La Galleria dell’Accademia abrite le David original de Michel-Ange depuis 1873. La sculpture aurait été apportée à L’Accademia pour des raisons de conservation, bien que d’autres facteurs aient été impliqués dans son déménagement de son emplacement extérieur précédent sur la Piazza della Signoria. L’intention initiale était de créer un » musée Michel-Ange », avec des sculptures et des dessins originaux, pour célébrer le quatrième centenaire de la naissance de l’artiste., Aujourd’hui, la petite collection de L’œuvre de Michel-Ange de la galerie comprend ses quatre prisonniers inachevés, destinés à la tombe du pape Jules II, et une statue de Saint Matthieu, également inachevée. En 1939, ils ont été rejoints par la Pietà Palestrina, découverte dans la chapelle Barberini à Palestrina, bien que les experts considèrent maintenant son attribution à Michel-Ange comme douteuse.,

D’autres œuvres exposées sont des peintures Florentines des XIIIe et XVIe siècles, y compris des œuvres de Paolo Uccello, Domenico Ghirlandaio, Sandro Botticelli et Andrea del Sarto; et, de la Haute Renaissance, le modèle original en plâtre de Giambologna pour le viol des femmes Sabines. Outre un certain nombre de peintures gothiques Florentines, la galerie abrite la collection d’icônes russes assemblées par les Grands-Ducs de la maison de Lorraine, dont Leopoldo faisait partie.