potilas On nainen, 30 vuotias, oli otettu helmikuussa 2017 Osasto ja Allergologian Klinikka, Kliininen Immunologia ja Sisäinen Sairauksia, koska toistuvia allergisia reaktioita seuraavat kulutus eri elintarvikkeita.

nämä reaktiot olivat suurelta osin ihon kautta, urtikarian muodossa koko kehossa., Toistuvan, yleistyneen urtikarian oireita koettiin nautittuaan useita erityisen monimutkaisia ruokia, jotka sisälsivät monia eri ainesosia. Potilas liitti nämä oireet paprikan, klementiinien, tattarihunajan ja punaviinin kulutukseen.

vakavin allerginen reaktio potilaan elämässä tapahtui mangohedelmän syömisen jälkeen. Potilaalle kehittyi muutamassa minuutissa yleistynyt urtikaria, jota seurasivat kasvojen turvotus, voimakas vatsakipu ja vetinen ripuli. Paikalle hälytettiin ensihoitajat. Potilaalle annettiin adrenaliinia, steroideja ja antihistamiineja.,

yksityiskohtainen lääketieteellinen historia paljasti, että edellisen 6 vuoden aikana potilaalla oli oireita kausiluonteista nuha (kyynelvuoto, kutina silmäluomien, ja vetistä nenän vuotamista).

tuolloin potilasta hoidettiin myös levotyroksiinilla kilpirauhasen vajaatoiminnan vuoksi. Potilaan perheen historia on täynnä allergiset sairaudet: potilaan äiti on allerginen inhalatory allergeeneja, ja hänen isänsä koivu ja kissa.

tässä monimutkaisessa tapauksessa diagnoosi vaati laajan valikoiman diagnostisia menetelmiä., Osana diagnostiikka suoritetaan Osastolla ja Allergologian Klinikka, Kliininen Immunologia ja Sisäinen Sairauksia, potilas oli ihon prick-testit joukko inhalatory allergeenit (Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides pteronyssinus, ruoho/vilja -, rikkaruohot, Aspergillus fumigatus, Cladosporium herbarum, kissan turkista, poppeli, pähkinäpensas, leppä, koivu, mugwort, heinäratamo) ja ruoka-allergeenit (kanan muna, lehmän maito, tomaatti, karppi, banaani, ruis jauho, vehnäjauho, maapähkinä, hasselpähkinä, sianliha, kananliha, oranssi) alkaen Allergopharma-Nexter Sp. z o. o. (Ltd.,), sekä natiivi ihon testit tuoreita elintarvikkeita (tattari hunajaa, paprika, mango, clementine, porkkana, selleri, pähkinät, banaani, sinappi, kurkuma, kumina, punainen viini).,hänen vel-arvonsa IgE erityisiä valittujen allergeenit (mugwort, koiruoho, varhainen grass sekoita, myöhään grass sekoita, selleri, paprikat, porkkana, mango, banaani, persikka, omena, maapähkinät, hasselpähkinät, Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, varhainen puita sekoita, myöhään puita sekoita, koivu, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, Alternaria tenius, lehmän maidon proteiini, mausteseos, sinappi) määritettiin kanssa ImmunoCap (ThermoFisher Scientific, Uppsala, Ruotsi) – järjestelmä, käyttämällä Phadia100 laitteet, mukaan valmistajan ohjeiden mukaisesti (ImmunoCAP tekniset tiedot IgE, fluoroenzymeimmunoassay, 52-5291-FI/05).,

diagnostiikka laajennettiin, jonka tason määrittäminen IgE-spesifinen allergeeni komponentit, käyttäen ImmunoCap ISAC menetelmä.

jokaisella näistä testeistä on erilainen spesifisyys ja herkkyys ja, mikä tärkeintä, saatavuus ja kustannukset. Skin prick-testejä pidetään nopeana, edullisena menetelmänä, jonka tulokset ovat välittömiä. Valitettavasti niiden havaitsemisnopeus ruoka-allergiassa on rajallinen. Tuoreessa artikkelissa Griffiths et al. tunnistus hinnat saumattomista rauta-ja teräsputkista (53%) ja ISAC (59%) olivat samanlaisia, joilla on korkeampi havaitseminen korko ImmunoCAP testaus (66%)., Potilailla, joilla on pähkinäallergia, testit herkistyminen pähkinöitä teki samoin, mutta suurempi herkkyys (71 prosenttia) ImmunoCAP testit kuin saumattomien rauta-ja teräsputkien (53%) tai ISAC (65%). Siksi me laajennettu diagnoosi tässä tapauksessa in vitro-pitoisuuden määrittäminen allergeeni IgE. Ruoka-allergian diagnosoinnissa kultastandardi on edelleen kaksoissokkoutettu lumekontrolloitu ruokahaaste. Tällöin potilas ei suostunut provokaatiohaasteisiin.,

Ihon prick testit olivat positiivisia seuraavien otteiden allergeeni (pahkurat keskimääräinen halkaisija millimetreinä): ruoho 7 mm; rikkaruohot: 8 mm; kissan turkki: 5 mm; pujon: 6 mm; heinäratamo: 4 mm; selleri: 2 mm; clementine: 2 mm (histamiini 4 mm, negatiivinen kontrolli 0 mm, tulos tulkittiin positiiviseksi, jos pahkurat keskimääräinen halkaisija ≥ 3 mm). Muilla testatuilla allergeeniuutteilla ei havaittu ihoreaktiota. Kokonais-IgE-taso oli 406.53 kU/L.

Tuloksia äidinkielen testeissä oli positiivinen mango 5 mm, selleri 3 mm.,

immunokap-menetelmällä testattujen IgE-pitoisuuksien tulokset on esitetty taulukossa 1. Kohonneet IgE (yli 0.35 kU/L) havaittiin vastaan mugwort, koiruoho, varhainen grass sekoita, myöhään grass sekoita, selleri, paprikat, porkkana, mango, banaani, persikka, omena, pähkinöitä.

Taulukko 1 luettelo tulokset IgE tasot testattiin käyttäen ImmunoCap menetelmä

sen Jälkeen, kun potilas kotiutettiin sairaalasta saimme tulokset ImmunoCap ISAC testit (Taulukko 2)., Korkea IgE-specific Art v 1 (defensin) alkaen pujon ja Phl p 1 timothy oli erityisen huomionarvoista. On syytä korostaa, että ei ollut kohonneita IgE erityisiä komponentteja elintarvikkeiden allergeenit saatavilla ImmunoCap ISAC. On mahdollista, että OAS: n oireet tässä potilaassa johtuivat ristireaktiivisuudesta timothy-ja mugwort-allergeenien kanssa. Nokkosihottuman oireet voivat johtua myös herkkyydestä jollekin edellä mainituista ruoka-aineallergeeneista., Ainoa anafylaktinen reaktio potilailla, elämä tapahtui sen jälkeen, kun kulutus mango, ja tämä yliherkkyys oli se, että päätimme, tarvitaan edelleen diagnoosi.

Taulukko 2 ImmunoCap ISAC testin tulokset., Ei kohonneeseen allergeeni-IgE löytyi muita allergeeni komponentit sisältyvät ImmunoCap testi

Tässä sen on oltava selvästi, että ImmunoCap ISAC testi ei ilmoittaa, jos kyseisessä tapauksessa potilas on allergia mango oli seurausta rajat allergia Art v 1, tai allergia toinen molekyyli, joka on riippumaton mugwort. ImmunoCap ISAC ei ole mango allergeeni komponentteja saatavilla.

selventää tätä, sitten, ImmunoCap esto testi oli soveltaa, käyttää allergeeni ote tuoretta mangoa., Tutkimus perustui SPHIA malli (Yhden Pisteen Korkein Esto Saavutettavissa Määritys) kuvattu Bernardi et al. vuonna 2011 .

menetelmät tämän eston määritys pidetään edelleen kokeellista, vaikka vastaavia inhibition määrityksissä on sovellettu aiemmin useat tekijät. Esimerkiksi meidän tutkimuksen yksikkö tapauksessa potilaan allerginen auringonkukan siemen oli kuvattu, missä ImmunoCap ISAC esto testiä käytettiin osoittamaan rajat reaktiivisuus. Esto testi Art v 1, Art v 3, ja Jug r 3 oli estää proteiinin läsnä auringonkukan siemen allergeenia uutetta .,

suorita estokoe kypsä mango hedelmiä ostettiin paikallinen ruokakauppa, joka tarjoaa eco ruokaa. Hedelmät pestiin, kuorittiin ja kuoppa poistettiin syötävän osan saamiseksi. Proteiinipitoinen selluuute saatiin aiemmin kuvatuilla menetelmillä . Kuutioidut hedelmät pakastettiin nestemäiseen typpeen ja sekoitettiin sileäksi massaksi. Massa oli sitten sekoitetaan 1 M NaCl suhteessa 2:1 (2:1, v/v) ja vasemmalle 2-8 °C: ssa 24 h. Tuon ajan jälkeen seos sentrifugoidaan huoneenlämmössä 12000×g 60 min. Uute saatiin sisältäen 2,35 mg/dL proteiinia., Esto testata saatu uute sekoitetaan potilaan veren seerumin, jonka voimakkuus on suhteessa 1:1, ja inkuboitiin 2-8 °C: ssa 24 h . Samanaikaisesti valmistettiin sokea näyte seerumin laimentamisen huomioon ottamiseksi. Tätä tarkoitusta varten, potilaan veren seerumin oli sekoitettu 1 M NaCl (1:1, v/v), ja sitten inkuboitiin 2-8 °C: ssa 24 h. Tuon ajan jälkeen, IgE-tason spesifinen mugwort, Taide v1, ja mango oli päättänyt, valmis materiaali, sekä estää ja laimennettu, ja esto suhde oli laskettu.,

esto testi saavutimme seuraavat tulokset—perustaso pujon sIgE potilaan seerumin oli 144.32 kU/l, sokea näyte, sen jälkeen laimentamalla se 1 M NaCl 1:1, pitoisuus sIgE oli 72.16 kU/L. inkubaation Jälkeen potilaan seerumin kanssa mango allergeenia uutetta taso pujon IgE oli 48.81 kU/L. Se oli näin osoittanut, että mango-allergeeni uute esti sitovan pujon IgE, jonka 32.38%.

perustaso Taiteen v 1 sIgE potilaan seerumin oli 99,8 kU/L., Sokea näyte, sen jälkeen laimentamalla se 1 M NaCl 1:1, pitoisuus sIgE oli 49.9 kU/L. inkubaation Jälkeen potilaan seerumin kanssa mango allergeenia uutetta tason Taide-v 1-IgE oli 35,2 kU/L. Se oli näin osoittanut, että mango-allergeeni uute estää IgE: Art v 1 29.5%. Suoritettujen diagnostisten toimenpiteiden perusteella osoitettiin, että potilaan oireet voivat johtua mangon allergeenien ja Art V 1: n välisestä ristireaktiosta. Inhibitiotestin tulokset on esitetty kuvassa. 1.

Kuva., 1

Tulokset esto testata mango-uute

Johtuu siitä, että tämä inhibitio-testi oli kokeellinen menetelmä, ja aiemmin kuvattu protokolla oli muutettu mukana tässä tapauksessa estää testin mukaan eri pöytäkirja on tehtävä, jotta antaa lopullisen vahvistuksen rajat allergia. Potilaan seerumia inkuboitiin mangohedelmän allergeeniuutteella Immunokap-matriisin avulla., ImmunoCap esipestiin neljä kertaa: kahdesti pesutyöskentelyn Immunokapilla ja kahdesti neutraalilla pH-fosfaattipuskurilla. Näin valmistettuun Immunokapseliin lisättiin 50 µL testattua seerumia, jota inkuboitiin huoneenlämmössä 1 tunnin ajan ja sentrifugoitiin 1500×g: n lämpötilassa 2 minuutin ajan. Saadut vasta-köyhdytettyä seerumin, ja natiivi seerumin analysoitiin läsnäolo Taiteen v 1 allergeeni component käyttäen ImmunoCap menetelmä.

perustaso Taiteen v 1 sIgE potilailla, seerumin oli 99,8 kU/L., Tällöin potilaan seerumia ei laimennettu, joten negatiivinen kontrolli ei ollut tarpeen. Inkuboinnin jälkeen potilaan seerumin kanssa ImmunoCap mango matriisi tason Taide-v 1-IgE oli 56,5 kU/L. tämän seurauksena se oli osoittanut, että ImmunoCap mango matriisi esti sitovan Taide-v 1-IgE, jonka 43.4%. Nämä tulokset on esitetty kuvassa. 2.

Kuva. 2

Tulokset eston kanssa mango allergeeni on ImmunoCap matriisi