gélose au sel de MANNITOL (MSA)

utilisation prévue

Hardy Diagnostics la gélose au sel de Mannitol (MSA) est recommandée comme milieu sélectif et différentiel pour l’isolement des staphylocoques pathogènes.

RÉSUMÉ

Koch ont rapporté l’utilisation d’un support contenant 7,5% de chlorure de sodium comme agent sélectif pour l’isolement des staphylocoques en 1942.,(5) les résultats ont été confirmés et améliorés par Chapman en 1945 par l’ajout de cette concentration de sel à la gélose au Mannitol Rouge phénol, car Staphylococcus aureus fermente habituellement le mannitol.(3) les staphylocoques Non pathogènes montrent généralement une croissance moins luxuriante sur ce milieu après la période d’incubation.

un chlorure de sodium, concentration de 7,5%, est près de dix fois la concentration habituelle observée dans la plupart des milieux. Il sert à inhiber la plupart des organismes sauf les staphylocoques dans les spécimens de flore mixte. L’extrait de boeuf et les peptones fournissent les éléments essentiels carbone, azote et soufre., Le Mannitol est ajouté pour montrer les capacités de fermentation des organismes. La production d’acide résultant de la fermentation de ce sucre entraîne la formation de colonies avec une zone jaune. Les staphylocoques qui ne fermentent pas le mannitol montrent une zone violette ou rouge autour des colonies.

La gélose au sel de Mannitol (MSA) est recommandée par L’American Public Health Association pour le dénombrement des staphylocoques dans les aliments et les produits laitiers.,(9,10)

FORMULA

Ingredients per liter of deionized water:*

Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.,

* ajusté et / ou complété au besoin pour répondre aux critères de rendement.

stockage et durée de conservation

stockage: à la réception stocker à 2-8ºC loin de la lumière directe. Les supports ne doivent pas être utilisés s’il y a des signes de détérioration (rétrécissement, fissuration ou décoloration), de contamination ou si la date de péremption est dépassée. Le produit est sensible à la lumière et à la température; protéger de la lumière, de la chaleur excessive, de l’humidité et du gel.

précautions

prélèvement D’échantillons: consultez les références énumérées pour obtenir de l’information sur le prélèvement d’échantillons.,(1,2,4,7) les matières infectieuses doivent être soumises directement au laboratoire sans délai et protégées contre la chaleur et le froid excessifs. En cas de retard dans le traitement, l’échantillon doit être inoculé sur un support de transport approprié et réfrigéré jusqu’à l’inoculation.

méthode D’Utilisation: laisser les plaques se réchauffer à température ambiante et la surface de la gélose sécher avant l’inoculation. Inoculer fortement et stries le spécimen dès que possible après la collecte. Si le spécimen à cultiver est sur un écouvillon, rouler l’écouvillon sur une petite zone de la surface de la gélose., Strie pour l’isolement avec une boucle stérile. Incuber les plaques de manière aérobie à 35 – 37ºC pendant 24-48 heures. Examiner la morphologie coloniale.

interprétation des résultats

les fermenteurs de Mannitol tels que S. aureus apparaissent sous forme de colonies jaunes avec des zones jaunes dans les milieux. Les fermenteurs Non mannitol tels que S. epidermidis, s’ils sont présents, auront des colonies roses à Rouges claires sans changement de couleur jaune dans le milieu. Consulter les références énumérées pour l’identification de la morphologie de la colonie et d’autres tests biochimiques requis pour l’identification.,(1,2,4,7)

LIMITATIONS

la plupart des organismes autres que les staphylocoques sont inhibés par la forte concentration de sel trouvée dans la gélose au sel de Mannitol, à l’exception de certains organismes marins Halophiles.

matériaux requis mais non fournis

fournitures et équipements microbiologiques Standard tels que boucles, écouvillons, bâtonnets applicateurs, autres milieux de culture, incinérateurs, incubateurs, etc., ainsi que les réactifs sérologiques et biochimiques, ne sont pas fournis.,

QUALITY CONTROL

Physical Appearance

Mannitol Salt Agar (MSA) should appear clear, slightly opalescent, and pinkish-red in color.,

colonies de Staphylococcus aureus (ATCC® 25923) poussant sur gélose au sel de Mannitol. Incubé en aérobic pendant 48 heures à 35ºC.

Proteus mirabilis (ATCC® 12453) croissance inhibée sur gélose au sel de Mannitol. Incubé en aérobic pendant 48 heures à 35ºC.

2. Tille, P. Bailey et Scott’s Diagnostic Microbiology, C. V. Mosby Company, St. Louis, MO.

3. Chapman, G. H. 1945. J. Bactériol.; 50:201.

4. Isenberg, H. D. Microbiologie Clinique Guide De Procédures, Vol., I, II & III. Société Américaine de microbiologie, Washington, D. C.

5. Koch, F. E. 1942. Zentr. Bakt. Labt. Orig.; 149:122.

7. Jorgensen, J. H., et coll. 2015. Manuel de Microbiologie Clinique, 11e éd. La Société américaine pour la Microbiologie, Washington, DC

8. Assurance de la qualité pour les milieux de Culture microbiologiques préparés commercialement, M22. Institut des normes cliniques et de laboratoire (CLSI-anciennement NCCLS), Wayne, PA.

9. Association Américaine De Santé Publique. 1993. Méthodes Standard pour L’examen des produits laitiers, 16e éd. APHA, Washington, D.,C.

10. APHA Comité Technique sur les Méthodes Microbiologiques pour les Aliments. 2001. Compendium de Méthodes pour l’Examen Microbiologique des Aliments, 4e ed. APHA, Washington, D. C.

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IFU-10553