Introdução (E. Coli)

Comumente referido como E. coli, Escherichia coli é uma bactéria que istypically encontradas em vários ambientes, incluindo vários alimentos, solo andanimal intestinos. A E. coli é muito diversa e pertence à genusEscherichia., Embora a maioria das estirpes sejam inofensivas (e também importantes no tracto intestinal humano), outras são nocivas e podem causar graves implicações para a saúde. Um bom exemplo disso é E coli 0157: H7.,v>

Além de intoxicação alimentar que pode causediarrhea e outros problemas no sistema digestivo, prejudiciais do E colican causar os seguintes problemas de saúde;

  • Infecção do urinarytract
  • Pneumonia
  • doença Respiratória

No trato intestinal, e. coli, desempenha animportant papel em que ele ajuda na digestão e suporta a absorção ofvital vitaminas dos alimentos no corpo., In addition, it has been shown to bebeneficial in that it prevents the growth and proliferation of other harmfulspecies of bacteria that would otherwise cause health problems.

Main Category of Pathogenic (Diarrheagenic) E. Coli.

  • Shiga toxin-producing Ecoli (STEC)
  • Enterotoxigenic E coli(ETEC)
  • Enteropathogenic E coli(EPEC)
  • Enteroaggregative E., coli(CEEA)
  • Enteroinvasive e. coli(EIEC)
  • Difusamente aderente E coli(DAEC)

Gram

E. coli é descrito como um Gram-negativebacterium. Isso é porque eles mancham negativo usando Gramstain.

a coloração de Gram é uma técnica diferencial que é comumente usada para fins de classificação de bactérias. A técnica de coloração distingue dois tipos principais de bactérias (gram positivo e negativo), transmitindo cor nas células.,

sendo bactérias Gram-negativas,E. coli tem uma membrana exterior adicional que é composta por fosfolípidos e plipopolissacáridos. A presença de lipopolissacarídeos na membrana externa da bactéria dá-lhe uma carga negativa global na parede celular. Por causa destas propriedades, A E. coli não retém violeta de cristal durante o processo de coloração de Gram.

Ver página explicando Gram-positivas e Gram-negativas, bactérias

E., Microscopia de Coli

para determinar se uma ou mais estirpes são presentes numa amostra, é necessário manchar a amostra. Aqui, a coloração de Gram é usada como ajuda a distinguir entre a bactéria gram positiva e gramnegativa em uma amostra.

sendo uma mancha diferencial,a mancha de Gram é mais complexa em comparação com manchas mais simples como o metileno. blue.As assim, mais de uma mancha é usada para diferenciar os seus componentes celulares.,

For this technique, 3 different stains are used.These include:

  • Crystal violet
  • Iodine
  • Safranin

Requirements

  • Microscope glass slide
  • A collecting wire loop
  • A heater (Burner)
  • Sample (E., Coli Cultura)
  • água Destilada
  • Gram (Cristal violeta-Iodo mancha e Carbol Fuschin)
  • Álcool

Preparação de Esfregaço

  • Antes de retirar a amostra,aqueça o laço de fio e permitir o resfriamento (para tornar estéril).
  • usando o laço de fio, scoopand colocar a cultura do caldo em uma lâmina limpa e estéril.,
  • Delicadamente espalhar o inoculumto cerca de um centímetro de diâmetro (espalhar a amostra no diapositivo)
  • Para a placa de culturas (ofbacteria) usar um estéril fio loop gota de solução salina ao centro do slide
  • Usando outro estéril wireloop (calor e deixe esfriar) colher uma pequena quantidade de amostra e agite naturalmente que a gota de água para formar uma emulsão

Fixação

Aqui, o calor é usado para a fixação., Calor de fixação procedimento envolve as seguintes etapas:

  • Ar seco a apresentação para o esfregaço secar
  • Passar a deslizar através da chama algumas vezes (2 ou 3 vezes) esfregaço lado

* Durante o calor de fixação, evitar o sobreaquecimento do slide.,d=”448ac82572″>

Gram a Coloração

  • Coloque o slide em astaining rack e inundar o esfregaço com cristal violeta por cerca de um minuto
  • Incline levemente a apresentação de andrinse com água (destilada ou água de torneira) suavemente – Evitar cerca de lavar roupa theslide
  • Inundação da amostra com iodineand permitir que a apresentação de ficar por cerca de 1 minuto
  • incline Levemente a slideagain e enxágue com toque ordistilled água (suavemente).,
  • Incline o slide e decolorize utilizando 95% ethylalcohol/acetona – descoloração deve ser feito aplicando-se o álcool em dropsfor cerca de 8 segundos
  • Enxágüe com água delicadamente
  • Desfazer a apresentação de seca
  • Coloque o slide onmicroscope e ver o exemplo

Quando visto sob o microscópio, Gram-negativeE. A Coli vai parecer cor-de-rosa., A ausência desta (de cor púrpura) éindicativa de bactérias Gram-positivas e a ausência de E. Coli Gram-negativo.

Hanging Drop Method

the hanging drop method refers to a techniquethat helps examine small, living and unstained organisms. Pode ser usado para bactérias motéis como Ps. fluorescens e E. coli.,

usando a droptechnique suspensa também é muito importante, uma vez que ajuda a distinguir entre a mudança de Brownian (o movimento de partículas suspensas em um fluido) e a motilidade de microorganismos., loop,coloque cuidadosamente uma ansa cheia do caldo para o centro da tampa do vidro de deslizamento

  • Vire a lâmina de vidro overthe exemplo sobre a lamínula para o exemplo que se encontra entre a lâmina e o thecover deslizamento
  • Coloque o slide em themicroscope para visualização (a lamínula deve estar no topo)
  • Iniciar com a menor powerand visualizar a amostra

    • Para determinar se as bactérias isreally em movimento, é importante para garantir que ele está se movendo em differentdirections e mudar de posição., Isto diferencia a motilidade do organismo do mero movimento browniano.

    Veja Também: Bactérias ao Microscópio, Consulte Eubacteria página, Saiba mais sobre os Coliformes, Microscopia de Cultura e Sensibilidade

    Voltar para Experimentos de microscopia, BrightField Microscopia e Lâminas de Microscópio Preparação

    Retorno do E., Coli sob o Microscópio para MicroscopeMaster Home