a sejtekben és a laborban a ligázoknak nevezett enzimeket használják a DNS-fragmensek összekapcsolására. Csak a megfelelő, kiegészítő végekkel rendelkező DNS-fragmentumokat lehet összekapcsolni ligálással.
hogyan működnek a ligázok?
a Ligázok összekapcsolják a DNS fragmenseit a szomszédos nukleotidok közötti kötések képződésének katalizálásával.,
Ligatúrát a sejtek
a Sejtek természetes módon elvégezni lekötésével során a DNS replikáció, amikor a Okazaki fragmentumok kapcsoltak össze. A sejtek ligációt is használnak a sérült DNS javítására, akár normál sejt anyagcserével, akár környezeti tényezőkkel, például UV-fénnyel vagy sugárzással. Naponta legfeljebb 1 millió törés fordulhat elő egyetlen emberi sejt DNS-ében.,
ligálás a laborban
ahhoz, hogy a DNS-ligálás a laborban megtörténjen, a reakciókeveréknek tartalmaznia kell: komplementer DNS-fragmenseket, ligasebuffert és energiaforrást. Ennek a reakciónak az energiája általában ATP (adenozin-trifoszfát) nevű vegyi anyagból származik.
A DNS-fragmensek
a DNS-t ligálásra készítik úgy, hogy a restrikciós enzimekkel fragmensekre vágják. Minden restrikciós enzim levágja a DNS-t egy adott helyen, és olyan fragmenseket hoz létre, amelyeknek “tompa” vagy “ragadós” végük van.,
A DNS-fragmensek
Ligázok bármilyen “tompa” végű DNS-fragmentumhoz csatlakozhatnak. A “ragadós” végekkel rendelkező DNS-fragmensekhez is csatlakozhatnak, de csak akkor, ha a szálak nukleotidjai kiegészítik egymást. A kiegészítő “ragacsos végek” eléréséhez az összekapcsolandó DNS-fragmenseket ugyanazzal a restrikciós enzimmel kell vágni.
Vélemény, hozzászólás?