wprowadzenie (E. Coli)
powszechnie określana jako E. coli, Escherichia coli jest bakterią, która występuje w wielu środowiskach, w tym w różnych pokarmach, glebie i jelitach zwierzęcych. E. coli jest bardzo zróżnicowany i należy do genusEscherichia., Podczas gdy większość szczepów jest nieszkodliwa (a także ważna w ludzkim przewodzie pokarmowym), inne są szkodliwe i mogą powodować bardzo poważne implikacje zdrowotne. Dobrym tego przykładem jest E coli 0157: H7.,v>
oprócz zatruć pokarmowych, które mogą powodować nieżyty i inne problemy w układzie trawiennym, szkodliwe szczepy e colican powodują następujące problemy zdrowotne;
- zakażenie układu moczowego
- choroby układu oddechowego
- Shiga toxin-producing Ecoli (STEC)
- Enterotoxigenic E coli(ETEC)
- Enteropathogenic E coli(EPEC)
- Enteroaggregative E., coli(EAEC)
- Enteroinvasive E coli(EIEC)
- Diffusely adherent E coli(DAEC)
- Crystal violet
- Iodine
- Safranin
- Microscope glass slide
- A collecting wire loop
- A heater (Burner)
- Sample (E., Coli)
- woda destylowana
- plama gramowa (fiolet krystaliczny,plama jodowa i Karbol Fuschin)
- alkohol
- przed pobraniem próbki podgrzej pętlę drutu i pozwól na chłodzenie (aby uzyskać sterylność).
- przy użyciu pętli drucianej, miarka i umieścić kulturę bulionu na czystym, sterylnym szkiełku.,
- delikatnie rozprowadzić szczep o średnicy około centymetra (rozprowadzając próbkę na szkiełku)
- w przypadku kultur płytkowych (ofbacteria) użyj sterylnej pętli drutu, aby upuścić roztwór soli fizjologicznej na środku szkiełka
- za pomocą innego sterylnego wireloop (ogrzać i ostudzić) zgarnij niewielką ilość próbki i wymieszaj kroplę wody, aby utworzyć emulsję
- wysuszyć suwak powietrzem, aby wyschnąć
- przeprowadź suwak przez płomień kilka razy (2 lub 3 razy) rozmazuj stronę do góry
- umieść suwak na stojaku do barwienia i zalej rozmaz z fioletem krystalicznym przez około jedną minutę
- lekko przechylić suwak i delikatnie zanurzyć w wodzie (destylowanej lub z kranu) – unikać szorstkiego mycia zjeżdżalni
- zalać próbkę jodyną i pozostawić suwak na około 1 minutę
- lekko przechylić ślizg i spłukać wodą z kranu (delikatnie).,
- przechyl suwak i odbarwiaj przy użyciu 95% etyloalkoholu/acetonu – odbarwianie należy wykonać przez zastosowanie alkoholu w kroplach przez około 8 sekund
- delikatnie spłucz wodą
- Zablokuj suwak suche
- umieść slajd namikroskopie i zobacz próbkę
- Obróć szklany suwak nad próbką na poślizgu pokrywy,aby próbka leżała między suwakiem a poślizgiem pokrywy
- umieść suwak na mikroskopie do oglądania (poślizg pokrywy powinien być na górze)
- umieść suwak na mikroskopie do oglądania (poślizg pokrywy powinien znajdować się na górze)
- zacznij od najniższej mocy i zobacz próbkę
iv id
w przewodzie pokarmowym e coli odgrywa ważną rolę, ponieważ wspomaga trawienie i wspomaga wchłanianie witamin wit z pożywienia w organizmie., In addition, it has been shown to bebeneficial in that it prevents the growth and proliferation of other harmfulspecies of bacteria that would otherwise cause health problems.
Main Category of Pathogenic (Diarrheagenic) E. Coli.
Gram Stain
E. coli jest opisany jako gram-negativebacterium. Dzieje się tak dlatego, że plamy ujemne przy użyciu Gramstain.
plama Grama jest techniką różnicową, która jest powszechnie stosowana do celów klasyfikacji bakterii. Technika barwienia rozróżnia dwa główne typy bakterii (gram-dodatnie i Gram-ujemne), nadając kolor komórkom.,
jako bakterie Gram-ujemne,E. coli mają dodatkową błonę zewnętrzną, która składa się z fosfolipidów ilipopolisacharydów. Obecność lipopolisacharydy na błonie zewnętrznej bakterii daje ogólny ujemny ładunek do ściany komórkowej. Ze względu na te właściwości, E. coli nie zachowuje fioletu krystalicznego podczas procesu barwienia gramowego.
patrz strona wyjaśniająca bakterie Gram-dodatnie i Gram-ujemne
E., Mikroskopia Coli
aby określić, czy szczep(szczepy) jest obecny w próbce, konieczne jest zabarwienie próbki. W tym przypadku plama Grama jest używana, ponieważ pomaga odróżnić bakterie gram-dodatnie i gramnegatywne w próbce.
będąc różniczkową plamą,plama gramowa jest bardziej złożona w porównaniu z prostszymi Plamami, takimi jak metylen blue.As takie, więcej niż jedna plama jest używana do celów różnicowania jej składników komórkowych.,
For this technique, 3 different stains are used.These include:
Requirements
przygotowanie rozmazu
mocowanie
do naprawy., Procedura mocowania na gorąco obejmuje następujące kroki:
* podczas mocowania termicznego unikaj przegrzania prowadnicy.,d=”448ac82572″>
barwienie grama
gdy ogląda się pod mikroskopem, gram-negativee. Coli będzie wyglądać różowo., Brak tego (koloru fioletowego)jestwskazem bakterii Gram-dodatnich i braku Gram-ujemnego E. Coli.
metoda wiszącego upuszczania
metoda wiszącego upuszczania odnosi się do techniki, która pomaga badać małe, żywe i nietknięte organizmy. Może być stosowany dla takich bakterii ruchliwych jak Ps. fluorescens i E. coli.,
zastosowanie wiszącej technologii droptechnique jest również bardzo ważne, ponieważ pomaga odróżnić ruch Brownianmovement (ruch cząstek zawieszonych w płynie) i ruch mikroorganizmów.,
aby określić, czy bakterie się poruszają, ważne jest, aby upewnić się, że porusza się ona w różnych kierunkach i zmienia pozycję., To odróżnia ruchliwość organizmu od zwykłego ruchu Browna.
Zobacz także: bakterie pod mikroskopem, zobacz stronę Eubacteria, dowiedz się więcej o postaciach coli, hodowli mikroskopowej i wrażliwości
powrót do eksperymentów mikroskopowych, mikroskopii brightfielda i przygotowania szkieł mikroskopowych
powrót z E., Coli under The Microscope to MicroscopeMaster Home
Dodaj komentarz