E. Coli au Microscope Types, Techniques, coloration de Gram et Méthode de chute suspendue

Introduction (E. Coli)

communément appelée E. coli, Escherichia coli est une bactérie que l’on trouve généralement dans un certain nombre d’environnements, y compris divers aliments, le sol et les intestins des animaux. E. coli est très diversifié et appartient au genrescherichia., Alors que la plupart des souches sont inoffensives (et également importantes dans le tractus intestinal humain), d’autres sont nocives et peuvent avoir des implications très graves pour la santé. Un bon exemple de ceci est E coli 0157: H7.,v>

outre les intoxications alimentaires pouvant causer la diarrhée et d’autres problèmes dans le système digestif, les souches nocives de E colican causent les problèmes de santé suivants;

• Infection du= »1e05c76d8f »>pneumonie
• maladie respiratoire

dans le tractus intestinal, E Coli joue un rôle important en ce qu’il aide à la digestion et soutient absorption des vitamines vitales de la nourriture dans le corps., In addition, it has been shown to bebeneficial in that it prevents the growth and proliferation of other harmfulspecies of bacteria that would otherwise cause health problems.

Main Category of Pathogenic (Diarrheagenic) E. Coli.

• Shiga toxin-producing Ecoli (STEC)
• Enterotoxigenic E coli(ETEC)
• Enteropathogenic E coli(EPEC)
• Enteroaggregative E.,
• E coli Entéroinvasive(EIEC)
• E coli adhérent diffus(DAEC)

tache de Gram

E. coli est décrit comme un gram-négatifbacterium. C’est parce qu’ils tachent négatif en utilisant le Gramstain.

la coloration de Gram est une technique différentielle qui est couramment utilisée aux fins de la classification des bactéries. La technique de coloration distingue deux principaux types de bactéries (gram positif et Gram négatif) en conférant de la couleur aux cellules.,

étant des bactéries à Gram négatif,E. coli possède une membrane externe supplémentaire composée de phospholipides et de lipopolysaccharides. La présence de lipopolysaccharides sur la membrane externe debactéries lui donne une charge négative globale à la paroi cellulaire. En raison de ces propriétés, E. coli ne retient pas le violet cristallin pendant le processus de coloration de Gram.

Voir page expliquant les bactéries Gram-positives et Gram négatif

E., Microscopie Coli

pour déterminer si une ou plusieurs souches sont présentes dans un échantillon, il est nécessaire de tacher l’échantillon. Ici, la tache de Gram est utilisée car elle aide à distinguer les bactéries gram positives et gramnégatives dans un échantillon.

étant une tache différentielle, la tache Gram est plus complexe que les taches plus simples comme le méthylène blue.As Tel, plus d’une tache est utilisée dans le but de différencier les composants cellulaires de ses.,

For this technique, 3 different stains are used.These include:

• Crystal violet
• Iodine
• Safranin

Requirements

• Microscope glass slide
• A collecting wire loop
• A heater (Burner)
• Sample (E., Coli Culture)
• eau distillée
• Gram tache (cristal violet,tache D’iode et Carbol Fuschin)
• alcool

préparation de frottis

• avant de ramasser l’échantillon,chauffer la boucle de fil et laisser refroidir (pour rendre stérile).
• à l’aide de la boucle de fil, placez la culture de bouillon sur une lame propre et stérile.,
• étaler délicatement l’inoculumà environ un centimètre de diamètre (étaler l’échantillon sur la lame)
• pour les cultures de plaques (ofbactéries), utiliser une boucle de fil stérile pour déposer une solution saline au milieu/centre de la lame
• en utilisant un autre fil stérile (chauffer et laisser refroidir), prélever une petite quantité de l’échantillon et remuer la goutte d’eau pour former une émulsion

fixation

ici, la chaleur est utilisée pour la fixation., La procédure de fixation thermique comporte les étapes suivantes:

• sécher à L’Air la lame pour que le frottis sèche
• passer la lame à travers la flamme plusieurs fois (2 ou 3 fois) côté frottis vers le haut

* lors de la fixation à chaud, évitez de surchauffer la glissière.,d= »448ac82572″>

coloration Gram

• placez la lame sur un rack de coloration et inondez le frottis avec cristal violet pour environ une minute
• légèrement incliner la diapositive andrinse avec de l’eau (distillée ou l’eau du robinet) doucement – éviter de laver grossièrement theslide
• inonder l’échantillon avec iodineand laisser la diapositive à stand pour environ 1 minute
• inclinez légèrement le slideagain et rincez en utilisant l’eau du robinet ordistilled (doucement).,
• inclinez la lame et décolorez en utilisant 95% d’éthylalcool/acétone – la décoloration doit être effectuée en appliquant l’alcool en gouttes pendant environ 8 secondes
• rincez doucement à l’eau
• épongez le slide dry
• placez la diapositive sur le microscope et visualisez l’échantillon

lorsqu’il est vu au microscope, Gram-negativee. Coli apparaîtra de couleur rose., L’absence de ceci (de couleur Pourpre) estindicatif des bactéries Gram-positives et l’absence de E. Coli Gram-négatif.

méthode de chute suspendue

la méthode de chute suspendue fait référence à une technique qui aide à examiner les petits organismes vivants et non colorés. Il peut être utilisé pourde telles bactéries mobiles comme Ps. fluorescens et E. coli.,

L’utilisation de la droptechnique suspendue est également très importante car elle permet de distinguer le mouvement brownien (le mouvement des particules en suspension dans un fluide) et la mobilité des microorganismes., placez soigneusement une boucle du bouillon au centre du couvercle en verre

pour déterminer si les bactéries se déplacent réellement, il est important de s’assurer qu’elles se déplacent dans différentes directions et changent de position., Cela différencie la motilité de l’organismede simple mouvement brownien.

Voir Aussi: bactéries au Microscope, voir la page eubactéries, en savoir plus sur les coliformes, la culture en microscopie et la sensibilité

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