Nas células e no laboratório, as enzimas chamadas ligases são usados para unir fragmentos de DNA juntos. Apenas fragmentos de DNA que têm extremidades complementares e coincidentes podem ser unidos por ligação.como funcionam as ligases?
Ligases unem fragmentos de DNA ao catalisar a formação de ligações entre nucleótidos vizinhos.,
Ligadura em células
as Células naturalmente realização de laqueadura durante a replicação do DNA, quando os fragmentos de Okazaki são unidos. As células também usam ligação para reparar o DNA que foi danificado, seja pelo metabolismo celular normal ou por fatores ambientais, tais como luz UV ou radiação. Até 1 milhão de quebras podem ocorrer no DNA de uma única célula humana a cada dia.,a mistura de reação deve conter: fragmentos complementares de DNA, um ligasebuffer, e uma fonte de energia. A energia para esta reação normalmente vem de um químico chamado ATP (trifosfato de adenosina).
obter os fragmentos de ADN
o ADN é preparado para ligação por ser cortado em fragmentos com enzimas de restrição. Cada enzima de restrição corta ADN num local específico e produz fragmentos que têm extremidades “contundentes” ou “pegajosas”.,Ligases podem juntar quaisquer fragmentos de ADN com extremidades “contundentes”. Eles também podem juntar fragmentos de DNA com extremidades “pegajosas”, mas apenas se os nucleótidos nas cadeias são complementares. Para obter “extremidades pegajosas” complementares, os fragmentos de ADN a juntar devem ser cortados com a mesma enzima de restrição.quando é que a ligadura é usada no laboratório?
Deixe uma resposta