E. Coli sotto il Microscopio Tipi, Tecniche di colorazione di Gram e Appeso Metodo di rilascio

Introduzione (E. Coli)

Comunemente indicato come E. coli, il batterio Escherichia coli è un batterio che istypically trovato in un certo numero di ambienti, tra cui vari alimenti, suolo andanimal intestino. E. coli è molto vario e appartiene al generEscherichia., Mentre la maggior parte dei ceppi sono innocui (e alsoimportant nel tratto intestinale umano), altri sono dannosi e possono causare implicazioni di salute veryserious. Un buon esempio di questo è E coli 0157: H7.,v>

a parte intossicazione alimentare che può causediarrhea e altri problemi nel sistema digestivo, dannoso ceppi di E colican causare i seguenti problemi di salute;

• Infezione del urinarytract
• Polmonite
• malattia Respiratoria

Nel tratto intestinale, E coli svolge animportant ruolo che aiuta nella digestione e supporta l’assorbimento ofvital vitamine dal cibo nel corpo., In addition, it has been shown to bebeneficial in that it prevents the growth and proliferation of other harmfulspecies of bacteria that would otherwise cause health problems.

Main Category of Pathogenic (Diarrheagenic) E. Coli.

• Shiga toxin-producing Ecoli (STEC)
• Enterotoxigenic E coli(ETEC)
• Enteropathogenic E coli(EPEC)
• Enteroaggregative E., coli(CEEA)
• E coli enteroinvasivo(EIEC)
• E coli diffusamente aderente(DAEC)

Gram Stain

E. coli è descritto come un gram-negativobatterio. Questo perché si macchiano di negativo usando il Gramstain.

La macchia di gram è una tecnica differenziale cheè comunemente usato ai fini della classificazione dei batteri. La tecnica di colorazione distingue tra due tipi principali di batteri (gram positivi e gram negativi) conferendo colore alle cellule.,

Essendo batteri Gram-negativi,E. coli hanno una membrana esterna aggiuntiva composta da fosfolipidi elipopolisaccaridi. La presenza di lipopolisaccaridi sulla membrana esterna dibatteri dà una carica negativa complessiva alla parete cellulare. A causa di theseproperties, E. coli non trattiene il viola cristallino durante il Gram stainingprocess.

Vedere la pagina che spiega i batteri Gram positivi e Gram negativi

E., Coli Microscopia

Per determinare se un ceppo(s) ispresent in un campione, è necessario macchiare il campione. Qui, Gram macchia isused come aiuta a distinguere tra i batteri gram positivi e gramnegative in un campione.

Essendo una macchia differenziale, la macchia di gram è più complessa rispetto a macchie più semplici come il metilene blue.As tale, più di una macchia viene utilizzata allo scopo di differenziare i suoi componenti cellulari.,

For this technique, 3 different stains are used.These include:

• Crystal violet
• Iodine
• Safranin

Requirements

• Microscope glass slide
• A collecting wire loop
• A heater (Burner)
• Sample (E., Coli Cultura)
• acqua Distillata
• colorazione di Gram (Crystal violet,Iodio macchia e Carbol Fuschin)
• Alcol

Striscio Preparazione

• Prima di scavare il campione,scaldare il filo loop e permettere il raffreddamento (per rendere sterile).
• Utilizzando l’anello di filo, scoopand posizionare la coltura di brodo su un vetrino pulito e sterile.,
• spalmare Delicatamente la inoculumto di circa un centimetro di diametro (a diffondere il campione sul vetrino)
• Per la piastra di culture (ofbacteria) utilizzare una sterile anello di filo alla goccia di soluzione fisiologica a medio/centro della diapositiva
• Utilizzando un altro sterile wireloop (calore e lasciato raffreddare) scoop una piccola quantità di campione e mescolare onthe goccia di acqua per formare un’emulsione

Fissaggio

Qui, il calore viene utilizzato per il fissaggio., Il calore di fissaggio procedura prevede i seguenti passaggi:

• asciugare il vetrino per striscio a secco
• Passare alla diapositiva attraverso la fiamma di un paio di volte (2 o 3 volte) striscio sul lato

* Durante il calore di fissaggio, evitare il surriscaldamento della diapositiva.,d=”448ac82572″>

Gram Colorazione

• Posizionare il cursore su astaining rack e di inondazione di striscio con cristallo viola per circa un minuto
• Inclinare leggermente il vetrino andrinse con acqua (distillata o acqua del rubinetto) delicatamente – Evitare circa il lavaggio theslide
• Alluvione del campione con iodineand lasciar riposare per circa 1 minuto
• inclinare Leggermente il slideagain e risciacquare con tap ordistilled acqua (delicatamente).,
• Inclinazione della slitta e decolorare con il 95% ethylalcohol/acetone – decolorante dovrebbe essere fatto applicando l’alcol in dropsfor circa 8 secondi
• Sciacquare con acqua delicatamente
• Asciugare il vetrino lavaggio
• Posizionare il cursore onmicroscope e visualizzare le di esempio

se visti al microscopio, Gram-negativeE. Coli apparirà di colore rosa., L’assenza di questo (di colore viola) èindicativa di batteri Gram-positivi e assenza di E. Coli Gram-negativi.

Hanging Drop Method

Il metodo hanging drop si riferisce a una tecnica che aiuta a esaminare piccoli organismi viventi e non colorati. Può essere usato per tali batteri mobili come Ps. fluorescens ed E. coli.,

L’utilizzo della tecnica a goccia sospesa è anche molto importante dato che aiuta a distinguere tra il movimento browniano (il movimento delle particelle sospese in un fluido) e la motilità dei microrganismi., loop,posizionare con cura un loopful di brodo al centro del coperchio di vetro antiscivolo

Per determinare se i batteri isreally in movimento, è importante garantire che si muove in differentdirections e cambiare posizione., Questo differenzia la motilità dell’organismoda semplice moto browniano.

Vedi Anche: Batteri al Microscopio, Vedere Eubatteri pagina, Imparare di più su di Coliformi, Microscopio, la Cultura e la Sensibilità

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