E. Coli onder de microscoop Types, Techniques, Gramkleur en Hanging Drop Method

Introduction (E. Coli)

algemeen aangeduid als E. coli, Escherichia coli is een bacterie die istypisch wordt aangetroffen in een aantal omgevingen, waaronder verschillende voedingsmiddelen, bodem en dierlijke darmen. E. coli is zeer divers en behoort tot de genusEscherichia., Terwijl de meeste stammen onschadelijk zijn (en ook belangrijk in het menselijke darmkanaal), zijn anderen schadelijk en kunnen zeer ernstige gevolgen hebben voor de gezondheid. Een goed voorbeeld hiervan is E coli 0157: H7.,v>

Afgezien van voedselvergiftiging die causediarrhea en andere problemen in de spijsvertering, schadelijke stammen van E colican leiden tot de volgende gezondheidsproblemen;

• Infectie van de urinarytract
• Longontsteking
• ademhalingsziekte

In het darmkanaal, E coli speelt animportant rol in dat het helpt bij de spijsvertering en ondersteunt de opname ofvital vitaminen uit de voeding in het lichaam., In addition, it has been shown to bebeneficial in that it prevents the growth and proliferation of other harmfulspecies of bacteria that would otherwise cause health problems.

Main Category of Pathogenic (Diarrheagenic) E. Coli.

• Shiga toxin-producing Ecoli (STEC)
• Enterotoxigenic E coli(ETEC)
• Enteropathogenic E coli(EPEC)
• Enteroaggregative E., coli(EGA)
• Enteroinvasieve E coli(EIEC)
• Diffusely adherent E coli(DAEC)

Gram Stain

E. coli wordt beschreven als een Gram-negativebacterium. Dit komt omdat ze negatief vlekken met behulp van de Gramstain.

De Gramkleur is een differentiële techniek die algemeen wordt gebruikt voor het classificeren van bacteriën. De kleuringtechniek maakt onderscheid tussen twee hoofdtypen bacteriën (grampositieve en gramnegatieve) door kleur op de cellen te geven.,

omdat E. coli Gram-negatieve bacteriën is,heeft het een extra buitenmembraan dat bestaat uit fosfolipiden en lipopolysacchariden. De aanwezigheid lipopolysacchariden op het buitenmembraan van bacteriën geeft het een algemene negatieve last aan de celwand. Door deze eigenschappen behoudt E. coli tijdens het gramkleuringsproces geen kristalviolet.

zie pagina waarin Gram-positieve en Gram-negatieve bacteriën

E worden uitgelegd., Coli microscopie

om te bepalen of een stam(stammen) aanwezig is in een monster, is het noodzakelijk het monster te bevlekken. Hier, wordt de Gramkleur gebruikt aangezien het helpt onderscheid te maken tussen de grampositieve en gramnegative bacteriën in een steekproef.

omdat Gramkleur een differentiële vlek is,is Gramkleur complexer dan eenvoudige vlekken zoals methyleen blue.As dergelijke, meer dan één vlek wordt gebruikt om de cellulaire componenten te differentiëren.,

For this technique, 3 different stains are used.These include:

• Crystal violet
• Iodine
• Safranin

Requirements

• Microscope glass slide
• A collecting wire loop
• A heater (Burner)
• Sample (E., Coli Cultuur)
• Gedestilleerd water
• gramkleuring (Crystal violet,Jodium vlekken en Carbol Fuschin)
• Alcohol

Uitstrijkje Voorbereiding

• Vóór het scheppen van de steekproef,verwarm de draad een lus en laat afkoelen (om steriele).
• gebruik de draadlus en plaats de bouillon cultuur op een schone, steriele dia.,
• Voorzichtig verspreiding van de inoculumto ongeveer een centimeter in diameter (het verspreiden van het monster op de dia)
• Voor plaat culturen (ofbacteria) gebruik een steriele draad loop te laten vallen zoutoplossing in het midden/midden van de dia
• met Behulp van een andere steriele wireloop (warmte en afgekoeld) schep een kleine hoeveelheid van het monster en roer af druppel water in de vorm van een emulsie

Vaststelling

Hier wordt de warmte gebruikt voor de bevestiging., De warmtebevestigingsprocedure omvat de volgende stappen:

• aan de lucht drogen de dia voor het smeren te drogen
• laat de dia door de vlam een paar keer (2 of 3 keer) smeren kant omhoog

* vermijd tijdens het vastzetten van de warmte oververhitting van de dia.,d=”448ac82572″>

Gram Kleuring

• Plaats de schuif op astaining rek en vloed het uitstrijkje met crystal violet voor ongeveer een minuut
• Een beetje tilt de dia andrinse met water (gedestilleerd of leidingwater) voorzichtig – het Vermijden van ongeveer wassen theslide
• Overstroming van het monster met iodineand laat de dia staan voor ongeveer 1 minuut
• Iets tilt de slideagain en spoel met behulp van tik ordistilled water (voorzichtig).,
• Tilt u de schuif en decolorize met 95% ethylalcohol/aceton – decolorizing moet worden gedaan door het toepassen van de alcohol in dropsfor ongeveer 8 seconden
• Spoelen met water zachtjes
• Dep de dia droge
• Plaats de dia onmicroscope en bekijk de voorbeeld

Wanneer ze worden bekeken onder de microscoop, Gram-negativeE. Coli zal roze van kleur lijken., De afwezigheid hiervan (van paarse kleur) isindicatief voor Grampositieve bacteriën en de afwezigheid van gramnegatieve E. Coli.

Ophangdruppelmethode

de ophangdruppelmethode verwijst naar een techniek die helpt bij het onderzoeken van kleine, levende en onbevlekte organismen. Het kan worden gebruikt voor dergelijke beweeglijke bacteriën als Ps. fluorescenen en E. coli.,

het gebruik van de ophangdruppeltechniek is ook van groot belang, omdat het helpt een onderscheid te maken tussen Bruin-beweging (de beweging van deeltjes die in een vloeistof zweven) en de beweeglijkheid van micro-organismen., loop,voorzichtig een loopful van de bouillon op naar het midden van de glazen deksel slip

om Te bepalen of de bacteriën isreally bewegen, het is belangrijk om ervoor te zorgen dat het beweegt in differentdirections en van positie te veranderen., Dit onderscheidt de beweeglijkheid van het organisme van louter Brownse beweging.

zie ook: bacteriën onder de microscoop, zie eubacteriënpagina, meer informatie over coliformen, Microscopiecultuur en gevoeligheid

Return To microscope experiments, brightfield microscopy and microscope objectives preparation

return from E., Coli onder de microscoop naar MicroscopeMaster Home