een vrouwelijke patiënt, 30 jaar oud, werd in februari 2017 opgenomen in de afdeling en Kliniek van allergologie, Klinische Immunologie en interne ziekten vanwege terugkerende allergische reacties na consumptie van verschillende voedingsmiddelen.
deze reacties waren voornamelijk dermaal, in de vorm van urticaria op het hele lichaam., Symptomen van terugkerende, gegeneraliseerde urticaria werden ervaren na het innemen van verschillende bijzonder complexe gerechten met veel verschillende ingrediënten. De patiënt geassocieerd deze symptomen met de consumptie van paprika ‘ s, clementines, boekweit honing, en rode wijn.
de ernstigste allergische reactie in het leven van de patiënt trad op na het eten van een mangofruit. Binnen enkele minuten ontwikkelde de patiënt een gegeneraliseerde urticaria, gevolgd door gezichtsoedeem, sterke maagpijn en waterige diarree. Er werden paramedici gebeld. De patiënt kreeg adrenaline, steroïden en antihistaminica toegediend.,
een gedetailleerde medische voorgeschiedenis toonde aan dat de patiënt gedurende de voorgaande 6 jaar symptomen had van seizoensgebonden rhinitis (traanvorming, jeukende oogleden en waterige loopneus).
de patiënt werd op dat moment ook behandeld met levothyroxine voor hypothyreoïdie. De familiegeschiedenis van de patiënt wordt beladen met allergische ziekten: de moeder van de patiënt is allergisch voor inhalatoire allergenen, en haar vader voor berk en kat.
in dit complexe geval vereiste de diagnose een breed scala aan diagnostische methoden., Als onderdeel van de diagnostiek wordt uitgevoerd in de Afdeling en de Kliniek van Allergologie, Klinische Immunologie en Interne Ziekten, de patiënt had skin prik test met een set van sprayvorm allergenen (Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides pteronyssinus, gras/granen, onkruid, Aspergillus fumigatus, Cladosporium herbarum, kat de vacht, populier, hazelaar, els, berk, bijvoet, smalle weegbree) en voedselallergenen (kip, ei, koemelk, tomaat, karper, banaan, rogge meel, meel van tarwe, pinda ‘ s, hazelnoten, varkensvlees, kippenvlees, orange) van Allergopharma-Nexter Sp. z o. o. (Ltd.,) , evenals inheemse huidtesten met vers voedsel (boekweithoning, paprika, mango, clementine, wortel, selderij, pinda ‘ s, banaan, mosterd, kurkuma, karwij, rode wijn).,vels van de IgE specifiek voor gekozen allergenen (bijvoet, alsem, begin van de gras-mix, laat gras-mix, selderij, paprika, wortel, mango, banaan, perzik, appel, pinda ‘ s, hazelnoten, Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, vroeg bomen mix, laat bomen mix, berk, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, Alternaria tenius, koemelk-eiwit, kruiden mix, mosterd) werden bepaald met de ImmunoCap (ThermoFisher Wetenschappelijke, Uppsala, Zweden) systeem, met behulp van de Phadia100 apparatuur volgens de instructies van de fabrikant (ImmunoCAP specifieke IgE, fluoroenzymeimmunoassay, 52-5291-NL/05).,
de diagnostiek werd uitgebreid door een bepaling van het niveau van IgE specifiek voor allergeenbestanddelen, met behulp van de ImmunoCap Isac-methode.
elk van deze tests heeft een andere specificiteit en gevoeligheid en, niet minder belangrijk, beschikbaarheid en kosten. De tests van de huidprik worden beschouwd als een snelle, goedkope methode met onmiddellijke resultaten. Helaas is hun detectiepercentage bij voedselallergie beperkt. In een recent artikel van Griffiths et al. de detectiepercentages voor SPTs (53%) en ISAC (59%) waren vergelijkbaar, met een hoger detectiepercentage voor ImmunoCAP-tests (66%)., Bij patiënten met notenallergieën scoorden tests voor sensibilisatie voor noten op dezelfde manier, maar met een grotere gevoeligheid (71%) voor ImmunoCAP-tests dan SPT (53%) of ISAC (65%). Daarom hebben we de diagnose in dit geval uitgebreid tot in vitro bepaling van de concentratie van allergeenspecifieke IgE. De gouden standaard in diagnose van voedselallergie is nog steeds de dubbelblinde placebo gecontroleerde voedseluitdaging. In dit geval gaf de patiënt geen toestemming voor provocatieuitdagingen.,
de huidpriktest was positief voor de volgende allergeenextracten (gemiddelde whealdiameter in millimeter): gras 7 mm; onkruid: 8 mm; kattenbont: 5 mm; Bijvoet: 6 mm; ribwort weegbree: 4 mm; selderij: 2 mm; clementine: 2 mm (histamine 4 mm, negatieve controle 0 mm, een resultaat werd als positief geïnterpreteerd in het geval van een wheal gemiddelde diameter ≥ 3 mm). Er werd geen huidreactie waargenomen bij andere geteste allergeenextracten. Het totale IgE-gehalte was 406,53 kU / L.
de resultaten van native tests waren positief voor mango 5 mm, selderij 3 mm.,
resultaten voor specifieke IgE-spiegels die met de ImmunoCap-methode zijn getest, worden weergegeven in Tabel 1. Verhoogde niveaus van IgE (boven 0,35 kU/ L) werden gevonden tegen Bijvoet, alsem, vroege grasmix, late grasmix, selderij, paprika, wortel, mango, banaan, perzik, appel, pinda ‘ s.
nadat de patiënt uit het ziekenhuis was ontslagen, ontvingen we resultaten van de IMMUNOCAP Isac-tests (Tabel 2)., Een hoog niveau van IgE specifiek voor Art v 1 (defensin) van Bijvoet en Phl p 1 van Timoteüs was bijzonder opmerkelijk. Het is de moeite waard om te benadrukken dat er geen verhoogde niveaus van IgE specifiek voor componenten van voedselallergenen beschikbaar waren in ImmunoCap ISAC. Het is mogelijk dat de symptomen van OAS bij deze patiënt het gevolg zijn van kruisreactiviteit met timothy en bijvoetallergenen. Symptomen van urticaria kunnen ook het gevolg zijn van gevoeligheid voor een van de voedselallergenen hierboven vermeld., De enige anafylactische reactie in het patiëntenleven kwam na de consumptie van mango voor, en deze overgevoeligheid was degene die, besloten we, verdere diagnose vereiste.
Hier moet duidelijk worden vermeld dat de ImmunoCap Isac-test niet aangaf of in dat specifieke geval de allergie van de patiënt voor mango het resultaat was van een kruisallergie met Art v 1, of een allergie voor een ander molecuul, onafhankelijk van bijvoet. ImmunoCap ISAC heeft geen mango allergene componenten beschikbaar.
om dit te verduidelijken werd vervolgens de immunocap-inhibitietest toegepast, waarbij gebruik werd gemaakt van het allergeenextract uit verse mangofruit., Het onderzoek was gebaseerd op het SPHIA-model (single Point highly Inhibition Achievable Assay), beschreven door Bernardi et al. in 2011 .
de methodologie van deze inhibitietest wordt nog steeds als experimenteel beschouwd, hoewel soortgelijke inhibitietesten eerder door verschillende auteurs werden toegepast. In onze onderzoekseenheid werd bijvoorbeeld een geval beschreven van een patiënt die allergisch is voor zonnebloempitten, waarbij ImmunoCap Isac inhibitietest werd gebruikt om kruisreactiviteit te bewijzen. In de inhibitietest werden Art v 1, Art v 3 en Jug r 3 geremd door het eiwit dat aanwezig is in het zonnebloemzaad-allergeenextract .,
om de remmingstest uit te voeren, werd een rijpe mangofruit gekocht in een lokale kruidenier die eco-voedsel aanbiedt. Het fruit werd gewassen, geschild en de put werd verwijderd om het eetbare deel te verkrijgen. Het eiwithoudende pulpextract werd verkregen met behulp van eerder beschreven methoden . In blokjes gesneden fruit werd ingevroren in vloeibare stikstof en gemengd tot gladde pulp. De pulp werd vervolgens gemengd met 1 M NaCl in de verhouding 2:1 (2:1, v/v) en gedurende 24 uur bij 2-8 °C bewaard. daarna werd het mengsel 60 minuten bij kamertemperatuur bij 12.000×g gecentrifugeerd. Het extract werd verkregen met 2,35 mg / dL eiwit., In de inhibitietest werd het verkregen extract gemengd met het bloedserum van de patiënt in de volumeverhouding van 1:1 en gedurende 24 uur geïncubeerd bij 2-8 °C . Tegelijkertijd werd een blind Monster bereid om rekening te houden met de verdunning van het serum. Daartoe werd het bloedserum van de patiënt gemengd met 1 M NaCl (1:1, v/v), en vervolgens geïncubeerd bij 2-8 °C gedurende 24 uur. na die tijd werd het niveau van IgE specifiek voor Bijvoet, Art v1 en mango bepaald in het bereide materiaal, zowel geremd als verdund, en de inhibitieverhouding werd berekend.,
In de remming test hebben we de volgende resultaten bereikt—de uitgangssituatie van bijvoet sIgE in het serum van de patiënt was 144.32 kU/L. In het jaloezie-monster, na verdunnen met 1 M NaCl 1:1, de concentratie van sIgE was 72.16 kU/L. Na incubatie van het serum van de patiënt met een mango allergeen-extract het niveau van bijvoet IgE was 48.81 kU/L. Het is dus aangetoond dat de mango allergeen-extract geremd de binding van bijvoet IgE door 32.38%.
het baseline niveau van Art v 1 sIgE in het serum van de patiënt was 99,8 kU / l., In het blinde monster, na verdunning met 1 M NaCl 1:1, was de concentratie sIgE 49,9 kU/L.na incubatie van het serum van de patiënt met het mangoallergeenextract was het niveau van Art v 1 IgE 35,2 kU/L. zo werd aangetoond dat het mangoallergeenextract de binding van IgE Art v 1 met 29,5% remde. Op basis van de uitgevoerde diagnostische procedures werd aangetoond dat de symptomen die aanwezig zijn bij de patiënt het resultaat kunnen zijn van een kruisreactie tussen allergenen van mango en Art v 1. De resultaten van de inhibitietest zijn weergegeven in Fig. 1.
resultaten van de inhibitietest met mango-extract
vanwege het feit dat deze inhibitietest een experimentele methode was en het eerder beschreven protocol werd aangepast aan de behoeften van dit specifieke geval; een inhibitietest volgens een ander protocol werd uitgevoerd om een definitieve bevestiging van de kruisallergie te verstrekken. Het serum van de patiënt werd geïncubeerd met het allergeenextract uit een mangofruit, met behulp van de Immunocapmatrix., De ImmunoCap werd vier keer voorgewassen: twee keer met de wash worksolution ImmunoCap en twee keer met de neutrale pH-fosfaatbuffer. 50 µL getest serum werd toegevoegd aan de op die manier bereide ImmunoCap, geïncubeerd gedurende 1 uur bij kamertemperatuur en vervolgens gecentrifugeerd bij 1500×g gedurende 2 minuten. Het verkregen antilichaamdepletieserum en het native serum werden met behulp van de ImmunoCap-methode geanalyseerd op de aanwezigheid van de allergeencomponent Art v 1.
het baseline niveau van Art v 1 sIgE bij patiënten serum was 99,8 kU / l., In dit geval was het serum van de patiënt niet verdund, dus negatieve controle was niet nodig. Na incubatie van het serum van de patiënt met een ImmunoCap mango matrix was het niveau van Art v 1 IgE 56,5 kU/L. als gevolg hiervan werd aangetoond dat de ImmunoCap mango matrix de binding van Art v 1 IgE met 43,4% remde. Deze resultaten zijn weergegeven in Fig. 2.
resultaten van de remming met het mango-allergeen op de Immunocapmatrix
Geef een reactie