předpokládané POUŽITÍ

Hardy Diagnostics Mannitol Salt Agar (MSA) je doporučeno pro použití jako selektivní a diferenciální médium pro izolaci patogenních stafylokoků.

SHRNUTÍ

Koch uvádí použití média obsahujícího 7.5% chloridu sodného jako selektivní činidla pro izolaci stafylokoků v roce 1942.,(5) výsledky byly potvrzeny a zlepšit tím, Chapman v roce 1945 přidáním této soli koncentrace Fenolové Červeně Mannitol Agar, jako Staphylococcus aureus, obvykle fermentuje manitol.(3) nepatogenní stafylokoky obvykle vykazují na tomto médiu po inkubační době méně bujný růst.

chlorid sodný, koncentrace 7,5%, je téměř desetinásobek obvyklé koncentrace pozorované ve většině médií. Slouží k inhibici většiny organismů kromě stafylokoků ve vzorcích smíšené flóry. Hovězí extrakt a peptony dodávají základní prvky uhlíku, dusíku a síry., Mannitol se přidává, aby ukázal fermentační schopnosti organismů. Produkce kyseliny v důsledku fermentace tohoto cukru vede k tvorbě kolonií se žlutou zónou. Ty stafylokoky, které nekvasí mannitol, vykazují fialovou nebo červenou zónu kolem kolonií.

mannitol Salt Agar (MSA) doporučuje Americká asociace veřejného zdraví pro výčet stafylokoků v potravinách a mléčných výrobcích.,(9,10)

FORMULA

Ingredients per liter of deionized water:*

Sodium Chloride 75.0gm
Proteose Peptone 10.0gm
Mannitol 10.0gm
Beef Extract 1.0gm
Phenol Red 0.025gm
Agar 15.0gm

Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.,

* upraveno a / nebo doplněno podle potřeby pro splnění kritérií výkonnosti.

skladování a doba použitelnosti

skladování: Při příjmu skladujte při 2-8ºC mimo přímé světlo. Média by se NEMĚLA používat, pokud existují známky zhoršení (smršťování, praskání nebo změna barvy), kontaminace nebo pokud uplynulo datum vypršení platnosti. Výrobek je citlivý na světlo a teplotu; chrání před světlem, nadměrným teplem, vlhkostí a mrazem.

bezpečnostní opatření

odběr vzorků: informace o odběru vzorků naleznete v uvedených odkazech.,(1,2,4,7) infekční materiál by měl být neprodleně předložen přímo do laboratoře a chráněn před nadměrným teplem a chladem. Pokud má dojít ke zpoždění zpracování, Vzorek by měl být naočkován na vhodné přepravní médium a chlazen až do očkování.

způsob použití: před inokulací nechte desky zahřát na pokojovou teplotu a agarový povrch vyschnout. Silně naočkovat a pruh vzorku co nejdříve po odběru. Pokud je vzorek, který má být kultivován, na tamponu, tampon převalte na malou plochu povrchu agaru., Pruh pro izolaci sterilní smyčkou. Desky aerobně inkubujte při 35-37 ° C po dobu 24-48 hodin. Prozkoumejte koloniální morfologii.

interpretace výsledků

fermentory mannitolu, jako je s.aureus, se objevují jako žluté kolonie se žlutými zónami v médiích. Fermentory bez mannitolu, jako je s.epidermidis, pokud jsou přítomny, budou mít jasně růžové až červené kolonie bez změny žluté barvy v médiu. Konzultujte uvedené odkazy pro identifikaci morfologie kolonií a další biochemické testy potřebné pro identifikaci.,(1,2,4,7)

OMEZENÍ

Většina organismů jiných než stafylokoky jsou inhibován vysokou koncentrací solí nalezené v Mannitol Salt Agar s výjimkou některých halophillic mořských živočichů.

MATERIÁLY POTŘEBNÉ, ALE NE za PŘEDPOKLADU,

Standardní mikrobiologické zásoby a vybavení, jako jsou smyčky, tampony, aplikátor tyčinky, jiná kultura, média, spalovny, inkubátory, etc., stejně jako sérologické a biochemické činidla, nejsou k dispozici.,

QUALITY CONTROL

Test Organisms Inoculation Method* Incubation Results
Time Temperature Atmosphere
Mannitol Salt Agar (Cat. no., J330):
Staphylococcus aureus
ATCC® 6538
J 18hr 35°C Aerobic Growth; yellow colonies and media at 18-24 hours
Escherichia coli **
ATCC® 8739
B 72hrs 35°C Aerobic Partial to complete inhibition
Mannitol Salt Agar (Cat. no.,“>Aerobic Partial to complete inhibition
Escherichia coli
ATCC® 8739
A 72hr 30-35°C Aerobic Partial to complete inhibition

USER QUALITY CONTROL

Physical Appearance

Mannitol Salt Agar (MSA) should appear clear, slightly opalescent, and pinkish-red in color.,

Staphylococcus aureus (ATCC® 25923) kolonie, rostoucí na Mannitol Salt Agar. Aerobně inkubován po dobu 48 hodin při 35 ° C.

Proteus mirabilis (ATCC® 12453) růst inhibován na mannitol Salt Agar. Aerobně inkubován po dobu 48 hodin při 35 ° C.

2. Tille, P. Bailey a Scottova diagnostická mikrobiologie, C. v. Mosby Company, St. Louis, MO.

3. Chapman, G. H. 1945. J. Bakteriol.; 50:201.

4. Isenberg, H. D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol., I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, d. c.

5. Koch, F. E. 1942. Zentr. Bakte. Labte. Orig.; 149:122.

7. Jorgensen, J. H., et al. 2015. Příručka klinické mikrobiologie, 11.ed. American Society for Microbiology, Washington, d. c.

8. Zajištění kvality pro komerčně připravená mikrobiologická kultivační média, M22. Clinical and LaboratoryStandards Institute (CLSI-dříve NCCLS), Wayne, PA.

9. Americká Asociace Veřejného Zdraví. 1993. Standardní metody vyšetření mléčných výrobků, 16.ed. APHA, Washington, D.,C.

10. Technický výbor APHA pro mikrobiologické metody pro potraviny. 2001. Souhrn metod mikrobiologického vyšetření potravin, 4.ed. APHA, Washington, d. c.

ATCC je registrovaná ochranná známka společnosti American Type Culture Collection.

IFU-10553