Per utilizzare l’emocitometro, assicurarsi innanzitutto che lo speciale coprioggetto fornito con la camera di conteggio sia posizionato correttamente sulla superficie della camera di conteggio. Quando le due superfici di vetro sono in contatto corretto anelli di Newton possono essere osservati. In tal caso, la sospensione cellulare viene applicata sul bordo del coprioggetto per essere aspirata nel vuoto mediante azione capillare che riempie completamente la camera con il campione. Il numero di cellule nella camera può essere determinato dal conteggio diretto utilizzando un microscopio e le cellule visivamente distinguibili possono essere contate in modo differenziato., Il numero di cellule nella camera viene utilizzato per calcolare la concentrazione o la densità delle cellule nella miscela da cui proviene il campione. È il numero di celle nella camera diviso per il volume della camera, che è noto fin dall’inizio, tenendo conto di eventuali diluizioni e contando le scorciatoie:
dove il volume del campione diluito (dopo diluizione) diviso per il volume della miscela originale nel campione (prima della diluizione) è il fattore di diluizione., Ad esempio, se il volume della miscela originale era 20µL ed è stato diluito una volta (aggiungendo diluente 20µL), il secondo termine tra parentesi è 40µL/20µL. Il volume dei quadrati contati è quello mostrato nella tabella in alto, a seconda delle dimensioni (vedi figura a destra). Il numero di celle contate è la somma di tutte le celle contate attraverso i quadrati in una camera. La proporzione delle celle contate si applica se non vengono contati tutti i quadrati interni all’interno di un quadrato impostato (cioè, se vengono contati solo 4 dei 20 in un quadrato d’angolo, allora questo termine sarà uguale a 0.2).,
Le parti dell’emocitometro (viste di lato) sono identificate.
Per la maggior parte delle applicazioni, vengono utilizzati solo i quattro grandi quadrati angolari. Le celle che si trovano o toccano le linee superiore e sinistra vengono contate, ma quelle che si trovano o toccano le linee destra o inferiore vengono ignorate.
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