Úvod (E. Coli)

Běžně označované jako E. coli, Escherichia coli je bakterie, která istypically nalézt v řadě prostředí, včetně různých potravinách, půdě andanimal střeva. E. coli je velmi rozmanitá a patří k rodůmcherichia., Zatímco většina kmenů je neškodná (a při lidský střevní trakt), jiné jsou škodlivé a mohou způsobit závažné zdravotní důsledky. Dobrým příkladem je E coli 0157: H7.,v>

na Rozdíl od otravy jídlem, které mohou causediarrhea a další problémy v trávicím systému, škodlivé kmeny E colican způsobit následující zdravotní problémy;

  • Infekce močovétraktu
  • zápal Plic
  • Respirační onemocnění

Ve střevním traktu, E. coli hraje důležitou roli v tom, že to pomáhá při trávení a podporuje vstřebávání ofvital vitamíny z potravy v těle., In addition, it has been shown to bebeneficial in that it prevents the growth and proliferation of other harmfulspecies of bacteria that would otherwise cause health problems.

Main Category of Pathogenic (Diarrheagenic) E. Coli.

  • Shiga toxin-producing Ecoli (STEC)
  • Enterotoxigenic E coli(ETEC)
  • Enteropathogenic E coli(EPEC)
  • Enteroaggregative E., coli(ESAE)
  • Enteroinvasive E. coli(EIEC)
  • Difúzně adherentní E. coli(DAEC)

Gram Stain

E. coli je popsáno jako Gram-negativebacterium. Je to proto, že skvrna negativní pomocí Gramstain.

Gramovo barvení je diferenciální technika, který se běžně používá pro účely klasifikace bakterií. Stainingtechnique rozlišuje mezi dvěma hlavními typy bakterií (gram pozitivní Agram negativní) tím, že dodává barvu na buňkách.,

jako gramnegativní bakterie má E. coli další vnější membránu, která se skládá z fosfolipidů alipopolysacharidů. Přítomnost lipopolysacharidů na vnější membráněbakterie mu dává celkový negativní náboj buněčné stěně. Z tohoto důvoduvlastnosti, E. coli nezachovává krystalovou fialku během gramového barvenívlastnosti.

viz stránka vysvětlující grampozitivní a gramnegativní bakterie

e., Coli Mikroskopie

určit, zda je kmen(y) ispresent ve vzorku, je nutné, aby skvrny vzorku. Zde je gram skvrnapoužívá se, protože pomáhá rozlišovat mezi gram pozitivními a gramnegativními bakteriemi ve vzorku.

diferenciální skvrna,Gramovo barvení je složitější ve srovnání s více jednoduché skvrny, jako je methylenová modř.Jako takový, více než jedna skvrna se používá pro účely rozlišování její buněčné složky.,

For this technique, 3 different stains are used.These include:

  • Crystal violet
  • Iodine
  • Safranin

Requirements

  • Microscope glass slide
  • A collecting wire loop
  • A heater (Burner)
  • Sample (E., Coli Kultura)
  • Destilované vody
  • Gramovo barvení (Crystal violet,Jód skvrny a Carbol Fuschin)
  • Alkoholu

Příprava nátěrů

  • předtím, Než nabírání vzorku,teplo drátu smyčky a umožnit chlazení (sterilní).
  • pomocí drátěné smyčky scoopand umístěte bujónovou kulturu na čistý, sterilní snímek.,
  • Jemně šířit inoculumto asi centimetr v průměru (rozprostření vzorku na snímku)
  • Pro desky kultur (ofbacteria) použít sterilní drátu smyčky kapky fyziologického roztoku na míchat/středu snímku
  • Pomocí další sterilní wireloop (tepla a nechá se ochladit) scoop malé množství vzorku a míchat o kapku vody, aby se vytvořila emulze

Upevnění

Tady, teplo se používá pro upevnění., Teplo, kterým se stanoví postup zahrnuje následující kroky:

  • Air dry slide pro stěr na suché
  • Projít posuňte přes plamen několikrát (2 nebo 3 krát) stěr stranou nahoru

* Při tepelném ustálení, se zabránilo přehřátí snímku.,d=“448ac82572″>

Gram Barvení,

  • Umístěte snímek na astaining stojanu a zaplavit stěr s crystal violet pro asi jednu minutu
  • Mírně nakloňte snímek andrinse s vodou (destilovaná nebo voda z vodovodu) opatrně – Vyhněte se zhruba mytí theslide
  • Povodeň vzorku s iodineand umožňují klouzat se stát asi 1 minutu
  • Mírně naklonit slideagain a opláchněte pomocí kohoutku ordistilled voda (jemně).,
  • Nakloňte snímek a decolorize pomocí 95% ethylalcohol/aceton – decolorizing by mělo být provedeno za použití alkoholu v dropsfor o 8 sekund
  • Opláchněte vodou jemně
  • Blot snímku suché
  • Umístěte snímek onmicroscope a zobrazení vzorku

Při pohledu pod mikroskopem, Gram-negativeE. Coli se objeví růžové barvy., Absence této (fialové barvy) jeindikátor grampozitivních bakterií a absence gramnegativních E.Coli.

Závěsné Drop

závěsné drop metoda se týká techniquethat pomáhá zkoumat malé, živé a neposkvrněný organismů. Lze jej použíttakové pohyblivé bakterie jako Ps. fluorescens a E. coli.,

Pomocí závěsných droptechnique je také velmi důležité, vzhledem k tomu, že to pomáhá rozlišovat mezi Brownianmovement (pohyb částice, které jsou suspendované v tekutině) a motilityof mikroorganismů., smyčky,pečlivě umístit loopful vývaru na středu skleněný kryt skluzu

  • Otočte sklíčko nad vzorek na krytu skluzu, aby vzorek ležel mezi slide a thecover skluzu
  • Umístěte snímek na themicroscope pro prohlížení (kryt skluzu by měla být na vrcholu)
  • Začít s nejnižší powera zobrazení vzorku

    • K určení, zda bakterie je v pohybu, to je důležité zajistit, že je to pohybující se v differentdirections a změně polohy., To odlišuje pohyblivost organismuz pouhého Brownova pohybu.

    Viz Také: Bakterie pod Mikroskopem, Uvidíme, Eubacteria stránky, Dozvědět se více o koliformní bakterie, Mikroskopie Kultury a Citlivost

    Návrat k Mikroskopu Experimenty, BrightField Mikroskopie a Sklíčka Příprava

    Návrat z E., Coli pod Mikroskopem, aby MicroscopeMaster Domů