Introduction(E.Coli)

E.coliと一般的に呼ばれる大腸菌は、様々な食品、土壌、動物の腸を含む多くの環境で典型的に見られる細菌です。 大腸菌は非常に多様であり、属に属するシェリキア。, ほとんどの株は無害ですが（そしてヒトの腸管でも重要です）、他の株は有害であり、非常に深刻な健康への影響を引き起こす可能性があります。 これの良い例は大腸菌0157：H7です。,v>

原因となる食中毒とは別に下痢や消化器系の他の問題、E colicanの有害な株は次の健康上の問題を引き起こします。

  • 尿細管の感染
  • 肺炎
  • 呼吸器疾患

腸管では、大腸菌は消化を助け、体内の食物からのビタミンの吸収をサポートするという点で重要な役割を果たしている。, In addition, it has been shown to bebeneficial in that it prevents the growth and proliferation of other harmfulspecies of bacteria that would otherwise cause health problems.

Main Category of Pathogenic (Diarrheagenic) E. Coli.

  • Shiga toxin-producing Ecoli (STEC)
  • Enterotoxigenic E coli(ETEC)
  • Enteropathogenic E coli(EPEC)
  • Enteroaggregative E., coli(EAEC)
  • 腸浸潤性大腸菌(EIEC)
  • 拡散性付着性大腸菌(DAEC)

グラム染色

大腸菌は、グラム陰性細菌として記載されている。 これは、グラムステインを使用して陰性を染色するためです。

グラム染色は、細菌を分類する目的で一般的に使用されています。 Stainingtechniqueは、細胞に色を付与することによって、二つの主要なタイプの細菌（グラム陽性およびグラム陰性）を区別する。,

グラム陰性細菌である大腸菌は、リン脂質とリポ多糖類からなる追加の外膜を有する。 外膜上のリポ多糖の存在細菌はそれを細胞壁に全体的な負電荷を与える。 これらの特性のために、エシェリヒア属大腸菌はグラムのstainingprocessの間に水晶すみれ色を保たない。

グラム陽性およびグラム陰性細菌の説明ページを参照してください

E., 大腸菌顕微鏡

株がサンプルに存在するかどうかを判断するには、サンプルを染色する必要があります。 ここでは、グラム染色は、試料中のグラム陽性およびグラム陰性の細菌を区別するのに役立つので使用される。

差動染色であるため、グラム染色はメチレンのようなより単純な染色に比べて複雑ですblue.As このような、その細胞成分を分化させる目的で複数の染色剤が使用される。,

For this technique, 3 different stains are used.These include:

  • Crystal violet
  • Iodine
  • Safranin

Requirements

  • Microscope glass slide
  • A collecting wire loop
  • A heater (Burner)
  • Sample (E., 大腸菌カルチャー）
  • 蒸留水
  • グラム染色（クリスタルバイオレット、ヨウ素染色および炭水化物Fuschin）
  • アルコール

汚れの準備

  • サンプルをすくう前に、ワイヤーループを熱し、冷却を許可して下さい（生殖不能にさせて下さい）。
  • ワイヤーループを使用して、scoopandはきれいな、生殖不能のスライドにブロス文化を置きます。,
  • 穏やかに直径のセンチメートルについてのinoculumtoを広げて下さい（スライドのサンプルを広げて下さい）
  • 版文化（ofbacteria）のためにスライドのthemiddle/中心で塩溶液を落とすのに生殖不能ワイヤーループを使用して下さい
  • 別の生殖不能ワイヤーループを使用して下さい（熱および許可された熱および許可された熱および許可された熱および許可された熱および許可された熱および許可された熱および許可された熱および許可された熱。冷却するには）少量のサンプルをすくい、水滴をかき混ぜてエマルジョンを形成します

固定

ここでは、固定に熱を使用します。, 熱fixingのプロシージャは次のステップを含みます:

  • 空気乾燥します塗抹標本のためのスライドを乾燥します
  • 炎を通してスライドを数回通します（2か3回）塗抹標本の側面

*熱fixingの間に、過熱することを避けて下さいスライドだ,d=”448ac82572″>

グラム染色

  • スライドをastainingラックに置き、クリスタルバイオレットで塗抹標本を約一分間あふれさせます
  • わずかにスライドを傾け、水（蒸留水または水道水）でゆっくりと洗う-大まかにスライドを洗わないでください
  • ヨウ素でサンプルをあふれさせ、スライドを約1分間放置させます
  • スライドをわずかに傾け、タップordistilled水を使用してすすぎます（穏やかに）。,
  • スライドを傾け、95%ethylalcohol/acetoneを使用して脱色-脱色はdropsforのアルコールを加えることによってされるべきです約8秒
  • 水で穏やかに洗って下さい
  • 乾燥したスライドを汚して下さい
  • スライドを顕微鏡に置き、サンプルを表示します

顕微鏡下で見ると、グラム陰性です。 Coliは色がピンクに見えます。, これがない（紫色の）ことはグラム陽性細菌の指標であり、グラム陰性大腸菌の不在である。

ハンギングドロップメソッド

ハンギングドロップメソッドは、小さな生きていると染色されていない生物を調べるのに役立ち それはPsとして使用されたforsuchの運動性の細菌である場合もあります。 蛍光および大腸菌。,

ハンギングドロップテクニークを使用することは、ブラウン運動（流体中に浮遊している粒子の動き）と微生物の運動性を区別するのに役立つことを考えると、非常に重要です。, ループは、慎重にガラスカバースリップの中心にスープのループを置きます

  • ガラススライドをカバースリップのサンプルを裏返して、スライドとカバースリップの間にあるサンプルを持つようにします
  • スライドを顕微鏡の上に置きます（カバースリップは上にあるべきです）
  • 最も低いpowerandの眺め標本から始まって下さい

    • 細菌が実際に動いているかどうか定めるためには、differentdirectionおよび変更の位置で動いていることを確, これは、単なるブラウン運動から生物の運動性を区別する。

    も参照してください：顕微鏡下の細菌、真正細菌のページを参照してください、大腸菌群、顕微鏡培養および感度についての詳細を学びます

    顕微鏡実験、明視野顕微鏡に戻りますそして、顕微鏡スライドの準備

    eから戻ります。, マイクロスコープマスターホームに顕微鏡下の大腸菌