A női türelmes, 30 éves, felvették a február 2017, hogy a Tanszék, illetve Klinika Allergology, Klinikai Immunológia, valamint a Belső Betegségek, mert a visszatérő allergiás reakciók következő fogyasztás a különböző élelmiszerek.

ezek a reakciók nagyrészt dermálisak voltak, urticaria formájában az egész testen., A visszatérő, generalizált urticaria tüneteit különböző, különösen összetett ételek elfogyasztása után tapasztalták, amelyek sok különböző összetevőt tartalmaznak. A beteg ezeket a tüneteket a paprika, a klementin, a hajdina méz és a vörösbor fogyasztásával társította.

a beteg életében a legsúlyosabb allergiás reakció mangó gyümölcs fogyasztása után következett be. Néhány percen belül a betegnél generalizált urticaria alakult ki, amelyet arcödéma, erős gyomorfájdalom és vizes hasmenés követett. Mentőket hívtak. A betegnek adrenalint, szteroidokat és antihisztaminokat adtak.,

a részletes kórtörténet azt mutatta, hogy az elmúlt 6 évben a betegnek szezonális rhinitis tünetei voltak (könnyezés, viszkető szemhéjak és vizes orrváladék).

az akkori beteget levotiroxinnal is kezelték hypothyreosis miatt. A beteg családi kórtörténetében allergiás betegség szerepel: a beteg anyja allergiás az inhalációs allergénekre,apja pedig a nyír és a macska.

ebben a komplex esetben a diagnózis a diagnosztikai módszerek széles skáláját igényelte., Az allergológiai, Klinikai Immunológiai és belső betegségek osztályán és Klinikáján végzett diagnosztika részeként a páciensnek bőrszúrás-tesztjei voltak inhalációs allergének (Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides pteronyssinus, Fű/gabonafélék, gyomok, Aspergillus fumigatus, Cladosporium herbarum, macska szőrme, nyár, mogyoró, éger, nyír, mugwort, ribwort útifű) és élelmiszer allergének (csirke tojás, tehéntej, paradicsom, ponty, banán, rozsliszt, búzaliszt, földimogyoró, mogyoró, mogyoró, sertéshús, csirkehús, narancs) Allergopharma-Nexter SP. z o. o. (Ltd.,), valamint a natív bőrpróbák friss ételekkel (hajdina méz, paprika, mangó, klementin, sárgarépa, zeller, földimogyoró, banán, mustár, kurkuma, kömény, vörösbor).,vels az IgE konkrét kiválasztott allergének (fekete üröm, üröm, korai fű mix, késő fű mix, zeller, paprika, sárgarépa, mangó, banán, barack, alma, mogyoró, mogyoró, Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, korai fák, mix, késő fák mix, nyír, Cladosporium herbarum, az Aspergillus fumigatus, Alternaria tenius, tehéntej fehérje -, fűszer keverék, mustár) határozták meg a ImmunoCap (ThermoFisher Tudományos, Uppsala, Svédország) rendszer, használja a Phadia100 berendezés szerint a gyártó utasításait (ImmunoCAP jellemző IgE, fluoroenzymeimmunoassay, 52-5291-HU/05).,

a diagnosztikát az allergén komponensekre specifikus IgE szintjének meghatározásával bővítették az ImmunoCap ISAC módszerrel.

mindegyik tesztnek eltérő a specifikussága és érzékenysége, és nem kevésbé fontos a rendelkezésre állás és a költségek. A bőrszúrás-teszteket gyors, olcsó módszernek tekintik, azonnali eredményekkel. Sajnos az élelmiszer-allergia kimutatási aránya korlátozott. Egy nemrégiben megjelent cikkben Griffiths et al. az SPT-k (53%) és az ISAC (59%) kimutatási aránya hasonló volt, az Immunokap-vizsgálatok esetében magasabb volt a kimutatási arány (66%)., Dió allergiában szenvedő betegeknél a diófélékre való szenzibilizáció tesztjei hasonlóan pontoztak, de nagyobb érzékenységgel (71%) Az ImmunoCAP teszteknél, mint az SPT (53%) vagy az ISAC (65%). Ezért ebben az esetben kiterjesztettük a diagnózist az allergénspecifikus IgE koncentrációjának in vitro meghatározására. Az élelmiszerallergia diagnózisában az arany standard továbbra is a kettős vak, placebo-kontrollos élelmiszer-kihívás. Ebben az esetben a beteg nem járult hozzá a provokációs kihívásokhoz.,

Bőr prick teszt pozitív volt a következő allergén kivonatok (wheal átlagos átmérője mm-ben): fű, 7 mm; gyomok: 8 mm; macska bundája: 5 mm; fekete üröm: 6 mm; ribwort útifű: 4 mm; zeller: 2 mm; clementine: 2 mm (hisztamin, 4 mm-es, negatív kontroll 0 mm, eredmény értelmezhető úgy, mint a pozitív esetén wheal átlagos átmérője legalább 3 mm). Más vizsgált allergén kivonatok esetében nem figyeltek meg bőrreakciót. A teljes IgE szint 406,53 kU/L.

a natív tesztek eredményei pozitívak voltak a mangó 5 mm-re, a zeller 3 mm-re.,

az ImmunoCap módszerrel vizsgált specifikus IgE-szintek eredményeit az 1. táblázat tartalmazza. Magas szintű IgE (felett 0,35 kU/L) találtak ellen mugwort, üröm, korai fű mix, késő fű mix, zeller, paprika, sárgarépa, mangó, banán, őszibarack, Alma, földimogyoró.

1.táblázat az ImmunoCap módszerrel vizsgált speciális IgE-szintek eredményeinek listája

miután a beteget a kórházból kiengedték, megkaptuk az ImmunoCap ISAC-tesztek eredményeit (2. táblázat)., Különösen figyelemre méltó volt a mugwortból származó V 1.Cikk (defenzin) és a Timóteuszból származó Phl p 1 magas szintű IgE. Érdemes hangsúlyozni, hogy az ImmunoCAP ISAC-ban rendelkezésre álló élelmiszer-allergének összetevőire jellemző IgE-szint nem emelkedett. Lehetséges, hogy az OAS tünetei ebben a betegben a timothy és a mugwort allergénekkel való keresztreaktivitásból adódtak. A csalánkiütés tünetei a fent említett élelmiszer-allergének egyikére való érzékenységből is eredhetnek., Az egyetlen anafilaxiás reakció a betegek életében a mangó fogyasztása után következett be, és ez a túlérzékenység volt az, amelyről úgy döntöttünk, hogy további diagnózist igényel.

2.táblázat ImmunoCap ISAC vizsgálati eredmények., Nincs megnövekedett szintje allergén-specifikus IgE találtak más allergén összetevőket tartalmazza a ImmunoCap teszt

Itt egyértelműen ki kell mondani, hogy a ImmunoCap ISAC teszt nem jelzi, ha az adott esetben a beteg allergiás mangó eredménye volt, egy kereszt-allergia a Művészet v. 1, vagy allergia egy másik molekula független, fekete üröm. Az ImmunoCap ISAC nem tartalmaz mangó allergén összetevőket.

ennek tisztázása érdekében az ImmunoCap gátlási tesztet alkalmazták a friss mangó gyümölcs allergén kivonatának felhasználásával., A vizsgálat a Bernardi et al által leírt SPHIA modellen (egypontos legmagasabb gátlás) alapult. a 2011 .

ennek a gátlási vizsgálatnak a módszertana még mindig kísérletesnek tekinthető, bár több szerző korábban hasonló gátlási vizsgálatokat alkalmazott. Kutatási egységünkben például egy napraforgómagra allergiás beteg esetét írtuk le, ahol ImmunoCap ISAC gátlási tesztet alkalmaztak a keresztreaktivitás bizonyítására. Az Art V 1, Art V 3 és Jug r 3 gátlási tesztben a napraforgómag allergén kivonatában jelen lévő fehérje gátolta .,

a gátlási teszt elvégzéséhez érett mangó gyümölcsöt vásároltak egy helyi élelmiszerboltban, amely öko ételeket kínál. A gyümölcsöt megmosták, meghámozták, a gödröt pedig eltávolították, hogy megszerezzék az ehető részt. A fehérjetartalmú cellulóz kivonatot a korábban leírt módszerekkel állítottuk elő . A kockára vágott gyümölcsöt folyékony nitrogénben fagyasztották és sima péppé keverték. Ezután a pépet 1 m NaCl-lel 2:1 (2:1, v/v) arányban összekeverjük, majd 2-8 °C-on 24 órán át hagyjuk. ezután a keveréket szobahőmérsékleten 12 000×g-on 60 percig centrifugáltuk. A kivonatot 2,35 mg/dL fehérjét tartalmazó extraktumot kaptuk., A gátlási teszt során a kapott kivonatot 1: 1 térfogatarányban összekeverték a beteg vérszérumával, majd 2-8 °C-on 24 órán át inkubálták . Egyidejűleg vak mintát készítettek a szérum hígításának elszámolására. E célból a beteg szérum volt keverve 1 M NaCl (1:1, v/v), majd a lappangási idő 2-8 °C-24 h. Ez után a szint az IgE konkrét, a fekete üröm, a Művészet v1, meg mango határozták meg a már elkészített anyag, mind a gátolt meg hígított, a gátlás arány kiszámítása.,

a gátlás teszt elértük a következő eredmények—a kiindulási szintre, a fekete üröm sIgE a beteg szérum volt 144.32 kU/L. a vak minta után hígítva 1 M NaCl 1:1, a koncentráció, a sIgE volt 72.16 kU/L. inkubáció Után a beteg szérum egy mangó allergén kivonat a szintre, fekete üröm IgE volt 48.81 kU/l volt, így látható, hogy a mango allergén kivonat gátolja a kötelező fekete üröm az IgE által 32.38%.

Az Art V 1 sIgE kiindulási szintje a beteg szérumában 99, 8 kU / l volt., A vak mintában 1 m NaCl 1: 1 hígítás után a sIgE koncentrációja 49,9 kU/L. a beteg szérumának mangó allergén kivonattal történő inkubálása után az Art V 1 IgE szintje 35,2 kU / L. így kimutatták, hogy a mangó allergén kivonat gátolta az IgE Art V 1 kötődését 29,5% – kal. Az elvégzett diagnosztikai eljárások alapján bebizonyosodott, hogy a betegben jelen lévő tünetek a mangó és az Art V 1 allergének közötti keresztreakció következményei lehetnek. A gátlási vizsgálat eredményeit az 1. ábrán mutatjuk be. 1.

ábra., 1

Eredmények a gátlás teszt mangó kivonat

annak a ténynek köszönhetően, hogy ez a gátlás teszt volt egy kísérleti módszer a korábban leírt jegyzőkönyv módosított kísérő igényeit, ebben a konkrét ügyben, egy gátlás teszt alapján eltérő protokollt is végeztek annak érdekében, hogy egy végső megerősítést a kereszt-allergia. A beteg szérumát mangó gyümölcsből származó allergén kivonattal inkubáltuk az ImmunoCap mátrix segítségével., Az ImmunoCap-ot négyszer előmostuk: kétszer a mosási munkákkal oldjuk meg az ImmunoCap-ot, kétszer pedig a semleges pH-foszfát puffert. Az így elkészített Immunokaphoz 50 µL vizsgált szérumot adtak, majd szobahőmérsékleten 1 órán át inkubáltuk, majd 1500×g-on 2 percig centrifugáltuk. A kapott antitest-szegényített szérumot, valamint a natív szérumot az Art v 1 allergén komponens jelenlétére elemeztük ImmunoCap módszerrel.

az Art V 1 sIgE kiindulási szintje a betegek szérumában 99, 8 kU / l volt., Ebben az esetben a beteg szérumát nem hígították, így negatív kontrollra nem volt szükség. A beteg szérumának ImmunoCAP mango mátrixszal történő inkubálása után az Art V 1 IgE szintje 56,5 kU / L. ennek eredményeként kimutatták, hogy az ImmunoCap mango mátrix 43,4% – kal gátolta az Art V 1 IgE kötődését. Ezeket az eredményeket az ábra mutatja be. 2.

ábra. 2

az ImmunoCAP mátrixon a mangó allergénnel való gátlás eredménye