uso previsto
Hardy Diagnostics el Agar de sal de manitol (MSA) se recomienda para su uso como un medio selectivo y diferencial para el aislamiento de estafilococos patógenos.
resumen
Koch reportó el uso de un medio que contiene cloruro de sodio al 7,5% como agente selectivo para el aislamiento de estafilococos en 1942.,(5) los resultados fueron confirmados y mejorados por Chapman en 1945 mediante la adición de esta concentración de sal al Agar de manitol Rojo fenol, ya que Staphylococcus aureus generalmente fermenta manitol.(3) los estafilococos no patógenos generalmente muestran un crecimiento menos exuberante en este medio después del período de incubación.
un cloruro de sodio, concentración de 7,5%, es casi diez veces la concentración habitual observada en la mayoría de los medios. Sirve para inhibir la mayoría de los organismos excepto estafilococos en especímenes de flora mixta. El extracto de carne y las peptonas suministran los elementos esenciales carbono, nitrógeno y azufre., El manitol se añade para mostrar las capacidades de fermentación de los organismos. La producción de ácido como resultado de la fermentación de este azúcar resulta en la formación de colonias con una zona amarilla. Aquellos estafilococos que no fermentan manitol muestran una zona púrpura o roja alrededor de las colonias.
manitol Salt Agar (MSA) es recomendado por la Asociación Americana de Salud Pública para la enumeración de estafilococos en alimentos y productos lácteos.,(9,10)
FORMULA
Ingredients per liter of deionized water:*
Sodium Chloride | 75.0gm |
Proteose Peptone | 10.0gm |
Mannitol | 10.0gm |
Beef Extract | 1.0gm |
Phenol Red | 0.025gm |
Agar | 15.0gm |
Final pH 7.4 +/- 0.2 at 25ºC.,
* ajustado y / o complementado según sea necesario para cumplir los criterios de rendimiento.
almacenamiento y vida útil
almacenamiento: tras la recepción almacenar a 2-8ºC lejos de la luz directa. Los medios no deben usarse si hay signos de deterioro (encogimiento, agrietamiento o decoloración), contaminación o si la fecha de vencimiento ha pasado. El producto es sensible a la luz y la temperatura; proteja de la luz, el calor excesivo, la humedad y la congelación.
precauciones
recolección de muestras: Consulte las referencias listadas para obtener información sobre la recolección de muestras.,(1,2,4,7) el material infeccioso debe enviarse directamente al laboratorio sin demora y protegerse del calor y el frío excesivos. Si se produce un retraso en el procesamiento, la muestra debe inocularse en un medio de transporte adecuado y refrigerarse hasta la inoculación.
método de uso: permita que las placas se calienten a temperatura ambiente y que la superficie de agar se seque antes de inocular. Inocular fuertemente y rayar el espécimen tan pronto como sea posible después de la recolección. Si el espécimen a ser cultivado está en un hisopo, ruede el hisopo sobre un área pequeña de la superficie de agar., Raya para el aislamiento con un bucle estéril. Incubar las placas aeróbicamente a 35-37ºC durante 24-48 horas. Examinar la morfología colonial.
interpretación de los resultados
los fermentadores de manitol como S. aureus aparecen como colonias amarillas con zonas amarillas en los medios. Los fermentadores no manitol como S. epidermidis, si están presentes, tendrán colonias de color rosa claro a rojo sin cambio de color amarillo en el medio. Consulte las referencias listadas para la identificación de la morfología de la colonia y otras pruebas bioquímicas necesarias para la identificación.,(1,2,4,7)
limitaciones
La mayoría de los organismos distintos de los estafilococos son inhibidos por la alta concentración de sal que se encuentra en el Agar salino de manitol, a excepción de algunos organismos marinos halófilos.
materiales requeridos pero no proporcionados
suministros y equipos microbiológicos estándar como bucles, hisopos, barras aplicadoras, otros medios de cultivo, incineradores, incubadoras, etc., así como reactivos serológicos y bioquímicos, no se proporcionan.,
QUALITY CONTROL
Test Organisms | Inoculation Method* | Incubation | Results | |||
Time | Temperature | Atmosphere | ||||
Mannitol Salt Agar (Cat. no., J330): | ||||||
Staphylococcus aureus ATCC® 6538 |
J | 18hr | 35°C | Aerobic | Growth; yellow colonies and media at 18-24 hours | |
Escherichia coli ** ATCC® 8739 |
B | 72hrs | 35°C | Aerobic | Partial to complete inhibition | |
Mannitol Salt Agar (Cat. no.,»>Aerobic | Partial to complete inhibition | |||||
Escherichia coli ATCC® 8739 |
A | 72hr | 30-35°C | Aerobic | Partial to complete inhibition |
USER QUALITY CONTROL
Physical Appearance
Mannitol Salt Agar (MSA) should appear clear, slightly opalescent, and pinkish-red in color.,
colonias de Staphylococcus aureus (ATCC® 25923) que crecen en Agar de sal de manitol. Incubado aeróbicamente durante 48 horas a 35ºC.
crecimiento de Proteus mirabilis (ATCC® 12453) inhibido por el Agar de sal de manitol. Incubado aeróbicamente durante 48 horas a 35ºC.
2. Tille, P. Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology, C. V. Mosby Company, St. Louis, MO.
3. Chapman, G. H. 1945. J. Bacteriol.; 50:201.
4. Isenberg, H. D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol., I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, D. C.
5. Koch, F. E. 1942. Zentr. Bakt. Labt. Orig.; 149:122.
7. Jorgensen, J. H., et al. 2015. Manual of Clinical Microbiology, 11th ed. American Society for Microbiology, Washington, D. C.
8. Quality Assurance for Commercially Prepared Microbiological Culture Media, M22. Clinical and LaboratoryStandards Institute (CLSI – formerly NCCLS), Wayne, PA.
9. Asociación Americana De Salud Pública. 1993. Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 16th ed. APHA, Washington, D.,C.
10. APHA Technical Committee on Microbiological Methods for Foods. 2001. Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 4th ed. APHA, Washington, D. C.
ATCC es una marca registrada de American Type Culture Collection.
IFU-10553
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