The Galleria dell’Accademia has housed the original David by Michelangelo since 1873. A escultura foi supostamente levada para a Accademia por razões de conservação, embora outros fatores estiveram envolvidos em sua mudança de sua localização anterior ao ar livre na Piazza della Signoria. A intenção original era criar um “museu Michelangelo”, com esculturas e desenhos originais, para celebrar o quarto centenário do nascimento do artista., Hoje, a pequena coleção de obras de Michelangelo da galeria inclui seus quatro prisioneiros inacabados, destinados ao túmulo do Papa Júlio II, e uma estátua de São Mateus, também inacabada. Em 1939, a estes se juntou a Palestrina Pietà, descoberta na capela Barberini em Palestrina, embora os especialistas considerem sua atribuição a Michelangelo duvidosa.,

Outras obras em exposição são Florentino pinturas dos séculos 13 e 16, incluindo as obras de Paolo Uccello, Domenico Ghirlandaio, Sandro Botticelli e Andrea del Sarto; e, a partir da Alta Renascença, de Giambologna original full-size gesso modelo para o Estupro da Sabine Mulheres. Além de uma série de pinturas Góticas florentinas, A Galeria abriga a coleção de ícones russos reunidos pelos Grão-Duques da casa de Lorena, dos quais Leopoldo era um.