Johdanto (E. Coli)

Yleisesti nimitystä E. coli Escherichia coli on bakteeri, joka istypically monissa ympäristöissä, kuten eri elintarvikkeiden, maaperän andanimal suolistossa. E. coli on hyvin monipuolinen ja kuuluu genusEscherichia., Kun taas useimmat kannat ovat harmittomia (ja tärkeä myös ihmisen suolistossa), toiset ovat haitallisia ja voivat aiheuttaa veryserious terveysvaikutuksia. Hyvä esimerkki tästä on E. coli 0157: H7.,v>

Lukuun ottamatta ruokamyrkytys, joka voi causediarrhea ja muita ongelmia ruoansulatuskanavan, haitallisia kantoja E colican aiheuttaa seuraavia terveysongelmia;

  • Infektio urinarytract
  • Keuhkokuume
  • Hengityselinten sairaus

suolistossa, E coli näytelmiä tärkeä rooli siinä, että se auttaa ruoansulatusta ja tukee imeytymistä ofvital ruoka vitamiineja kehossa., In addition, it has been shown to bebeneficial in that it prevents the growth and proliferation of other harmfulspecies of bacteria that would otherwise cause health problems.

Main Category of Pathogenic (Diarrheagenic) E. Coli.

  • Shiga toxin-producing Ecoli (STEC)
  • Enterotoxigenic E coli(ETEC)
  • Enteropathogenic E coli(EPEC)
  • Enteroaggregative E., coli(EURATOM)
  • Enteroinvasiiviset e. coli(EIEC)
  • Hajanaisesti kiinnittynyt E coli(DAEC)

Gram-värjäys

E. coli on kuvattu Gram-negativebacterium. Tämä johtuu siitä, että ne tahraavat negatiivinen käyttäen Gramstain.

Gram tahra on ero tekniikka, joka on yleisesti käytetty varten luokitella bakteereja. Stainingtechnique erottaa kaksi päätyyppiä bakteerit (gram positiivinen jagram negatiivinen) antamalla väriä soluihin.,

On Gram-negatiiviset bakteerit,E. coli on ylimääräinen ulompi kalvo, joka koostuu fosfolipideistä andlipopolysaccharides. Lipopolysakkaridien esiintyminen bakteerien uloimmassa kalvossa antaa sille negatiivisen kokonaisvarauksen soluseinään. Kolibakteerien vuoksi E. coli ei säilytä Kideviolettia Gram-värjäysprosessin aikana.

Katso sivu selittää, Gram-positiiviset ja Gram-negatiiviset bakteerit,

E., Coli Mikroskopia

määrittää, onko kanta(s) ispresent näytteessä, se on välttämätöntä tahra näyte. Tässä Gram-tahra käytetään, koska se auttaa erottamaan gramnegatiiviset bakteerit näytteestä.

koska ero tahra,Gram-värjäys on monimutkaisempi verrattuna enemmän yksinkertainen tahroja, kuten metyleenisini.Koska tällaisia, enemmän kuin yksi tahra käytetään tarkoituksiin erottaa sen solun osia.,

For this technique, 3 different stains are used.These include:

  • Crystal violet
  • Iodine
  • Safranin

Requirements

  • Microscope glass slide
  • A collecting wire loop
  • A heater (Burner)
  • Sample (E., Coli Kulttuuri)
  • Tislattua vettä
  • Gram-värjäys (Crystal violet,Jodi tahra ja Karbol Fuschin)
  • Alkoholi

Kokeena Valmistelu

  • Ennen scooping näyte,lämpöä lanka silmukan ja anna jäähdytys (tehdä steriili).
  • Käyttämällä lanka silmukan, scoopand paikka liemi kulttuurin puhdas, steriili liukumäki.,
  • Varovasti levitä inoculumto noin sentin halkaisijaltaan (leviää näytteen dia)
  • levy-kulttuureissa (ofbacteria) käytä steriiliä lanka silmukan pudota suolaliuosta osoitteessa alueen keskiosan/center dian
  • Käyttämällä toista steriiliä wireloop (lämpöä ja annetaan jäähtyä) kauha pieni määrä näytettä ja sekoita onthe vesipisara muodostaa emulsio

Korjaus

Täällä, lämpö on käytetty korjaamiseen., Lämpöä korjaus menettely sisältää seuraavat vaiheet:

  • kuivaa liukumäki smear kuivua
  • Siirtää liu ’ uta liekin läpi muutaman kerran (2 tai 3 kertaa) voitele puoli ylöspäin

* Aikana lämpöä korjaus, välttää ylikuumenemisen dia.,d=”448ac82572″>

Gram-Värjäys

  • laita dian astaining teline ja peitetään preparaatti crystal violet noin yksi minuutti
  • Hieman kallistaa liukumäki andrinse vettä (tislattua tai hanavettä) varovasti – Vältä karkeasti pesu theslide
  • Tulva näytteen kanssa iodineand salli dian seistä noin 1 minuutti
  • Hieman kallistaa slideagain ja huuhtele käyttämällä napauta ordistilled vettä (varovasti).,
  • Kallistaa liukumäki ja decolorize käyttäen 95% ethylalcohol/asetoni – decolorizing pitäisi tehdä soveltamalla alkoholin dropsfor noin 8 sekuntia
  • Huuhtele vedellä varovasti
  • Blot dia kuiva
  • laita dian onmicroscope ja tarkastella näyte

Kun tarkastella mikroskoopilla, Gram-negativeE. Kolibakteeri näyttää väriltään vaaleanpunaiselta., Tämän (purppuravärin) puuttuminen on grampositiivisten bakteerien ilmentymä ja gramnegatiivisten E. Coli-bakteerien puuttuminen.

Roikkuu Pudota-Menetelmällä

roikkuu pudota-menetelmällä tarkoitetaan techniquethat auttaa tutkia pieni, elävä ja värjäämättä organismeja. Sitä voidaan käyttää Ps-bakteereina. fluoresenssit ja kolibakteerit.,

Käyttää roikkuu droptechnique on myös erittäin tärkeää, koska se auttaa erottamaan Brownianmovement (liikkeen hiukkasia, jotka ovat keskeytetään nestettä) ja motilityof mikro-organismeja., silmukka,huolellisesti aseta loopful liemi päälle keskelle lasia kansi lipsahdus

  • Käännä lasi liukua lattialle näyte kansi lipsahdus on näytteen välissä liu ’ uta ja tyynyn slip
  • laita dian themicroscope katseluun (kansi lipsahdus pitäisi olla päällä)
  • Aloita pienin powerand tarkastella yksilö

    • määrittää, onko bakteerit isreally liikkeelle, se on tärkeää varmistaa, että se liikkuu differentdirections ja muuttuva asema., Tämä erottaa järjestönliikkuvuuden pelkästä Brownian liikkeestä.

    Katso Myös: Bakteerit Mikroskoopin alla, Katso Näytteessä sivu Oppia lisää siitä, Kolibakteerit, Mikroskopia Kulttuuri ja Herkkyys

    Palaa Mikroskooppi Kokeita, BrightField Mikroskopia ja näytelevyt Mikroskooppeihin Valmistelu

    Paluu E., Coli Mikroskoopilla MicroscopeMaster Kotiin