Beoogd gebruik
Hardy Diagnostics Mannitolzout-Agar (MSA) wordt aanbevolen voor gebruik als een selectief en differentieel medium voor de isolatie van pathogene stafylokokken.
samenvatting
Koch meldde het gebruik van een medium met 7,5% natriumchloride als een selectief agens voor de isolatie van stafylokokken in 1942.,(5) de resultaten werden door Chapman in 1945 bevestigd en verbeterd door de toevoeging van deze zoutconcentratie aan Fenolrood Mannitolagar, aangezien Staphylococcus aureus gewoonlijk mannitol fermenteert.(3) niet-pathogene stafylokokken vertonen meestal minder weelderige groei op dit medium na de incubatieperiode.
een natriumchloride-concentratie van 7,5% is bijna tien keer de gebruikelijke concentratie die in de meeste media wordt waargenomen. Het dient om de meeste organismen behalve stafylokokken in gemengde flora specimens te remmen. Het rundvleesextract en peptonen leveren de essentiële elementen koolstof, stikstof en zwavel., Mannitol wordt toegevoegd om de fermentatiecapaciteiten van de organismen aan te tonen. Zure productie als gevolg van fermentatie van deze suiker resulteert in de vorming van kolonies met een gele zone. De stafylokokken die mannitol niet fermenteren vertonen een paarse of rode zone rond de kolonies.
Mannitolzout Agar (MSA) wordt aanbevolen door de American Public Health Association voor de telling van stafylokokken in levensmiddelen en zuivelproducten.,(9,10)
FORMULA
Ingredients per liter of deionized water:*
Sodium Chloride | 75.0gm |
Proteose Peptone | 10.0gm |
Mannitol | 10.0gm |
Beef Extract | 1.0gm |
Phenol Red | 0.025gm |
Agar | 15.0gm |
Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.,
* aangepast en / of aangevuld om aan prestatiecriteria te voldoen.
opslag en houdbaarheid
opslag: bij ontvangst bewaren bij 2-8ºC uit de buurt van direct licht. Media mogen niet worden gebruikt als er tekenen zijn van verslechtering (krimpen, barsten of verkleuring), contaminatie of als de vervaldatum is verstreken. Het Product is licht en temperatuur gevoelig; bescherm tegen licht, overmatige hitte, vocht, en het bevriezen.
voorzorgsmaatregelen
monsterverzameling: raadpleeg de vermelde referenties voor informatie over de monsterverzameling.,(1,2,4,7) infectieus materiaal moet onverwijld rechtstreeks naar het laboratorium worden gebracht en tegen overmatige hitte en koude worden beschermd. Indien de verwerking moet worden uitgesteld, moet het monster op een geschikt transportmedium worden ingeënt en tot de inenting in de koelkast worden bewaard.
wijze van gebruik: laat de platen op kamertemperatuur komen en laat het agar-oppervlak drogen alvorens te worden geïnoculeerd. Inoculeer en streak het specimen zo snel mogelijk na het verzamelen. Als het te kweken Monster zich op een wattenstaafje bevindt, rol het wattenstaafje dan over een klein gedeelte van het agar-oppervlak., Streak voor isolatie met een steriele lus. Incubeer platen aerobisch bij 35-37ºC gedurende 24-48 uur. Onderzoek koloniale morfologie.
interpretatie van de resultaten
Mannitolfermentoren zoals S. aureus verschijnen als gele kolonies met gele zones in de media. Niet-mannitolfermentoren zoals S. epidermidis hebben, indien aanwezig, helderroze tot rode kolonies zonder gele kleurverandering in het medium. Raadpleeg de vermelde referenties voor de identificatie van de morfologie van de kolonie en verdere biochemische tests die nodig zijn voor de identificatie.,(1,2,4,7)
beperkingen
De meeste andere organismen dan stafylokokken worden geremd door de hoge zoutconcentratie die wordt aangetroffen in Mannitolzout-Agar, met uitzondering van enkele halofillische mariene organismen.
benodigd maar niet geleverd materiaal
standaard microbiologische benodigdheden en apparatuur zoals lussen, swabs, applicatorsticks, andere kweekmedia, verbrandingsovens, incubatoren, enz., evenals serologische en biochemische reagentia, worden niet verstrekt.,
QUALITY CONTROL
Test Organisms | Inoculation Method* | Incubation | Results | |||
Time | Temperature | Atmosphere | ||||
Mannitol Salt Agar (Cat. no., J330): | ||||||
Staphylococcus aureus ATCC® 6538 |
J | 18hr | 35°C | Aerobic | Growth; yellow colonies and media at 18-24 hours | |
Escherichia coli ** ATCC® 8739 |
B | 72hrs | 35°C | Aerobic | Partial to complete inhibition | |
Mannitol Salt Agar (Cat. no.,”>Aerobic | Partial to complete inhibition | |||||
Escherichia coli ATCC® 8739 |
A | 72hr | 30-35°C | Aerobic | Partial to complete inhibition |
USER QUALITY CONTROL
Physical Appearance
Mannitol Salt Agar (MSA) should appear clear, slightly opalescent, and pinkish-red in color.,
Staphylococcus aureus (ATCC® 25923) kolonies groeien op Mannitolzout Agar. Gedurende 48 uur aeroob geïncubeerd bij 35ºC.
Proteus mirabilis (ATCC® 12453) groei geremd op Mannitolzout Agar. Gedurende 48 uur aeroob geïncubeerd bij 35ºC.
2. Tille, P. Bailey en Scott ‘ s diagnostische Microbiologie, C. V. Mosby Company, St. Louis, MO.
3. Chapman, G. H. 1945. J. Bacteriol.; 50:201.
4. Isenberg, H. D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol., I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, D. C.
5. Koch, F. E. 1942. Zentr. Bakt. Labt. Orig.; 149:122.
7. Jorgensen, J. H., et al. 2015. Manual of Clinical Microbiology, 11th ed. American Society for Microbiology, Washington, D. C.
8. Kwaliteitsborging voor commercieel bereide microbiologische kweekmedia, M22. Clinical and LaboratoryStandards Institute (CLSI-voorheen NCCLS), Wayne, PA.
9. American Public Health Association. 1993. Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 16th ed. APHA, Washington, D.,C.
10. APHA Technisch Comité voor microbiologische methoden voor levensmiddelen. 2001. Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 4e ed. APHA, Washington, D. C.
ATCC is een geregistreerd handelsmerk van de American Type Culture Collection.
IFU-10553
Geef een reactie