Hémocytomètre

pour utiliser l’hémocytomètre, assurez-vous d’abord que la lamelle spéciale fournie avec la chambre de comptage est correctement positionnée sur la surface de la chambre de comptage. Lorsque les deux surfaces de verre sont en contact approprié, les anneaux de Newton peuvent être observés. Si oui, la suspension cellulaire est appliquée sur le bord de la lamelle d’être aspiré dans le vide par action capillaire qui remplit complètement la chambre de l’échantillon. Le nombre de cellules dans la chambre peut être déterminé par comptage direct à l’aide d’un microscope, et les cellules visuellement distinguables peuvent être comptées de manière différentielle., Le nombre de cellules dans la chambre est utilisé pour calculer la concentration ou la densité des cellules dans le mélange d’où provient l’échantillon. C’est le nombre de cellules dans la chambre divisé par le volume de la chambre, qui est connu dès le départ, en tenant compte des dilutions éventuelles et des raccourcis de comptage:

où le volume de l’échantillon dilué (après dilution) divisé par le volume du mélange d’origine dans l’échantillon (avant dilution) est le facteur de dilution., Par exemple, si le volume du mélange original était de 20µl et qu’il a été dilué une fois (en ajoutant 20µl de diluant), alors le deuxième terme entre parenthèses est 40µL/20µl. Le volume des carrés comptés est celui indiqué dans le tableau en haut, en fonction de la taille (Voir figure de droite). Le nombre de cellules comptées est la somme de toutes les cellules comptées à travers les carrés dans une chambre. La proportion des cellules comptées s’applique si tous les carrés intérieurs d’un carré défini ne sont pas comptés (c’est-à-dire que si seulement 4 des 20 dans un carré d’angle sont comptés, alors ce terme sera égal à 0,2).,

pour la plupart des applications, les quatre grands carrés d’angle ne sont utilisés que. Les cellules qui se trouvent sur ou qui touchent les lignes supérieure et gauche sont comptées, mais celles qui se trouvent sur ou qui touchent les lignes droite ou inférieure sont ignorées.