マンゴーアレルギー患者におけるアナフィラキシー反応

30歳の女性患者は、2017年に様々な食品の消費後の再発アレルギー反応のために、アレルギー学、臨床免疫学および内臓疾患の部門および診療所に入院した。

これらの反応は、全身の蕁麻疹の形で、主に皮膚であった。, 多くの異なる成分を含む様々な特に複雑な料理を摂取した後、再発した一般化されたじんましんの症状が経験された。 患者はこれらの症状をピーマン、クレメンタイン、そば蜂蜜、赤ワインの消費と関連付けた。

患者の生活の中で最も重篤なアレルギー反応は、マンゴー果実を食べた後に起こった。 数分以内に、患者は一般化された蕁麻疹を発症し、その後顔面浮腫、強い胃痛、および水様下痢が続いた。 救急隊員が呼び出されました。 アドレナリン，ステロイド，抗ヒスタミン剤を投与した。,

詳細な病歴により、過去6年間、患者は季節性鼻炎（流涙、かゆみまぶた、および水様鼻汁）の症状を有していたことが明らかになった。

当時の患者は甲状腺機能低下症のためにレボチロキシンで治療されていた。 患者の家族歴はアレルギー性疾患に苦しんでいます：患者の母親は吸入アレルゲンにアレルギーがあり、父親は樺と猫にアレルギーがあります。

この複雑なケースでは、診断には幅広い診断方法が必要でした。, アレルギー学、臨床免疫学および内部疾患の部門および診療所で行われる診断の一部として、患者は吸入アレルゲン（Dermatophagoides farinae、Dermatophagoides pteronyssinus、草/穀物、雑草、Aspergillus fumigatus、Cladosporium herbarum、猫の毛皮、ポプラ、ヘーゼル、ハンノキ、白樺、ヨモギ、ribwortオオバコ）および食物アレルゲン（鶏卵、牛乳、トマト、鯉、バナナ、ライ麦粉、小麦粉、ピーナッツ、ヘーゼルナッツ、豚肉、鶏肉、オレンジ）allergopharmaから-nexter sp。 株式会社ゼー-オー-オー（英文社名：z o.o.,だけでなく、生鮮食品（そば蜂蜜、ピーマン、マンゴー、クレメンタイン、ニンジン、セロリ、ピーナッツ、バナナ、マスタード、ターメリック、キャラウェイ、赤ワイン）とネイティブ,選択されたアレルゲン（ヨモギ、よもぎ、早草ミックス、遅草ミックス、セロリ、ピーマン、ニンジン、マンゴー、バナナ、桃、リンゴ、ピーナッツ、ヘーゼルナッツ、Dermatophagoides pteronyssinus、Dermatophagoides farinae、早木ミックス、遅木ミックス、バーチ、Cladosporium herbarum、Aspergillus fumigatus、Alteraria tenius、牛乳蛋白質、調味料ミックス、マスタード）スウェーデン）システム、製造業者の指示に従ってphadia100装置を使用して（immunocap specifi ige、fluoroenzymmunoassay、52-5291-en/05）。,診断は、ImmunoCap ISAC法を用いて、アレルゲン成分に特異的なIgEのレベルを決定することによって拡張された。

これらの試験のそれぞれは、異なる特異性および感度を有し、それほど重要ではないが、可用性およびコストを有する。 皮の刺すテストは即時の結果を用いる速く、安価な方法として考慮される。 残念ながら、食物アレルギーの検出率は限られています。 最近の記事ではGriffiths et al. SPTs（53％）およびISAC（59％）の検出率は類似しており、ImmunoCAP検査（66％）の検出率は高かった。, ナッツアレルギーの患者では、ナッツに対する感受性の検査も同様であったが、免疫キャップ検査ではSPT（71％）またはISAC（53％）よりも感度が高かった（65％）。 したがって，本症例の診断をｉｎｖｉｔｒｏでアレルゲン特異的Ｉｇｅ濃度を決定することに拡張した。 食物アレルギーの診断の金本位はまだ二重盲検の偽薬によって制御される食糧挑戦である。 この場合、患者は挑発の挑戦に同意しなかった。,

皮膚プリック試験は、以下のアレルゲン抽出物（小麦平均直径ミリメートル）に対して陽性であった：草7mm;雑草：8mm;猫の毛皮：5mm;ヨモギ：6mm;オオバコ：4mm;セロリ：2mm;クレメンチン：2mm（ヒスタミン4mm、陰性対照0mm、結果は小麦平均直径≤3mmの場合に陽性と解釈された）。 他の試験したアレルゲン抽出物については皮膚反応は観察されなかった。 総IgEレベルは406.53kU/Lであった

ネイティブテストの結果は、マンゴー5ミリメートル、セロリ3ミリメートルの陽性であった。,

ImmunoCap法を用いて試験した特異的IgEレベルの結果を表1に示す。 IgEの上昇レベル（0.35kU/L以上）は、ヨモギ、ヨモギ、初期の草のミックス、後期の草のミックス、セロリ、ピーマン、ニンジン、マンゴー、バナナ、桃、リンゴ、ピーナッツに対して

患者が退院した後、ImmunoCap ISAC試験の結果を受け取った表2。, ヨモギからのArt v1（defensin）およびティモシーからのPhl p1のためのigeの特定の高レベルは特に注目に値しました。 ImmunoCap ISACで利用可能な食物アレルゲンの成分に特異的なIgEレベルの上昇はなかったことを強調する価値がある。 この患者におけるＯＡＳの症状は，チモシーおよびヨモギアレルゲンとの交差反応性に起因する可能性がある。 蕁麻疹の症状は、上記の食物アレルゲンのいずれかに対する感受性に起因することもあります。, 患者の生活の中で唯一のアナフィラキシー反応は、マンゴーの消費後に発生し、この過敏症は、我々は、さらなる診断を必要とするものであったと判断しました。

ここで、ImmunoCap ISACテストは、その特定のケースでは、マンゴーに対する患者のアレルギーがArt v1との交差アレルギー、またはヨモギから独立した別の分子に対するアレルギーの結果であるかどうかを示さなかったことを明確に述べる必要がある。 ImmunoCap ISACには、マンゴーアレルゲン成分は含まれていません。

これを明らかにするために、新鮮なマンゴー果実からのアレルゲン抽出物を用いて、免疫キャップ阻害試験を適用した。, この調査は、Ｂｅｒｎａｒｄｉらによって記載されたＳＰＨＩＡモデル（単一点最高阻害達成可能アッセイ）に基づいた。 2011年に。

同様の阻害アッセイは、いくつかの著者によって以前に適用されたが、この阻害アッセイの方法論は、依然として実験的であると考えられている。 例えば、私たちの研究ユニットでは、ヒマワリの種子にアレルギーがある患者のケースが記載され、ImmunoCap ISAC阻害試験を用いて交差反応性を証明した。 阻害試験では、Art v1、Art v3、およびJug r3は、ヒマワリ種子アレルゲン抽出物中に存在するタンパク質によって阻害された。,

阻害試験を実行するには、熟したマンゴー果実は、エコ食品を提供する地元の食料品で購入しました。 果実を洗浄し、皮をむき、ピットを除去して可食部分を得た。 タンパク質containing有パルプ抽出物は、前述の方法を用いて得られた。 Diced果た液体窒素で瞬間凍結合の円滑ないます。 次いで、パルプを1m NaClと2:1(2:1,v/v)の比で混合し、2-8℃で24時間放置した後、混合物を室温で12,000×gで60分間遠心分離した。 2.35mg/dLのタンパク質を含む抽出物を得た。, 阻害試験において、得られた抽出物を患者の血清と1：1の体積比で混合し、2-8℃で24時間インキュベートした。 血清の希釈を考慮するために、ブラインドサンプルを同時に調製した。 そのために、患者の血清を1M NaCl(1:1,v/v)と混合し、2-8℃で24時間インキュベートした後、調製した材料中のヨモギ、Art v1、およびマンゴーに特異的なIgEのレベルを決定し、阻害および希釈し、阻害比を計算した。,

阻害試験では、患者の血清中のヨモギsIgEのベースラインレベルは144.32ku/Lであった。ブラインドサンプルでは、1M NaCl1:1で希釈した後、sIgEの濃度は72.16ku/Lであった。マンゴーアレルゲン抽出物と患者の血清をインキュベーションした後、ヨモギIgEのレベルは48.81ku/Lであった。マンゴーアレルゲン抽出物は32.38％ヨモギIgEの結合を阻害することが示された。

患者の血清中のArt v1sIgEのベースラインレベルは99.8ku/Lであった。, ブラインドサンプルでは、1M NaCl1:1で希釈した後、sIgEの濃度は49.9ku/Lであった。マンゴーアレルゲン抽出物と患者血清をインキュベーションした後、Art v1IgEのレベルは35.2ku/Lであった。マンゴーアレルゲン抽出物は、Ige Art v1の結合を29.5%阻害することが示された。 実施された診断手順に基づいて、患者に存在する症状は、マンゴーのアレルゲンとArt v1との間の交差反応の結果であり得ることが実証された。 阻害試験の結果を図に示す。 1.

マンゴー抽出物による阻害試験の結果

この阻害試験は実験的方法であり、前述のプロトコルがこの特定のケースのニーズに合わせて変更されたため、異なるプロトコルによる阻害試験を順に行った。クロスアレルギーの最終的な確認を提供する。 イムノキャップマトリックスを用いて，患者血清をマンゴー果実からのアレルゲン抽出物とインキュベートした。, 免疫キャップを洗浄作業溶液イムノキャップで二度，中性ｐｈりん酸緩衝液で二度洗浄した。 このようにして調製したImmunoCapに50μlの試験血清を加え、室温で1時間インキュベートした後、1500×gで2分間遠心分離した。 得られた抗体枯渇血清、および天然血清を、ImmunoCap法を用いて、Art v1アレルゲン成分の存在について分析した。

患者血清中のArt v1sIgEのベースラインレベルは99.8ku/Lであった。, この場合、患者の血清は希釈されなかったので、陰性コントロールは必要ではなかった。 ImmunoCapマンゴーマトリックスを用いた患者血清のインキュベーション後、Art v1IgEのレベルは56.5kU/Lであった。その結果、ImmunoCapマンゴーマトリックスはArt v1IgEの結合を43.4％阻害することが示された。 これらの結果を図に示す。 2.

免疫キャップマトリックス上のマンゴーアレルゲンによる阻害の結果