para utilizar o hemocitómetro, em primeiro lugar certifique-se de que a tampa especial fornecida com a câmara de contagem está correctamente posicionada na superfície da câmara de contagem. Quando as duas superfícies de vidro estão em contato adequado anéis de Newton pode ser observado. Em caso afirmativo, a suspensão celular é aplicada ao bordo do tubo de cobertura para ser sugada para o vazio por acção capilar que enche completamente a câmara com a amostra. O número de células na câmara pode ser determinado por contagem direta através de um microscópio, e as células visualmente distinguíveis podem ser contadas diferentemente., O número de células na câmara é utilizado para calcular a concentração ou a densidade das células da mistura de que provém a amostra. É o número de células na câmara dividido pela câmara de volume, o qual é conhecido desde o início, tendo em conta eventuais diluições e contagem de atalhos:

quando o volume da amostra diluída (após diluição) dividido pelo volume da mistura original da amostra (antes de diluição) é o fator de diluição., Por exemplo, se o volume da mistura original foi 20µL e foi diluído uma vez (adicionando 20µL diluente), então o segundo termo entre parênteses é 40µL/20µL. O volume dos quadrados contados é o mostrado na tabela no topo, dependendo do tamanho (Veja Figura à direita). O número de células contadas é a soma de todas as células contadas através de quadrados em uma câmara. A proporção das células contadas aplica-se se nem todos os quadrados internos dentro de um quadrado conjunto são contados (ou seja, se apenas 4 dos 20 num quadrado de canto forem contados, então este termo será igual a 0,2).,

as partes do hemocitómetro (vistas de lado) são identificadas.

para a maioria das aplicações, os quatro grandes quadrados de canto são apenas usados. As células que estão ligadas ou tocando as linhas superior e esquerda são contadas, mas as que estão ligadas ou tocando as linhas direita ou inferior são ignoradas.

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