zaszczepić na odpowiednim nośniku transportowym i schłodzić do czasu zaszczepienia.
sposób użycia: pozwolić płytom ogrzać się do temperatury pokojowej, a powierzchnia agaru wyschnąć przed zaszczepieniem. Silnie zaszczepić i zaszczepić próbkę tak szybko, jak to możliwe po pobraniu. Jeśli próbka do hodowli znajduje się na waciku, należy przewrócić wacik na małym obszarze powierzchni agaru., Smuga do izolacji za pomocą sterylnej pętli. Inkubować płytki tlenowo w temperaturze 35-37ºC przez 24-48 godzin. Zbadaj morfologię kolonialną.
interpretacja wyników
fermentory mannitolu, takie jak S. aureus, pojawiają się w mediach jako żółte kolonie z żółtymi strefami. Fermentory nie-mannitolowe, takie jak S. epidermidis, jeśli są obecne, będą miały jasne kolonie różowe do czerwonych bez zmiany koloru żółtego w pożywce. Należy zapoznać się z wymienionymi referencjami w celu identyfikacji morfologii Kolonii i dalszych badań biochemicznych wymaganych do identyfikacji.,(1,2,4,7)
ograniczenia
większość organizmów innych niż gronkowce jest hamowana przez wysokie stężenie soli w agarze soli mannitolu, z wyjątkiem niektórych halofilowych organizmów morskich.
materiały wymagane, ale nie dostarczone
standardowe materiały i wyposażenie mikrobiologiczne, takie jak pętle, waciki, pałeczki aplikatora, inne pożywki do hodowli, spalarnie, inkubatory itp., jak również odczynniki serologiczne i biochemiczne, nie są przewidziane.,
QUALITY CONTROL
Test Organisms | Inoculation Method* | Incubation | Results | |||
Time | Temperature | Atmosphere | ||||
Mannitol Salt Agar (Cat. no., J330): | ||||||
Staphylococcus aureus ATCC® 6538 |
J | 18hr | 35°C | Aerobic | Growth; yellow colonies and media at 18-24 hours | |
Escherichia coli ** ATCC® 8739 |
B | 72hrs | 35°C | Aerobic | Partial to complete inhibition | |
Mannitol Salt Agar (Cat. no.,”>Aerobic | Partial to complete inhibition | |||||
Escherichia coli ATCC® 8739 |
A | 72hr | 30-35°C | Aerobic | Partial to complete inhibition |
USER QUALITY CONTROL
Physical Appearance
Mannitol Salt Agar (MSA) should appear clear, slightly opalescent, and pinkish-red in color.,
kolonie Staphylococcus aureus (ATCC® 25923) rosnące na agarze soli mannitolu. Inkubowany przez 48 godzin w temperaturze 35ºC.
Proteus mirabilis (ATCC® 12453) hamuje wzrost na agarze soli mannitolu. Inkubowany przez 48 godzin w temperaturze 35ºC.
2. Tille, P. Bailey and Scott ' s Diagnostic Microbiology, C. V. Mosby Company, St. Louis, MO.
3. Chapman, G. H. 1945. J. Bakteriol.; 50:201.
4. Isenberg, H. D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol., I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, D. C.
5. Koch, F. E. 1942. Zentr. Bakt. Labt. Oryg.; 149:122.
7. Jorgensen, J. H., et al. 2015. Podręcznik Mikrobiologii Klinicznej, wyd.11 American Society for Microbiology, Washington, D. C.
8. Zapewnienie jakości przygotowanych do celów handlowych mikrobiologicznych podłoży hodowlanych, M22. Clinical and LaboratoryStandards Institute (CLSI-dawniej NCCLS), Wayne, PA.
9. American Public Health Association. 1993. Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 16th ed. APHA, Waszyngton, D.,C.
10. APHA Technical Committee on Microbiological Methods for Foods. 2001. Kompendium metod mikrobiologicznego badania żywności, wyd.4 APHA, Washington, D. C.
ATCC jest zarejestrowanym znakiem towarowym American Type Culture Collection.
IFU-10553
Dodaj komentarz