předpokládané POUŽITÍ
Hardy Diagnostics Mannitol Salt Agar (MSA) je doporučeno pro použití jako selektivní a diferenciální médium pro izolaci patogenních stafylokoků.
SHRNUTÍ
Koch uvádí použití média obsahujícího 7.5% chloridu sodného jako selektivní činidla pro izolaci stafylokoků v roce 1942.,(5) výsledky byly potvrzeny a zlepšit tím, Chapman v roce 1945 přidáním této soli koncentrace Fenolové Červeně Mannitol Agar, jako Staphylococcus aureus, obvykle fermentuje manitol.(3) nepatogenní stafylokoky obvykle vykazují na tomto médiu po inkubační době méně bujný růst.
chlorid sodný, koncentrace 7,5%, je téměř desetinásobek obvyklé koncentrace pozorované ve většině médií. Slouží k inhibici většiny organismů kromě stafylokoků ve vzorcích smíšené flóry. Hovězí extrakt a peptony dodávají základní prvky uhlíku, dusíku a síry., Mannitol se přidává, aby ukázal fermentační schopnosti organismů. Produkce kyseliny v důsledku fermentace tohoto cukru vede k tvorbě kolonií se žlutou zónou. Ty stafylokoky, které nekvasí mannitol, vykazují fialovou nebo červenou zónu kolem kolonií.
mannitol Salt Agar (MSA) doporučuje Americká asociace veřejného zdraví pro výčet stafylokoků v potravinách a mléčných výrobcích.,(9,10)
FORMULA
Ingredients per liter of deionized water:*
Sodium Chloride | 75.0gm |
Proteose Peptone | 10.0gm |
Mannitol | 10.0gm |
Beef Extract | 1.0gm |
Phenol Red | 0.025gm |
Agar | 15.0gm |
Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.,
* upraveno a / nebo doplněno podle potřeby pro splnění kritérií výkonnosti.
skladování a doba použitelnosti
skladování: Při příjmu skladujte při 2-8ºC mimo přímé světlo. Média by se NEMĚLA používat, pokud existují známky zhoršení (smršťování, praskání nebo změna barvy), kontaminace nebo pokud uplynulo datum vypršení platnosti. Výrobek je citlivý na světlo a teplotu; chrání před světlem, nadměrným teplem, vlhkostí a mrazem.
bezpečnostní opatření
odběr vzorků: informace o odběru vzorků naleznete v uvedených odkazech.,(1,2,4,7) infekční materiál by měl být neprodleně předložen přímo do laboratoře a chráněn před nadměrným teplem a chladem. Pokud má dojít ke zpoždění zpracování, Vzorek by měl být naočkován na vhodné přepravní médium a chlazen až do očkování.
způsob použití: před inokulací nechte desky zahřát na pokojovou teplotu a agarový povrch vyschnout. Silně naočkovat a pruh vzorku co nejdříve po odběru. Pokud je vzorek, který má být kultivován, na tamponu, tampon převalte na malou plochu povrchu agaru., Pruh pro izolaci sterilní smyčkou. Desky aerobně inkubujte při 35-37 ° C po dobu 24-48 hodin. Prozkoumejte koloniální morfologii.
interpretace výsledků
fermentory mannitolu, jako je s.aureus, se objevují jako žluté kolonie se žlutými zónami v médiích. Fermentory bez mannitolu, jako je s.epidermidis, pokud jsou přítomny, budou mít jasně růžové až červené kolonie bez změny žluté barvy v médiu. Konzultujte uvedené odkazy pro identifikaci morfologie kolonií a další biochemické testy potřebné pro identifikaci.,(1,2,4,7)
OMEZENÍ
Většina organismů jiných než stafylokoky jsou inhibován vysokou koncentrací solí nalezené v Mannitol Salt Agar s výjimkou některých halophillic mořských živočichů.
MATERIÁLY POTŘEBNÉ, ALE NE za PŘEDPOKLADU,
Standardní mikrobiologické zásoby a vybavení, jako jsou smyčky, tampony, aplikátor tyčinky, jiná kultura, média, spalovny, inkubátory, etc., stejně jako sérologické a biochemické činidla, nejsou k dispozici.,
QUALITY CONTROL
Test Organisms | Inoculation Method* | Incubation | Results | |||
Time | Temperature | Atmosphere | ||||
Mannitol Salt Agar (Cat. no., J330): | ||||||
Staphylococcus aureus ATCC® 6538 |
J | 18hr | 35°C | Aerobic | Growth; yellow colonies and media at 18-24 hours | |
Escherichia coli ** ATCC® 8739 |
B | 72hrs | 35°C | Aerobic | Partial to complete inhibition | |
Mannitol Salt Agar (Cat. no.,“>Aerobic | Partial to complete inhibition | |||||
Escherichia coli ATCC® 8739 |
A | 72hr | 30-35°C | Aerobic | Partial to complete inhibition |
USER QUALITY CONTROL
Physical Appearance
Mannitol Salt Agar (MSA) should appear clear, slightly opalescent, and pinkish-red in color.,
Staphylococcus aureus (ATCC® 25923) kolonie, rostoucí na Mannitol Salt Agar. Aerobně inkubován po dobu 48 hodin při 35 ° C.
Proteus mirabilis (ATCC® 12453) růst inhibován na mannitol Salt Agar. Aerobně inkubován po dobu 48 hodin při 35 ° C.
2. Tille, P. Bailey a Scottova diagnostická mikrobiologie, C. v. Mosby Company, St. Louis, MO.
3. Chapman, G. H. 1945. J. Bakteriol.; 50:201.
4. Isenberg, H. D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol., I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, d. c.
5. Koch, F. E. 1942. Zentr. Bakte. Labte. Orig.; 149:122.
7. Jorgensen, J. H., et al. 2015. Příručka klinické mikrobiologie, 11.ed. American Society for Microbiology, Washington, d. c.
8. Zajištění kvality pro komerčně připravená mikrobiologická kultivační média, M22. Clinical and LaboratoryStandards Institute (CLSI-dříve NCCLS), Wayne, PA.
9. Americká Asociace Veřejného Zdraví. 1993. Standardní metody vyšetření mléčných výrobků, 16.ed. APHA, Washington, D.,C.
10. Technický výbor APHA pro mikrobiologické metody pro potraviny. 2001. Souhrn metod mikrobiologického vyšetření potravin, 4.ed. APHA, Washington, d. c.
ATCC je registrovaná ochranná známka společnosti American Type Culture Collection.
IFU-10553
Napsat komentář